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Introdução à Biologia Celular
Olá pessoal, esta é a doutora Michelle Trivedi do departamento de biociências e bioengenharia IIT Guwahati, e hoje vamos começar nosso novo tópico e esse novo tópico está sobre a biologia celular. Então, quando falamos sobre as células, na verdade vamos falar sobre os diferentes tipos de células, seja a célula procariótica ou a célula eucariótica. A primeira pergunta vem, como, e diferentes tipos de células estão presentes no mundo e como podemos ser capazes de utilizá-las para responder algumas das questões, ou problemas científicos. (Consulte O Tempo De Deslizamento: 01:39) Então, você tem os 2 tipos diferentes de células como células procarióticas, como as bactérias ou células eucarióticas dentro da célula eucariótica, você tem as células animais, você tem as células vegetais, você tem o fermento e todas essas células estão tendo os diferentes tipos de aplicações no que diz respeito aos experimentos científicos, mas a da grande questão é que todas essas células são necessárias para serem replicadas ou necessárias para se propagar antes de serem usadas para experimentos científicos. Então, como e quais são as diferentes etapas algumas podem ser usadas para se propagar, e multiplicar as células. (Consulte O Tempo De Deslizamento: 02:26) Então, a mídia de crescimento, o que você realmente é pode ser usado para propagar se é uma célula procariótica, ou a célula eucariótica é diferente, mas a exigência básica desses diferentes tipos de células são iguais. Assim, é necessária a mídia de crescimento para o crescimento e a multiplicação dos organismos para a realização de uma bioquímica assim como a biofísica sob condições bioquímicas e biofísicas adequadas. O que significa a bioquímica significa que as condições nutricionais tais como fornecidas pelo uso de vários meio nutrientes, dependendo das necessidades especiais os diferentes tipos de mídias foram desenvolvidas para que o sistema de expressão atinente a multiplicação do crescimento e sobreexpressão das proteínas. Por exemplo, se um organismo é preciso estar crescendo e multiplicar-se em número. Exigia as proteínas, que na verdade são fornecidas ou que são realmente formadas pelos aminoácidos e estes aminoácidos são considerados como o bloco de construção o que significa que requer as proteínas para construir o novo. Ela requer uma proteína para a construção das novas organelas ou novas estruturas. Da mesma forma, requer os carboidratos, o exemplo clássico do carboidrato é o açúcar. E o açúcar é a fonte da energia. Por isso, requer esse carboidrato por conduzir a energia, essa energia que exigia para rodando suas reações metabólicas ou alguns outros processos celulares. Da mesma forma, requer que os lipídeos que lipídeos estejam realmente presentes na forma do ácido graxo e os ácidos graxos sejam também necessários para fornecer a energia. E aí também requer o DNA e o RNA que são feitos de nucleotídeos. E esses nucleotídeos estão sendo responsáveis por ou formar o genoma, ou responsável pelo RNA mensageiro, o que se vê no final, é que independentemente de se estar exigindo a proteína, carboidrato, lipídios, DNA ou RNA e seus constituintes são diferentes, mas para sintetizar essas moléculas, requer os blocos de construção. Por exemplo, no caso da proteína requerem carboidrato. Ela requer o carbono, o hidrogênio, o oxigênio, o nitrogênio e o enxofre. Assim, se você fornecer um organismo, uma fonte, através da qual ele pode realmente ser capaz de retirar o carbono, hidrogênio, nitrogênio, oxigênio e enxofre, ele poderia ser capaz de utilizar essas fontes e poderia ser capaz de sintetizar as proteínas com a ajuda de sintetizar os diferentes tipos de aminoácidos. Da mesma forma, requer o carbono, o hidrogênio e o oxigênio para sintetizar o açúcar. E similarmente você pode ver que para os lipídeos, ele requer um carbono, hidrogênio, oxigênio, fósforo e enxofre, e também requer o carbono, o hidrogênio e o oxigênio, nitrogênio e fósforo. Fora estes também requer os minerais como os diferentes tipos de minerais, e também assim como as vitaminas para executar sua reação metabólica. Porque todos esses minerais assim como as vitaminas significa fazer parte de algumas das enzimas, que são necessárias para executar as reações metabólicas como a glicólise, ciclo de Krebs e cadeia de transporte de elétrons para não só produzir a energia. Mas também para produzir tipos diferentes de metabólitos e todos esses metabólitos vão ser utilizados