Diploma in Tecniche Analitiche in Purificazione di Biomolecole

Sii introdotto al mondo delle tecniche analitiche nella purificazione delle biomolecole in questo corso gratuito. Esplorerai il fatto che la cromatografia è una tecnica che permette agli scienziati di separare molecole di interesse da una miscela grezza e scoprire quale effetto sfruttare questa separazione. Scopri quali tipo di cromatografia porta alla matric avere un gruppo funzionale imputato negativamente con un'affinità verso molecole cariche positivamente. Sarete introdotti al concetto di "cromatografia interazione idrofobica" che sfrutta la capacità di forti interazioni tra il gruppo idrofobico collegato alla matrice e le patch idrofobiche presenti su un'analita come una proteina. Scopri cosa succede alle molecole d'acqua schermando le catene laterali proteiche in presenza di una quantità elevata di sale, e scopri quale sia l'aggiunta di una bassa quantità di sale alla soluzione proteica. Dimostrazioni, problemi, esempi e domande di valutazione in questo corso di video - based sono progettati per fornirti una fondazione completa in questo aspetto della biologia.

Il corso si spezza con la definizione di cromatografia a filtrazione in gel (anche nota come cromatografia ad esclusione della dimensione o la cromatografia a setaccio molecolare) e i diversi tipi di problemi che si rischia di avere dopo l'imballaggio della colonna. La scelta della colonna sarà discussa, a seconda della gamma di peso molecolare e del limite di pressione delle apparecchiature operative. Esplorerai il fatto che il peso molecolare e la grandezza di una proteina sono legati alla forma della molecola e al rapporto tra il suo peso molecolare e il raggio di gesso. Scoprirete il fatto che la determinazione del peso molecolare nativo mediante filtrazione in gel in coniugazione con la SDS - PAGE può essere utilizzata per determinare lo stato oligomerico della proteina. Proseguire nello studio preparare campioni di filtrazione in gel nella fase mobile e come il legame del DNA alla proteina induca determinate modifiche conformazionali.

Prossimo, imparerai che la cromatografia affinità funziona sul principio delle forze di mutuo riconoscimento tra un legante e un recettore. Guadagnerai intuito il fatto che nel metodo della cromatografia bio - affinità, le biomolecole sono usate come recettori presenti sulla matrice e sfrutta il fenomeno biologico come l'antibody - antigene. Scoprirete poi che Glutathione S - transferasi (GST) utilizza il glutatione come substrato per catalizzare le reazioni di coniugazione per scopi di detossificazione xenobiotica. Questa proteina GST fusion è prodotta dalla ricombinazione della proteina di interesse con la sequenza GST presente nel vettore di espressione. Vi verrà insegnato che la biotinilazione degli anticorpi consente l'immobilizzazione degli anticorpi nel corretto orientamento sulle perle di vetro rivestito in streptomicina. Scoprirete che una colonna di affinità può essere utilizzata anche come strumento per studiare o isolare un partner interagendo di una particolare proteina. Infine, si studierà la cromatografia in gel filtrante, il recettore e le interazioni di legatura, la cromatografia bio - affinità e la cromatografia ad affinità in metallo. Questo corso interesserà gli studenti delle biotecnologie, o quei professionisti in biotecnologie sperimentali.