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Olá a todos, bem-vindos a outra palestra para Engenharia de Entrega de Drogas e Princípios; nesta aula discutiremos um papel sobre inalação.
(Consulte O Tempo De Deslizamento: 00:37)

Por isso, nas aulas anteriores discutimos como, se você está tentando entregar algo para o pulmão, você pode usar diretamente terapias baseadas em inalação para fornecer quaisquer efeitos colaterais nas outras partes do corpo. Não faz sentido se você quer que toda a sua droga vá para os pulmões para entregá-la através da via inter venosa ou oral porque, dessa forma ela vai distribuir por todo o corpo. Por isso, neste papel os autores se debruçaram sobre como podem tratar algumas infecções usando algumas partículas poliméricas e bacteriófagos e vamos descrever isso em muito mais detalhes à medida que vamos junto neste papel.

(Consulte O Tempo De Deslizamento: 01:13)

Por isso, muito rapidamente primeiro de tudo o que eles estão tentando fazer; então, este é um papel que está olhando para a infecção por fibrose cística. Então, fibrose cística primeiro de tudo o que é isso? Trata-se de um transtorno genético, causado por uma mutação em um gene que se chama CFTR, que é um gene Cystic Fibrosis Transmembrane Receptor. E, por causa disso a secreção do íon cloreto não é boa e isso causa muitos problemas em termos de difusão no teor de água do muco. A fibrose cística na verdade afeta muitos órgãos incluindo o seu intestino assim como pulmões e outros como até as glândulas sudorímas.
Mas, o grande manifesto disso vem no pulmão onde tipicamente no pulmão normal você tem essas células epiteliais pulmonares. E, essas células epiteliais pulmonares continuam a secretar lote de muco que causa a geração de duas camadas de muco. Então, você tem uma camada de muco mais viscosa e você tem uma camada de muco menos viscosa. E, em geral em uma via aérea normal do pulmão este muco se mantém em movimento para cima e quando eu digo subir basicamente no sentido de que, ele se move dos pulmões em direção à boca. E, o que acontece é deixar-nos dizer que estamos respirando qualquer patógeno ou qualquer tipo de partículas que o corpo não quer que essas partículas sejam depositadas nessa espessa camada de muco.
E, uma vez que este muco está em constante movimento que é chamado de escada rolante de mucociliar, eles continuarão a esclarecer isso. E, eventualmente uma homeostase é mantida onde mais e mais muco é secretado, o que quer que o muco anterior tenha que se mover. Por isso, tipicamente como é conhecido na literatura, trata-se de levar cerca de 18 horas para que todo o muco se regenere. Assim, dentro de 18 horas em uma lifespan normal todo o muco que está presente será substituído por um novo muco. Mas o que acontece nas vias respiradas de fibrose cística é que, por causa desse problema no gene aqui o teor de água é muito mais baixo.
E, daí você tem uma camada única muito grossa de muco.
Agora, esse muco sendo tão viscoso que realmente não se move como costumava se moviar, no caso normal mais ele também é muito grosso. E assim, isso resulta em bastante um pouco de acumulação no bloqueio das vias aéreas também. Por isso, agora você está respirando na bactéria, que pode crescer em seus pulmões e realmente permanecer lá por bastante tempo se estabelecer e causar a doença. Então, em geral cerca de 80 a 95 dos pacientes realmente vêm porque, dessa insuficiência respiratória. Porque, ela é causada por essa bactéria crônica como infecções que causarão inflamação com mais e mais células imunes vão vir.
Eles vão continuar destruindo o tecido circundante e isso causa mais secreção de muco e mais homeostase para ficar perturbado o bloqueio de vias aéreas. Então, eventualmente então os pacientes simplesmente morrem porque, mesmo eles não conseguem respirar muito bem. Então, como eu disse então, um dos principais alvos, é esse bacteriano como infecção e entre a infecção bacteriana que é vista nessa doença existem muitos tipos de bactérias que começam a colonizar o seu pulmão.
Mas, entre eles o tipo muito comum de bactérias patogênicas neste caso é Pseudomonas aeruginosa. Por isso, é uma bactéria gram-negativa que coloniza seus pulmões se você tiver fibrose cística e tais infecções.

(Consulte O Tempo De Deslizamento: 05:19)

Na verdade, é muito difícil tratar antes de tudo e já existe um sistema imunológico prejudicado que está presente no entorno. Como esse muco é tão espesso, que as células imunes também estão achando difícil se moviar nesse muco. Em seguida, este Pseudomonas aeruginosa realmente desenvolve resistência a antibióticos para qualquer que seja o antibiótico que você está dando, e é um grande problema nos dias de hoje. E, uma vez que tem um tempo de residência mais longo porque o muco não está se mexe, pode formar esses biofilmes.
E, os biofilmes em geral são extremamente difíceis de tratar, temos conversado sobre isso em nossa aula de infecção. Esses biofilmes serão muito difíceis de tratar já que os antibióticos não funcionam realmente muito bem, você quase come 1000 vezes de concentração antibiótica que poderia ser extremamente tóxico para as células saudáveis também e é muito difícil de tratar. E, em geral quero dizer; obviamente, a resistência aos antibióticos está sendo destacada bastante em vários periódicos e várias revistas de publicação. Trata-se de um grande problema que está sendo enfrentado pela humanidade neste momento.