em diferentes tipos de reações. Então, que será capaz de sintetizar o novo composto e esses novos compostos vão ser usados para diferentes tipos de finalidades, como a construção dos novos blocos de construção, ou vai ser usado para fins de defesa x ou também é utilizado na síntese da proteína que vão participar da multiplicação do organismo de um organismo para outro organismo. Por isso, considerando todos esses requisitos, assim as pessoas desenvolveram diferentes tipos de mídia de crescimento para diferentes tipos de organismos. Então, vamos discutir sobre tudo isso. (Consulte Slide Time: 06:48) Então, a respeito dos diferentes tipos de mídia de microbiologia como mídia de microbiologia significa a mídia que é necessária para executar a propagação das células procarióticas, o que você precisa é o aminoácido, tão aminoácido nitrogênio, que você obterá dos peptonos ou hidrolisados proteicos ou infusões e extratos, então você requer os fatores de crescimento que é adquirido dos extratos de sangue, soro e levedura. Então você requer fonte de energia como o carbono, então ele requer álcool e carboidratos, então você requer o buffer porque se você preparar uma mídia o seu pH também deve ser importante. É por isso que você exige os fosfatos, acetatos e citrinos. Em seguida, você exige os minerais e metais. Por isso, fosfato, sulfato, magnésio e cálcio e então você exige dos agentes seletivos como produtos químicos, antimicrobianos e tintas. Em seguida, você requer algum tempo o indicador dyes, para que você consiga monitorar a mudança no pH dessa mídia de microbiologia específica. Então, nesse caso, você adiciona o vermelho do fenol assim como o vermelho neutro, e se você quer fazer a mídia sólida, então você também tem que adicionar os agentes de gelling. Assim, o agente de geleia poderia ser um ágar-ágar, gelatina ou o gel de sílica e baseado em manter tudo isso em combinações de permutação. Então, as pessoas desenvolveram os diferentes tipos de mídia de microbiologia. (Consulte Slide Time: 08:07) Então, estes são como mídia definida como mídia M9 ou mídia M63, ou eles são a mídia composta ou a mídia mais complicada como a mídia do LB ou a mídia TB ou mídia YT. A diferença entre a mídia definida versus a mídia complicada é que a mídia definida tem uma composição definida em termos do, qual é o nível de fosfato de hidrogênio, fosfato de potássio e cloreto de sódio ou cloreto de amônio. Comparado a isso, se você vir a mídia do LB, ele realmente contém o extrato de levedura peptona e NaCl, o que realmente significa que você não pode controlar a composição dessa mídia específica porque você não sabe o que são os componentes estão presentes naquele peptona, quais são os componentes estão presentes no extrato de levedura e assim por diante. Então, é por isso que em uma mídia definida você usa apenas quando na verdade você gostaria de otimizar algum processo. Porque o da grande questão com a mídia de definição é que ela não é uma mídia muito rica, exige. É muito você sabe que só contém os buffers e sal e fonte de açúcar. Então, ele só fornece aos constituintes átomos ou sais constituintes, que na verdade o organismo tem que processar para sintetizar, enquanto que, neste caso, você está realmente fornecendo os metabólitos. Então, eles são o organismo vai pegar esses metabólitos e então, na verdade, podem contornar múltiplas vias para sintetizar as moléculas de uma forma muito rápida. Fora que essas medias são muito, muito nenhuma mídia definida versus a mídia rica também está sendo usada de forma controlada. Então, que você será capaz de fazer as diferentes perguntas. Por exemplo, a mídia definida pode ser usada se você quiser entender a absorção de diferentes tipos de fontes de açúcares. Então, isso não pode ser feito com a mídia rica. (Consulte Slide Time: 10:16) Então, como preparar uma mídia de microbiologia para preparação da mídia de microbiologia dissolveu o componente em um 1 litro de água destilada, cobria a parte superior da classe com o plugue de algodão, e então você autoclave a solução a 121 graus Celsius por 20 minutes minutos, você pode tomar as precauções enquanto faz a mídia de microbiologia. O que você pode fazer é ter que manter a proporção de volume de mídia e o frasco de cultura, o que é realmente necessário para a aviação. Porque todo organismo quando cresce, requer uma certa quantidade de oxigênio para a sua respiração. Então, para isso você tem que manter uma certa proporção, ou certa. Por isso, o frasco em que você vai preparar a