Comprendere la biologia molecolare

Questo corso gratuito online ti introduce nel mondo della biologia molecolare. Esploriamo il ruolo della tecnica della «reazione a catena della polimerasi» che utilizza un metodo enzimatico e una condizione ciclica per «amplificare» molte molecole di acido desossiribonucleico doppio (DNA) che hanno le stesse dimensioni e sequenza. Il DNA è un acido nucleico composto da due catene costitutive di nucleotidi complementari. Questi «nucleotidi» sono costituiti da un gruppo fosfato, zuccheri a cinque atomi di carbonio e una base azotata. Spieghiamo il concetto di «replicazione del DNA», che è un processo di duplicazione dell'intero genoma prima della divisione delle cellule. Esaminiamo quindi le quattro basi azotate che si trovano nel DNA e sono collegate in uno schema ripetuto mediante legami a idrogeno tra le basi azotate. Il collegamento dei due filamenti complementari è chiamato «ibridazione». Le dimostrazioni, i problemi, gli esempi e le domande di valutazione di questo corso basato su video con istruttore sono progettati per fornirti una base completa che ti consenta

Il corso inizia esaminando la replicazione del DNA e la configurazione della PCR. I primer sono brevi tratti di DNA che fungono da punto di partenza per la sintesi del DNA. Studiamo le loro strutture secondarie e spieghiamo come vengono create dall'attrazione intra o intermolecolare all'interno del primer, che alla fine riduce la resa dell'amplificazione poiché la disponibilità di primer a filamento singolo è limitata per la PCR. Mostriamo l'uso del termociclatore, uno strumento che effettua l'amplificazione del DNA mediante la PCR. Chiariamo che i primer dovrebbero essere progettati in modo tale che non vi sia omologia, che è una somiglianza nata da un'ascendenza condivisa, all'interno del modello diverso dal sito bersaglio. Ciò si traduce in un legame e un'amplificazione non specifici. Questo corso insegna a riconoscere i vantaggi dell'uso della tecnica PCR: velocità, facilità d'uso, sensibilità e robustezza rispetto ad altre tecniche utilizzate

La tecnologia PCR è diventata la base per un ampio spettro di test diagnostici clinici per vari agenti infettivi e può rilevare la presenza di malattie infettive nei campioni di sangue. Vi mostriamo come la comparsa di uno striscio con bande visibili indichi che il DNA genomico è stato completamente digerito ed è adatto al «Southern blotting», a differenza del Northern blotting utilizzato per rilevare l'RNA. Forniamo due esempi di metodi utilizzati nel sequenziamento del DNA: Sanger e Maxam Gilbert. Concludiamo con maggiore attenzione alle tecniche di PCR, ai metodi di sequenziamento e blotting, all'amplificazione del DNA e alla localizzazione della PCR nella coltura tissutale. Questo corso è adatto agli aspiranti studenti di biotecnologia, alle persone che cercano di lavorare come biologi o anche a coloro che vogliono semplicemente capire come funziona il nostro corpo al