(Consulte O Tempo De Deslizamento: 06:17)

Então, este jornal tentou abordar isso e o que eles fizeram foi que, estão propondo, novamente não são os primeiros a fazer isso, há várias pessoas que propuseram isso. Mas, neste caso, eles estão olhando para um método de entrega normal para esta solução que é bacteriófagos para o tratamento. Então, o que são bacteriófagos? Os bacteriófagos não são nada, mas estes são vírus que infectam especificamente suas bactérias hospedetoras. Esta é apenas uma imagem de modelo; você pode ver que há uma bactéria e então vários tipos vírus são conectados em até o topo dessa bactéria.
E assim, estes são vírus que vão e em colocar o seu material genético na bactéria acaba por causar a lise desta bactéria em particular. Esses bacteriófagos são muito específicos para sua bactéria hospedeira. Então, eles não prejudicam realmente suas bactérias comensais, por isso sabemos que temos muitas bactérias em nosso corpo que na verdade são saudáveis e nosso corpo exige isso. Então, esses bacteriófagos não vão matá-lo, ao contrário dos seus antibióticos, que enxutam quase toda a sua bactéria por vez; estes bacteriófagos são específicos para o alvo. E, eles também estão se auto replicando e se auto limitando e o que exatamente isso significa é que, quando encontram o hospedeiro eles vão começar a se multiplicar. Então, eles se auto replicarão e quando o hospedeiro não estiver lá eles não se multiplicam mais.
Então, eles se limitaem e acabam sendo esclarecidos, são seguros para o uso humano eles têm sido usados há décadas em humanos de fato, os que foram usados antes mesmo dos antibióticos foram descobertos. Então, há uma longa história de uso em humanos e por isso, eles se mostraram seguros e têm sido realmente mostrados para serem eficazes contra os biofilmes também o que não é o caso dos antibióticos. Então, esta é apenas imagem de pseudomonas biofilme; esta é uma imagem SEM: imagem Scanning Electron Microscope. E, mostra que a superfície é colonizada pelo biofilme Pseudomonas que quando tratado com os fépidos fica completamente erradicado. Outra coisa é, como quaisquer outros vírus ou qualquer outro material genético que possam ser arquitetados.
Assim, você pode colocar outras enzimas nesses bacteriófagos também para aumentar sua potencia, eles podem aumentar até mesmo a eficácia antibiótica. Então, você pode usar por co-entrega com antibióticos ou você pode ter algumas estratégias alternativas também; no entanto, um desafio é o tamanho é razoavelmente pequeno. Então, eles têm cerca de 10 100 nanômetros de diâmetro e que se estamos olhando para a entrega de pó seco para o paciente, que é muito mais compatível. Eles realmente não vão para os pulmões profundos e nós conversamos sobre isso em nossa aula de inalação, vamos passar por cima novamente de novo.
(Consulte O Tempo De Deslizamento: 09:03)

Assim, todo o ponto deste papel foi o de eles poderem desenvolver uma terapia que utilize um biomaterial; assim, que eles possam aumentar a conformidade do paciente, bem como garantir a entrega profunda de pulmão desses bacteriófagos.

(Consulte O Tempo De Deslizamento: 09:17)

Por isso, novamente se você se lembra de uma das coisas que causa entrega no pulmão profundo é o diâmetro aerodinâmico. Então, aquele d aero e nós dissemos que o aero d tem que ter entre 1 5 microns. E, isso porque se for inferior a 1 micron então tipicamente, eles não têm inércia suficiente e então eles continuam indo em streamlines com o ar que você está respirando e eles também ficam exalados. Se eles são maiores que 5 microns então eles tendem a ter uma inércia muito alta e acabam se acumulando onde, eles batem primeiro que é aquela traquinagem na boca superior, vias aéreas superiores. E assim, o intervalo ideal que você quer entregá-los, para ser de 1 5 mícrons.
Então, é isso que o sistema foi imaginado por esses autores onde eles estão dizendo que usaremos uma partícula que está nesse intervalo. E, então, carregue esses bacteriófagos ou a droga o que você estiver tentando entregar sobre essas partículas e dessa forma isso garantirá que essas partículas vão profundamente no pulmão, nos sacros alveolares. E, então há quando a droga pode liberar e obviamente, eles querem usar o pó seco inaladores porque ele é muito mais compatível com o paciente, o paciente pode simplesmente usá-lo por eles mesmos.