mídia tem que ser proporcional à quantidade de mídia o que você vai preparar. Em seguida, os componentes da mídia são higroscópicos e enquanto pesam você evita a umidade, a loja em um local fresco e seco. Da mesma forma, enquanto a autoclaving abrem a autoclave apenas quando está fria porque se não estiver fria, então ela vai realmente ter a água quente assim como os vapores quentes. E isso realmente pode causar as lesões queimadas. Da mesma forma você pode ter o charanel dos componentes da mídia para que você não aqueça muito ou você não deve fazer muita autoclagação. A mídia sólida deve ser pousada no lugar uma vez que esfrie até 50 graus. Isso é importante se você estiver realmente adicionando o antibiótico. Assim, se a sua mídia estiver contendo os antibióticos, então você deve deixar a mídia sólida para ser resfriada o suficiente para que, ao adicionar os antibióticos, o antibiótico não deva ser inativado, os vários antibióticos ou suplementos de nutrientes devem ser adicionados à mídia quando a temperatura for inferior a 50 graus Celsius. Então, isso tudo é sobre a maneira teórica de fazer a mídia de microbiologia com o propósito de te dar uma experiência virtual. (Vídeo Começa: 12:12) Eu gostaria de levá-lo para dentro do meu laboratório, e este clipe está sendo preparado em nosso laboratório para demonstrar como preparar uma mídia de microbiologia. E este clipe foi preparado pelo de meu aluno cujo nome é o Banish de Suram. E o que você verá é que o Banish lhe explicou os muitos aspectos de preparação da mídia de microbiologia, e assim como quais são as diferentes precauções que você deve tomar. Neste vídeo, estamos demonstrando como preparar caldo de cultura bacteriana, preparando o caldo de cultura precisamos de 3 componentes, um é o peptone, extrato de levedura e cloreto de sódio. Para 100 ml de caldo de cultura precisamos de 1 grama de peptona, 0,5 gramas de extrato de levedura e 1 grama de cloreto de sódio. Vou pesar componentes individuais e dissolver-o com água destilada dupla. Depois, temos que autoclave a mídia. Antes que o cuidado de pesagem seja tomado, a espátula é limpa e o equilíbrio é tomado. Após pesagem temos que limpar a espátula e mantê-la em posição original. E durante a pesagem devem ser tomados os cuidados para evitar o contato com o qualquer desta empresa de mídia. Depois de pesar os componentes da mídia temos que dissolvê-los em água destilada dupla. Por isso, inicialmente estamos dissolvendo em 80 ml de água destilada. Uma vez que os componentes se dissolvem completamente temos que fazer subir o volume até 100 ml. Enquanto é mexida temos que preparar tampões de algodão para o frasco, para preparar plugues de algodão temos que tirar 1 de camada grossa de folha de algodão com as suas 2 mãos seguradas assim deve a dissolução midiática ser completa temos que despejar no frasco. Temos que despejar 100 ml para usarmos apenas um terço do espaço menos restante está vazio. Isso é usado para propósito de aeração e também garantir a autoclação adequada. A fim de verificar se os componentes são autoclavados ou não, a mídia é autoclavada ou não vai usar indicador de esterilidade. Isso é papel é indicador de esterilidade. Temos que colar no frasco. E temos que autoclave. Se a autoclave estiver devidamente terminada então veremos as tiras brancas, entrando no preto. Então, isso é a indicação de processo de autoclave está completo. Agora os componentes da mídia estão completamente dissolvidos. Agora temos que despejar no frasco tapar a boca com plugue de algodão e enrolar esta bobina de alumínio, amarrá-la com banda de borracha. Agora isso está pronto para autoclave. Uma vez que a preparação da mídia é concluída temos que estabilizar a mídia a fim de usar mais aplicativos. Trata-se de uma autoclave típica onde se pode ver indicador de temperatura e pressão. E estes são os knobs de pressão. E este é um botão de liberação de pressão rápida, você pode usar quando você, estiver com pressa você tem que usar este, mas eu preferiria não usar este, deixe-o ir e explicar. Temos que ligar a autoclave. Então, você pode ver aqui o bulbo está brilhando, antes de manter os componentes da mídia em autoclave. Certise-se de que o aquecedor dentro da autoclave submersa com água. Agora, vou manter os componentes da mídia na cesta, que utilizamos para a autoclagação. Mantenha este dentro da autoclave. Enquanto fecha a autoclave certificam-se de que você está fechando em sentido oposto uma vez que a pressão e a temperatura chegam a 121 graus Celsius e 15 