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Diploma en Técnicas Analíticas en Purificación de Biomoléculas

En este curso online gratuito, aprende los métodos implicados en técnicas analíticas para la depuración de biomoléculas.

Ciencia
Gratis
Las diversas técnicas y análisis que intervienen en la compleja depuración de biomoléculas se cubren en este curso online gratuito. También se hablará de la definición de cromatografía de filtración en gel y cromatografía de afinidad, que trabaja en el principio de las fuerzas de reconocimiento mutuo entre un ligando y un receptor.
  • Duración

    6-10 Horas
  • Certificación

  • Responsive

  • Editor

    NPTEL
  • Accreditation

    CPD

Descripción

Modules

Resultados

Certificación

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Description

Ser introducido en el mundo de las técnicas analíticas en la purificación de biomoléculas en este curso gratuito. Usted explorará el hecho de que la cromatografía es una técnica que permite a los científicos separar las moléculas de interés de una mezcla de crudo y descubrir qué efecto explota esta separación. Averigüe qué tipo de cromatografía lleva a que el matric tenga un grupo funcional cargado negativamente con una afinidad hacia moléculas cargadas positivamente. Usted será introducido al concepto de ‘ cromatografía de interacción hidrofóbica ’ que explota la capacidad de interacciones fuertes entre el grupo hidrofóbico unido a la matriz y los parches hidrofóbicos presentes en un analito tal como una proteína. Averigüe qué ocurre con las moléculas de agua que protegen las cadenas laterales de proteínas en presencia de una gran cantidad de sal, y descubre qué es la adición de una cantidad baja de sal a la solución de la proteína. Demostraciones, problemas, ejemplos y preguntas de evaluación en este curso basado en video guiado por instructor están diseñados para proporcionarle una base integral en este aspecto de la biología.

El curso inicia con la definición de cromatografía de filtración en gel (también conocida como cromatografía de exclusión de tamaño   o cromatografía de tamiz molecular) y los diferentes tipos de problemas que es probable que uno tenga después de empacar la columna. La elección de la columna se discutirá, dependiendo de la gama de peso molecular y el límite de presión del equipo operativo. Usted explorará el hecho de que el peso molecular y el tamaño de una proteína está relacionado con la forma de la molécula y la relación entre su peso molecular y el radio de la giración. Usted descubrirá el hecho de que la determinación del peso molecular nativo por filtración en gel en conjugación con la SDS-PAGE puede ser utilizado para determinar el estado oligomérico de la proteína. Vaya a estudiar la preparación de muestras de filtración de gel en la fase móvil y cómo la unión del ADN a la proteína induce ciertos cambios conformacionales.

A continuación, usted aprenderá que la cromatografía de afinidad trabaja en el principio de las fuerzas de reconocimiento mutuo entre un ligando y un receptor. Usted obtendrá una visión del hecho de que en el método de la cromatografía de la bio-afinidad, las biomoléculas se utilizan como un receptor presente en la matriz y explota el fenómeno biológico tal como el anticuerpo-antígeno. A continuación, descubrirá que Glutatione S-transferasa (GST) utiliza glutatión como sustrato para catalizar las reacciones de conjugación con fines de desintoxicación xenobiótica. Esta proteína de fusión GST se produce mediante la recombinación de la proteína de interés con la secuencia GST presente en el vector de expresión. Se le enseñará que la biotinilación de los anticuerpos permite la inmovilización de anticuerpos en la orientación correcta sobre las cuentas de vidrio recubiertas de estreptomicina. Descubrirá que una columna de afinidad también se puede utilizar como una herramienta para estudiar o aislar a un compañero que interactúa de una proteína determinada. Finalmente, usted estudiará la cromatografía de filtración en gel, las interacciones del receptor y del ligando, la cromatografía de bioafinidad y la cromatografía de afinidad metálica. Este curso será de interés para los estudiantes de biotecnología, o para aquellos profesionales en biotecnología experimental.

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Learning Outcomes

Tras la finalización satisfactoria de este curso, debe ser capaz de:


  • Discute el mecanismo de separación en la cromatografía
  • Explicar las diferentes precauciones a tomar mientras utiliza la máquina de cromatografía
  • Describir las propiedades de una molécula de proteína
  • Esquema de los pasos de purificación de cromatografía de intercambio de hierro
  • Discutir las matrices de filtración de gel popular
  • Describir cómo se lleva a cabo un experimento de empaquetado de columnas
  • Discutir las ventajas de la cromatografía de afinidad
  • Explicar los pasos en el proceso de purificación de anticuerpos
  • Listar los pasos implicados en la afinidad de metal proceso de purificación de proteínas
cromatografía

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