Este curso detallado le introduce en el mundo de las prácticas profesionales de laboratorio y electroforesis. Usted explorará el hecho de que una buena práctica de laboratorio (BPL) encarna un conjunto de principios que proporcionan un marco dentro del cual los estudios de laboratorio son planificados, realizados, monitoreados, registrados, reportados y archivados. Se discutirán los tres niveles de categorización del enfoque de Rosch. Se le introducirá el concepto de capacidad de almacenamiento intermedio, una medida cuantitativa de la resistencia al cambio de pH por una solución, que contiene un agente amortiguador con respecto a un cambio en la concentración de ácido o álcali. También aprenderá que la electroforesis en el sistema de electroforesis vertical se realiza de manera discontinua con un amortiguador en el tanque superior e inferior, mientras que la electroforesis en el sistema de gel horizontal se realiza de forma continua. Descubrirá cómo se utiliza la curva de calibración de los geles nativos y de desnaturalización para determinar el peso molecular de la proteína. Las demostraciones, problemas, ejemplos y preguntas de evaluación en este curso basado en vídeo guiado por el instructor, están diseñados para proporcionarle una base integral, que le permitirá dar pasos serios en esta carrera.
El curso comienza presentándole la definición de BPL y los diferentes niveles de categorización dentro de ella. Luego, se discutirá la hoja de datos de seguridad material (MSDS), mostrándole cómo contiene información sobre los peligros potenciales de un material. Usted explorará la solución tampón, que se utiliza durante los experimentos como un medio para mantener el pH a un valor casi constante en una amplia variedad de aplicaciones químicas. Usted descubrirá el hecho de que a una fuerza centrífuga fija y viscosidad líquida, la tasa de sedimentación de una partícula es proporcional a su tamaño y la diferencia entre la densidad de partículas y la densidad de la solución. También descubrirá que la electroforesis se refiere a un proceso electrocinético que separa las partículas cargadas en un fluido utilizando un campo de carga eléctrica y las razones por las que la técnica de electroforesis no es buena para su uso en la separación y análisis de muestras biológicas complejas.
A continuación, aprenderá que las muestras biológicas complejas se resuelven eficazmente en electroforesis en gel de 2-D. Esto implica la combinación de carga y peso molecular para proporcionar una separación mucho mayor en comparación con el uso de la propiedad individual. Usted obtendrá información sobre el hecho de que al realizar el experimento de electroforesis de gel de agarosa en la página nativa, la muestra que se prepara en el tinte de carga no contiene detergente o agente de desnaturalización y como resultado, la muestra se ejecuta en función de la carga. A continuación, verá que en la electroforesis de gel de poliacrilamida horizontal, la muestra biológica compleja se resuelve de acuerdo con su carga y luego se mueve al electrodo de contracarga. Estudiar las curvas de calibración de los geles nativos y de desnaturalización antes de pasar a sistemas de manejo de líquidos, estructuras secundarias en ARN, electroforesis en gel de poliacrilamida y polimerización de gel de apilado. Este curso será de interés para los estudiantes de biotecnología, o para aquellos profesionales en biotecnología experimental.
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