lb pressão. Você tem que segurar isso por 20 minutes minutos. Aí você tem que desligar a máquina deixe esfriar e remover os componentes. O mesmo procedimento que você tem enquanto abre, você tem que abrir em uma direção contrária. Para concluir a demonstração de vídeo, discutimos como preparar a mídia de cultura bacteriana e como preparar plugues de algodão e autoclave-a. Durante a cultura pesando os meios de comunicação temos que nos certificar de que o componente de mídia não deve ser exposto ao ar. Porque essas substâncias observadas na umidade, e tornam-se liquefação. Então, outra coisa é que para a preparação de plug de algodão temos que tomar uma única camada de algodão, então temos que dobrar. E depois de autoclaving não devemos liberar pressão em um único curta. Deixe-o ir e venha para a pressão normal, então temos que abrir autoclave. (Vídeo Ends: 21:29) Com esta demo o aluno pode ter explicado você todos os passos em detalhes. Então, vamos seguir para o próximo tópico. (Consulte O Tempo De Deslizamento: 21:38) Então, a próxima é o fermento. Então, o fermento é a mídia yeast. Então, essas são as diferentes mídias da levedura o que você pode usar, e todas as mídias de levedura na verdade também estão tendo o tipo similar de coisa que você exigia, como preparar a mídia de levedura conforme a composição da mídia você pode levar esses constituintes, você pode dissolvê-los em um 950 ml de água. Em seguida, autoclave, permita que a mídia esfrie até 50 grau. E aí você adicio o 50 ml de filtros trial 40% dextrose. Assim, que a concentração final se tornará a década de 2%, você ajusta o volume final para 1 litro, e já que está adicionando as reações sob as condições assépticas não há necessidade de fazer outra rodada de autoclaving ou outro tipo de esterilizações. Por que estamos fazendo a adição de 2 etapa porque o açúcar é muito sensível para obter o desativado ou desnaturado enquanto se está fazendo para a autoclacação. É por isso que você tem que preparar a mídia, tem que filtrar estilo as soluções de açúcar. E então, conforme a exigência você adiciia o açúcar na mídia, depois que a mídia é resfriada até 50 graus Celsius. (Consulte O Slide Time: 22:52) Depois disso também vamos discutir a mídia de cultura de células de mamíferos. Por isso, a mídia de cultura de células de mamíferos requer os diferentes tipos de componentes como você para este que estamos discutindo sobre a mídia DMEM. Por isso, a mídia DMEM é DMEM em pó o que você exige é 13,4 gramas, então você requer o bicarbonato de sódio 3,7 gramas. O bicarbonato de sódio é necessário para manter o pH. E para fornecer alguma capacidade de buffering, então você requer o soro bovino fetal que na verdade está na versão 10%, e isso é necessário porque você quer fornecer os fatores de crescimento. E então você exigia ter que adicionar o coquetel antibiótico, que é no 1% isso é apenas para inibir o bacteriano assim como o crescimento de fungos. Então, que não haverá crescimento do sistema bacteriano nisso. E para a preparação da mídia de cultura celular o que você tem que fazer é ter que primeiro se preparar. Estamos tomando o exemplo de DMEM, adiciona 13,4 grama de pó seco na água e misture-a para dissolver-a completamente então você adiciona os 3,7 gramas de bicarbonato de sódio, misture completamente e ajuste o pH para 6,9 7,1 usando o NaOH normal de 1 ou KCL. Finalmente você adiciia a água da grade de cultura da célula à mídia para trazê-la para o volume final. Esterilize a solução usando um filtro de membrana esterilizada com um tamanho de poro de 0,22 micron. Suplementos como antibiótico e soro podem ser adicionados à mídia esterilizada usando as condições assépticas. Então, essa é a maneira teórica de te explicar os preparativos da mídia, quais as precauções que você tem que tomar e como preparar a mídia sob as condições assépticas. (Vídeo Começa: 24:42) Eu gostaria de levá-lo ao meu laboratório para lhe explicar a precaução assim como os passos cruciais o que você deveria fazer e quais são os erros comuns, o que as pessoas estão fazendo quando estão preparando a mídia de cultura de células de mamíferos. Neste vídeo vamos demonstrar como preparar a mídia de cultura celular a partir da célula de mamíferos, Para a preparação da mídia de cultura celular há um passo a passo processo. Primeiro precisamos pesar os componentes da mídia, e dissolver em quantidade necessária de água, então precisamos configurar o pH usando a tira de ph. E então precisamos filtrar a mídia usando filtro de 0,22 micron