Ce cours en ligne gratuit vous présente le monde de la biologie moléculaire. Nous explorons le rôle de la technique de « réaction en chaîne par polymérase » qui utilise une méthode enzymatique et des conditions de cycle pour « amplifier » de nombreuses molécules d'acide double désoxyribonucléique (ADN) ayant la même taille et la même séquence. L'ADN est un acide nucléique composé de deux chaînes de blocs complémentaires qui construisent des nucléotides. Ces « nucléotides » sont composés d'un groupe phosphate, de sucres à cinq atomes de carbone et d'une base azotée. Nous expliquons le concept de « réplication de l'ADN », qui est un processus de duplication de l'ensemble du génome avant la division des cellules. Nous examinons ensuite les quatre bases azotées présentes dans l'ADN et qui sont liées de manière répétée par des liaisons hydrogène entre les bases azotées. La liaison des deux brins complémentaires est appelée « hybridation ». Les démonstrations, les problèmes, les exemples et les questions d'évaluation de ce cours vidéo dirigé par un instructeur sont conçus pour vous fournir une base complète qui vous permettra de prendre des mesures sérieuses

Le cours commence par examiner la réplication de l'ADN et la configuration de la PCR. Les amorces sont de courts segments d'ADN qui servent de point de départ à la synthèse de l'ADN. Nous étudions leurs structures secondaires et expliquons comment elles sont créées par attraction intra- ou intermoléculaire au sein de l'amorce, ce qui finit par réduire le rendement de l'amplification car la disponibilité d'amorces simple brin est limitée pour la PCR. Nous présentons l'utilisation du thermocycleur, un instrument qui réalise l'amplification de l'ADN à l'aide de la PCR. Nous précisons que les amorces doivent être conçues de telle sorte qu'il ne devrait y avoir aucune homologie, c'est-à-dire une similitude due à une ascendance partagée, dans le modèle autre que le site cible. Il en résulte une liaison et une amplification non spécifiques. Ce cours vous apprend à reconnaître les avantages de l'utilisation de la technique PCR : rapidité, facilité d'utilisation, sensibilité et robustesse par rapport aux autres techniques utilisées dans les tests de diagnostic clinique

La technologie PCR est devenue la base d'un large éventail de tests de diagnostic clinique pour divers agents infectieux et peut détecter la présence de maladies infectieuses dans des échantillons de sang. Nous vous montrons comment l'apparition d'un frottis présentant des bandes visibles indique que l'ADN génomique a été complètement digéré et convient au « Southern » blot, contrairement au Northern blot qui est utilisé pour détecter l'ARN. Nous donnons deux exemples de méthodes utilisées dans le séquençage de l'ADN : Sanger et Maxam Gilbert. Nous terminons en accordant une plus grande attention aux techniques de PCR, aux méthodes de séquençage et de transfert, à l'amplification de l'ADN et à la localisation de la PCR dans la culture tissulaire. Ce cours convient aux étudiants en biotechnologie en herbe, aux personnes qui souhaitent travailler en tant que biologiste ou même à celles qui souhaitent simplement comprendre le fonctionnement de notre corps à son niveau le plus fondamental