Diplôme en pratiques de laboratoire et en électrophorèse

Ce cours détaillé vous présente le monde des pratiques professionnelles de laboratoire et de l'électrophorèse. Vous découvrirez que les bonnes pratiques de laboratoire (BPL) incarnent un ensemble de principes qui fournissent un cadre dans lequel les études de laboratoire sont planifiées, réalisées, contrôlées, enregistrées, signalées et archivées. Les trois niveaux de catégorisation de l'approche Rosch seront discutés. Vous serez initié au concept de capacité tampon, une mesure quantitative de la résistance au changement de pH d'une solution contenant un agent tampon par rapport à une variation de la concentration en acide ou en alcali. Vous apprendrez également que l'électrophorèse dans le système d'électrophorèse verticale fonctionne de manière discontinue avec un tampon dans les réservoirs supérieur et inférieur, tandis que l'électrophorèse dans le système de gel horizontal fonctionne en continu. Vous découvrirez comment la courbe d'étalonnage des gels natifs et de dénaturation est utilisée pour déterminer le poids moléculaire de la protéine. Les démonstrations, les problèmes, les exemples et les questions d'évaluation de ce cours vidéo dirigé par un instructeur sont conçus pour vous fournir une base complète qui vous permettra de franchir des étapes sérieuses

Le cours commence par vous présenter la définition des BPL et les différents niveaux de catégorisation qui s'y rattachent. Ensuite, la fiche de données de sécurité des matériaux (MSDS) sera discutée, vous montrant comment elle contient des informations sur les dangers potentiels d'un matériau. Vous explorerez la solution tampon, qui est utilisée lors des expériences pour maintenir le pH à une valeur presque constante dans une grande variété d'applications chimiques. Vous découvrirez qu'à force centrifuge et viscosité liquide fixes, la vitesse de sédimentation d'une particule est proportionnelle à sa taille et à la différence entre la densité des particules et la densité de la solution. Vous découvrirez également que l'électrophorèse fait référence à un processus électrocinétique qui sépare des particules chargées dans un fluide à l'aide d'un champ de charge électrique et les raisons pour lesquelles la technique d'électrophorèse n'est pas adaptée à la séparation et à l'analyse d'échantillons biologiques complexes

Ensuite, vous apprendrez que les échantillons biologiques complexes sont résolus efficacement par électrophorèse sur gel 2D. Cela implique la combinaison de la charge et du poids moléculaire pour fournir une séparation beaucoup plus grande par rapport à l'utilisation de la propriété individuelle. Vous comprendrez que lors de l'expérience d'électrophorèse sur gel d'agarose sur la page d'origine, l'échantillon préparé dans le colorant de chargement ne contient ni détergent ni agent dénaturant et, par conséquent, l'échantillon fonctionne en fonction de la charge. Vous verrez alors que lors de l'électrophorèse horizontale sur gel de polyacrylamide, l'échantillon biologique complexe est résolu en fonction de sa charge, puis déplacé vers l'électrode de contre-charge. Étudiez les courbes d'étalonnage des gels natifs et de dénaturation avant de passer aux systèmes de manipulation des liquides, aux structures secondaires de l'ARN, à l'électrophorèse sur gel de polyacrylamide et à la polymérisation sur gel empilé. Ce cours intéressera les étudiants en biotechnologie ou les professionnels de la biotechnologie expérimentale.