para torná-la asséptica, para uso adicional também podemos alocar a mídia e armazená-la em 4 grau centígrado. Então, deixe-nos começar o vídeo. Neste vídeo estaremos demonstrando como preparar a mídia de cultura de células de mamíferos. Para esse efeito precisamos de mídias celulares, que é o meio de Eagle modificado da DMEM Dulbecco (()) (25:43), e precisamos de soro bovino fetal da FBS. E precisamos de antibióticos cocci compostas de estreptomicina e antistreptomiccvin. A mídia basal fornece materiais inorgânicos, aminoácidos, que são necessários para o desenvolvimento básico das células, e o FBS é usado para fornecer ambos os fatores para a célula. Não podemos autoclave esta mídia porque ela pode degradar os componentes da mídia, para esse propósito usamos filtros de 0,22 mícrons. Trata-se de filtro top de garrafa de 250 ml. Agora estarei demonstrando como preparar filtros a partir do copo. Temos que embalá-lo de perto para que ele não permita qualquer vazamento. E depois disso temos que colocá-lo para autoclave. Esta é uma garrafa de autoclave para filtro. Depois de embalarmos o filtro temos que mantê-lo para autoclave. Para esse efeito utilizamos indicador para verificar se o filtro foi autoclavado ou não. Quando as linhas na tira se transforma em preto, significa que o filtro foi autoclavado ok, 1 second, 1, 2, 3 ir. A fim de preparar a mídia agora estaremos adicionando mídia basal à água destilada dupla já autoclavada. Podemos utilizar água destilada dupla ou água milionária para esse fim. Depois de adicionar mídia precisamos mexê-lo em um estirador magnético para que os componentes se dissolvem completamente. Podemos utilizar água destilada dupla ou água de milímetro, mas a água destilada dupla é mais preferível já que contém mais íons do que a água milionária. Depois que os componentes da mídia se dissolveram completamente, precisamos definir o pH da mídia. Para essa finalidade ou podemos utilizar medidor de pH ou faixas de pH. Neste caso eles não podem usar medidor de pH. Como o bulbo do pH é sensível os componentes da mídia e pode ser corroído. Depois que os componentes da mídia se dissolveram completamente isso será capaz de configurar o pH da mídia. Depois que os componentes da mídia podem ser dissolvidos completamente nós precisamos agora ajustar o pH da mídia. A cor vermelha brilhante indica que a condição que a mídia está na faixa de 7,2 a 7,4. Se a cor da mídia fica roxa, então ela indica que a mídia é básica. Se a cor da mídia fica amarela e ela indica que a mídia se tornou ácida. Agora verificando se a nossa mídia cai na faixa de 7,2 a 7,4. Depois de a mídia ter sido definida precisamos agora filtrar a mídia dentro do gabinete de biossegurança, já que adicionamos as restrições na condição não asséptica. Depois que os componentes da mídia foram completamente dissolvidos e o pH foi configurado agora precisamos esterilizar a mídia usando mídia de filtro de membrana. Para esse efeito utilizamos vidro para os armários de biossegurança, que são usados para manipulação de culturas de células de mamíferos. Então, este é o típico armador de biossegurança em que executamos a filtração para mídia, este é o painel de controle que é usado para operar esta máquina, este é o interruptor on e off. Este é o comutador para a luz normal. Este é o switch para luz UV. Agora venho demonstrando como filtrar a mídia. Agora, vamos filtrar a mídia. Para essa finalidade precisamos de uma bomba de sucção, que pode ser conectada no filtro top de garrafa, esta bomba de sucção é para a finalidade de extrair o ar do filtro de cima inferior. Então, que podemos filtrar a mídia. Inicialmente precisamos verificar os meios de comunicação, precisamos verificar o filtro top de garrafa com menos mídia para verificar se há algum vazamento ou não. Para essa finalidade vamos adicionar em torno de 50 100 ml de mídia. Como podemos ver que não há vazamento no filtro, podemos prosseguir com a filtração, Depois que a mídia foi filtrada precisamos agora adicionar um BS e anticorpo a fim de torná-la mídia completa. A mídia completa compreende o soro, enquanto que a mídia incompleta não contém soro. Estamos adicionando 100 ml de soro bovino fetal, a fim de torná-lo 10% BS contendo soro. Com isso preparamos 1 ml de mídia completa DMEM, compreendendo de 10% FBS e 1% solução antibiótica. Por isso, longe temos visto como preparar a mídia de cultura celular a partir de células de mamíferos, embora haja algumas precauções a serem seguidas como quando estamos definindo pH da mídia precisamos