Este curso detalhado apresenta o mundo das práticas laboratoriais profissionais e da eletroforese. Você explorará o fato de que as boas práticas de laboratório (GLP) incorporam um conjunto de princípios que fornecem uma estrutura dentro da qual os estudos de laboratório são planejados, executados, monitorados, registrados, relatados e arquivados. Os três níveis de categorização da Abordagem Rosch serão discutidos. Você será apresentado ao conceito de capacidade de tampão, uma medida quantitativa da resistência à mudança de pH por uma solução, contendo um agente tamponante em relação a uma mudança na concentração de ácido ou álcali. Você também aprenderá que a eletroforese no sistema de eletroforese vertical funciona de forma descontínua com um tampão no tanque superior e inferior, enquanto a eletroforese no sistema de gel horizontal funciona continuamente. Você descobrirá como a curva de calibração dos géis nativos e de desnaturação é usada para determinar o peso molecular da proteína. Demonstrações, problemas, exemplos e perguntas de avaliação neste curso baseado em vídeo ministrado por instrutor foram elaborados para fornecer a você uma base abrangente, que permitirá que você dê passos sérios nessa carreira
.
O curso começa apresentando a definição de GLP e os diferentes níveis de categorização dentro dela. Em seguida, a ficha de dados de segurança do material (MSDS) será discutida, mostrando como ela contém informações sobre os riscos potenciais de um material. Você explorará a solução tampão, que é usada durante experimentos como um meio de manter o pH em um valor quase constante em uma ampla variedade de aplicações químicas. Você descobrirá o fato de que com uma força centrífuga fixa e viscosidade do líquido, a taxa de sedimentação de uma partícula é proporcional ao seu tamanho e à diferença entre a densidade da partícula e a densidade da solução. Você também descobrirá que a eletroforese se refere a um processo eletrocinético que separa partículas carregadas em um fluido usando um campo de carga elétrica e as razões pelas quais a técnica de eletroforese não é boa para uso na
separação e análise de amostras biológicas complexas.A
seguir, você aprenderá que as amostras biológicas complexas são resolvidas com eficiência na eletroforese em gel 2D. Isso envolve a combinação de carga e peso molecular para fornecer uma separação muito maior em comparação com o uso da propriedade individual. Você terá uma ideia do fato de que, ao conduzir o experimento de eletroforese em gel de agarose na página nativa, a amostra preparada no corante de carregamento não contém detergente ou agente desnaturante e, como resultado, a amostra é executada com base na carga. Você verá então que na eletroforese horizontal em gel de poliacrilamida, a amostra biológica complexa é resolvida de acordo com sua carga e então movida para o eletrodo de contra-carga. Estude as curvas de calibração de géis nativos e de desnaturação antes de passar para sistemas de manuseio de líquidos, estruturas secundárias em RNA, eletroforese em gel de poliacrilamida e polimerização em gel de empilhamento. Este curso será de interesse para estudantes de biotecnologia ou profissionais em biotecnologia experimental.
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