Este curso detallado le presenta el mundo de las prácticas profesionales de laboratorio y la electroforesis. Explorará el hecho de que las buenas prácticas de laboratorio (BPL) incorporan un conjunto de principios que proporcionan un marco dentro del cual se planifican, realizan, monitorean, registran, informan y archivan los estudios de laboratorio. Se analizarán los tres niveles de categorización del enfoque de Rosch. Conoceremos el concepto de capacidad amortiguadora, una medida cuantitativa de la resistencia a los cambios de pH de una solución que contiene un agente amortiguador en relación con un cambio en la concentración de ácidos o álcalis. También aprenderá que la electroforesis en el sistema de electroforesis vertical se realiza de forma discontinua con un tampón en el tanque superior e inferior, mientras que la electroforesis en el sistema de gel horizontal se realiza de forma continua. Descubrirás cómo se utiliza la curva de calibración de los geles nativos y de desnaturalización para determinar el peso molecular de la proteína. Las demostraciones, los problemas, los ejemplos y las preguntas de evaluación de este curso en vídeo dirigido por un instructor están diseñados para proporcionarle una base integral que le permita dar
pasos serios en esta carrera.
El curso comienza con una introducción a la definición de GLP y a los diferentes niveles de categorización que contiene. A continuación, se analizará la hoja de datos de seguridad de los materiales (MSDS), en la que se mostrará cómo contiene información sobre los peligros potenciales de un material. Explorará la solución amortiguadora, que se utiliza durante los experimentos como medio para mantener el pH en un valor casi constante en una amplia variedad de aplicaciones químicas. Descubrirá que con una fuerza centrífuga y una viscosidad de líquido fijas, la velocidad de sedimentación de una partícula es proporcional a su tamaño y a la diferencia entre la densidad de la partícula y la densidad de la solución. También descubrirá que la electroforesis se refiere a un proceso electrocinético que separa las partículas cargadas de un fluido mediante un campo de carga eléctrica y las razones por las que la técnica de electroforesis no es buena para su uso en la separación y el análisis de muestras biológicas complejas.
A continuación, aprenderá que las muestras biológicas complejas se resuelven de manera eficiente en la electroforesis en gel bidimensional. Esto implica la combinación de carga y peso molecular para proporcionar una separación mucho mayor en comparación con el uso de la propiedad individual. Se dará cuenta de que, al realizar el experimento de electroforesis en gel de agarosa en la página original, la muestra que se prepara con el colorante de carga no contiene detergente ni agente desnaturalizante y, como resultado, la muestra se procesa en función de la carga. A continuación, verá que en la electroforesis horizontal en gel de poliacrilamida, la muestra biológica compleja se resuelve según su carga y, a continuación, se pasa al electrodo de contracarga. Estudie las curvas de calibración de los geles nativos y de desnaturalización antes de pasar a los sistemas de manipulación de líquidos, las estructuras secundarias del ARN, la electroforesis en gel de poliacrilamida y la polimerización en gel apilado. Este curso será de interés para los estudiantes de biotecnología o para los profesionales de la biotecnología experimental.
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