usar tiras de pH, em vez de usar o medidor de pH. Existem alguns combinos na mídia que podem bloquear na lâmpada do medidor de pH e reduzir sua eficiência. Em segundo lugar, quando utilizamos a mídia precisamos de todos os meios de comunicação de 4 grau até 27 grau, mas precisamos encontrar a temperatura de primeiro quarto e depois a 27 graus para evitar a mudança no pH da mídia. E também se eles estão produzindo a mídia em quantidades maiores temos que alocar conforme os nossos requisitos, e então usar a fim de evitar a contaminação e a mudança em pH do meio. (Vídeo Ends: 35:12) Então na demo os alunos explicaram a você como preparar a mídia e quais são as precauções que você deve tomar, e vamos discutir aqueles em detalhes. (Consulte O Tempo De Deslizamento: 35:23) Então, quando você está preparando uma mídia de cultura de células de mamíferos, a primeira coisa que você tem que ser muito, muito cauteloso sobre é o pH da mídia preparada ou da mídia filtrada. Por isso, a mídia de filtro, o pH você não deve nunca usar o medidor de pH porque se você usa um medidor de pH, ele na verdade vai destruir a sonda do medidor de pH. Em vez disso, você pode usar as tiras de pH, pois uma tira de pH permite medir o pH. E você deve sempre manter o pH depois de ter sido filtrado. Então, que você apenas verifique se o pH o que você exige é ele o pH da mídia de cultura celular, a filtração o que você vai fazer é você tem que fazê-lo em uma velocidade muito baixa. Então, que você não deve ocupar o ar porque se você fizer isso muito alta filtração de velocidade, isso realmente compromete o tamanho do poro do filtro de membrana o que você está usando. E isso, na verdade, vai somando a bactéria e outro tipo de organismo infeccioso ou o organismo oportunista e depois, finalmente, a mídia vai ser contaminada. Então você tem que usar um soro que é calor inativado. Então, o soro é uma parte líquida o que está presente no sangue, o que significa que se você coagular o sangue, vai-se obter o soro, mas soro ainda contém muitos tipos de agentes imunologicamente ativos como os complementos. Então, esses soros só são necessários para fornecer os fatores de crescimento, não para o elogio porque se você adicionar o complemento o complemento vai destruir as células e eles não foram permitidos as células se propagarem. Então, você tem que remover os complementos e para remover o complemento, você tem que comprar o soro que é aquecido ativado, ou você comprar o soro que não é inativado então você pode fazer uma inativação de calor simplesmente aquecendo o soro em 60 grau por meia hora. E então você verá que há um precipitado sendo formado no soro, e então você apenas filtra aquele soro com um micron de 0,2 e isso vai remover o precipitado, e esse teorema, você pode usar para preparar a mídia de cultura celular. Antibióticos também você tem que adicionar, e então antes de começar a usar o soro, ou a mídia para os seus propósitos de cultura celular, você sempre tem que verificar se ele está livre de contaminações. Como verificar isso é que você tira um 10 ml ou 20 ml da sua mídia, guarde-a em uma placa de petri, sem as células e guarde-a em uma incubadora de 37 por 2 dias. Se o fizer, se haverá uma contaminação como bactérias ou fungos, na verdade é começar a crescer e isso de fato vai dar a ideia se a mídia de cultura celular o que você preparou está livre de contaminação ou não. (Consulte Slide Time: 38:20) Então, esta é a outra coisa é, assim, a mídia de cultura de células de insetos porque a mídia de cultura de células mamíferos é apenas para as células de mamíferos, mas não é adequada para a célula de inseto que dizem que as pessoas também projetaram os diferentes tipos de mídia de cultura de células de insetos. Por isso, as células dos insetos ainda são diferentes, e elas exigem que a exigência para a nutrição também seja diferente. Por isso, o que você tem são os diferentes tipos de mídia de cultura de células de insetos e a preparação é você pode preparar algumas dessas medias para propagar as linhas de células de insetos e que podem ser usadas para seus fins experimentais. Então, com isso, eu gostaria de concluir minha palestra aqui e neste vídeo, ou nesta palestra temos discutido sobre os diferentes tipos de mídia de cultura celular assim como a mídia de microbiologia que você pode usar para propagar os diferentes tipos de células hospedeadoras ou diferentes tipos de células para usá-las nos experimentos. Por isso, com isso eu gostaria de concluir minha palestra aqui. Obrigado.