Este curso detalhado apresenta você para o mundo das práticas de laboratório profissional e eletroforese. Você explorará o fato de que a boa prática de laboratório (GLP) incorpora um conjunto de princípios que proporcionam um quadro dentro do qual os estudos de laboratório são planejados, realizados, monitorados, registrados, relatados e arquivados. Os três níveis de categorização da Abordagem do Rosch serão discutidos. Você será introduzido no conceito de capacidade tampão, uma medida quantitativa da resistência à mudança de pH por uma solução, contendo um agente de buffering com relação a uma alteração na concentração de ácido ou alcalino. Você também aprenderá que a eletroforese no sistema de eletroforese vertical executa de forma descontínua com um tampão no tanque superior e inferior, enquanto que a eletroforese no sistema de gel horizontal realiza-se continuamente. Você descobrirá como a curva de calibração a partir de gels nativas e de desnaturação são usadas para determinar o peso molecular da proteína. Demonstrações, problemas, exemplos e questões de avaliação neste curso baseado em vídeos guiados pelo instrutor, são projetados para lhe proporcionar uma base abrangente, o que permitirá que você dê passos sérios nessa carreira.
O curso começa introduzindo você para a definição de GLP e os diferentes níveis de categorização dentro dele. Em seguida, será discutida a ficha de dados de segurança do material (MSDS), mostrando como ela contém informações sobre os perigos potenciais de um material. Você explorará a solução tampão, que é usada durante os experimentos como um meio de manter o pH em um valor quase constante em uma grande variedade de aplicações químicas. Você descobrirá o fato de que em uma força centrífuga fixa e viscosidade líquida, a taxa de sedimentação de uma partícula é proporcional ao seu tamanho e à diferença entre a densidade de partículas e a densidade da solução. Você também descobrirá que a eletroforese refere-se a um processo eletrocinético que separa partículas carregadas em um fluido usando um campo de carga elétrica e as razões pelas quais a técnica de eletroforese não é boa para uso na separação e análise de amostras biológicas complexas.
Em seguida, você aprenderá que as amostras biológicas complexas são eficientemente resolvidas em eletroforese de gel 2-D. Isso envolve a combinação de carga e peso molecular para proporcionar uma separação muito maior em comparação com o uso da propriedade individual. Você ganhará insight sobre o fato de que ao realizar o experimento de eletroforese de gel de agarose na página nativa, a amostra que é preparada no corante de carga não contém detergente ou agente de desnaturação e como resultado, a amostra é executada com base no comando. Você verá então que na eletroforese de gel de poliacrilamida horizontal, a amostra biológica complexa é resolvida de acordo com a sua carga e, em seguida, movida para o eletrodo de carga do contador. Estude curvas de calibração de gels nativas e de desnaturação antes de se mover sobre sistemas de manejo de líquido, estruturas secundárias em RNA, eletroforese de gel de poliacrilamida e polimerização em gel de empilhamento. Este curso será de interesse para estudantes de biotecnologia, ou aqueles profissionais em biotecnologia experimental.
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