(Consulte O Tempo De Deslizamento: 10:37)

Então, novamente quais são os requisitos? Como eu disse temos que ter de 1 5 mícrons para o pulmão profundo e o aero d para partícula polimérica que também tínhamos discutido antes. Não é nada, mas a sua relacionada com o diâmetro físico e a raiz quadrada da densidade. Então, agora, nós também sabemos e discutimos isso; também que o macrófago tem alta uptake na faixa de 2 5 mícrons. Por isso, se você entregar algo nessa faixa o que vai acontecer é a maior parte da sua droga vai acabar nos macrófagos: macrófagos alveolares, que estão vistoriando a área e você vai perder muitas das suas drogas.
Então, esse não é o resultado que você quer; você não quer realmente entregar essa droga à macrofagia porque essa bactéria não reside nos macrófagos. Então, uma coisa que eles vieram com é, eles decidiram fazer essas partículas porosas e maiores. Então, eles realmente mudaram o tamanho físico dessas partículas para 8 10 micron e diminuem a porosidade disso para mantê-las em 2 5 mícrons, alcance para aquele diâmetro aerodinâmico d. Por isso, nessa faixa de tamanho de 8 10 micron eles não são muito grandes.
Eles não são mais do que essa faixa de 2 5 microns que os macrófagos podem levar, mas ainda estão na faixa aerodinâmica correta para poder depositar no pulmão profundo.
E, então outro benefício que eles observam a partir disso é o tamanho maior do tamanho das partículas mais fácil é para ele aerosolizar. Então, se você tem um pó e você flua, vamos dizer se você tem esse grande pó de partícula. Então, a proporção de superfície para volume é baixa.

(Consulte O Tempo De Deslizamento: 12:23)

E assim, o ar pode entrar muito facilmente e aerosolizá-lo e assim, foi o que eles foram adiante e eles usaram o polímero chamado PLGA; novamente, discutimos bastante através deste curso que é um polímero aprovado pela FDA. E, eles foram capazes de fazer essa partícula porosa, como você pode ver o seu muito poroso.
Então, sua densidade é muito baixa, ela é biodegradável, é biocompatível porque PLGA você pode tê-lo degradante mais rápido e a densidade que eles modificaram foi de cerca de 0,3 grama por cc. Assim, a partir de 1 baixaram para 0,3; isso significa, que agora essa partícula é bastante leve e agora se você aplicar essa equação de daero, digamos que se trata de 8 micron multiplicado pela raiz quadrada da densidade.
Então, agora se você resolver isso você vai descobrir que isso é mais na faixa de 3 5 micron. Então, foi isso que eles usaram aqui; então o que eles fizeram foi que usaram bacteriófagos.
Eles encontraram bacteriófagos, que visaram especificamente contra pseudomonas e eles se purificaram usando um procedimento chamado cromatografia líquida de desempenho rápido. E, eventualmente eles foram à frente e carregaram esses fagos sobre essas partículas e o que eles descobriram foi que eles recebem um carregamento de cerca de milhões de fagos por miligrama de partícula e o carregamento é feito por simples adsorção.

(Consulte O Tempo De Deslizamento: 13:49)

Então, os fagos são apenas incubados com essa partícula e eles os deixaram interagir uns com os outros e adsorb sobre a superfície. E, então, descogram que podem colocar cerca de 10 até a potência 6 phage por miligrama de partícula. É importante notar neste caso eles estão usando uma mistura de 5 fagos e a razão pela qual querem usar mistura de fagos é porque vamos dizer que esta é a bactéria e vamos dizer que isso é uma farta. Então, talvez haja um receptor na superfície bacteriana para caber onde o phage vai e se liga.
Então, se eles só usam um tipo de phage o que vai acontecer é que a bactéria pode potencialmente mutar esse receptor para o qual então a fagia não pode se ligar. Então, para evitar que isso aconteça eles usaram 5 phages de uma vez e assim, este é o phage 1 talvez o outro phage use um receptor diferente. Então, talvez haja um outro receptor agora, que está sendo usado por uma fração diferente. E, portanto, isso significa, que mesmo que nos deixe dizer que uma bactéria é capaz de, de alguma forma, anular um dos fépidos, ela ainda será suscetível aos outros quatro fagos.
E, isso garante que a terapia tenha sucesso e então eles foram capazes de mostrar que esses fagos que são carregados sobre as partículas ainda estão ativos e vão em frente e lise as bactérias.

(Consulte O Tempo De Deslizamento: 15:23)

Então, aqui está o que eles mostraram. Então, eles utilizaram uma bactéria GFP, e no controle; assim, tem tudo isso é um gramado bacteriano e o vermelho são suas partículas. Por isso, onde quer que as partículas estejam pousando você não vê nenhuma morte bacteriana. No entanto, se eles carregam suas partículas com a farta você vê não só a bactéria verde sendo liberada onde quer que a partícula esteja pousando e seja realmente propagando. Então, como eu disse que os phages são auto replicantes. Então, eles estão infectando as bactérias, estão lisoneando isso, estão se espalhando e então também estão matando a bactéria ao lado delas também.
(Consulte O Tempo De Deslizamento: 16:15)

Em seguida, aqui, eles mostraram que esses fagos também são eficazes contra os biofilmes. Então, agora o que você está olhando, é um biofilme que está sendo manchado por mortos-vivos. Então, você pode ver que neste caso há bastante o biofilme que está vivo versus os mortos.
Considerando que, se dão suas partículas de fagia, veem-se uma intensidade bastante baixa de bactérias vivas e uma intensidade bastante elevada das bactérias mortas e aqui está a imagem mesclada; esta é para a quantificação de live a dead no tecido.
E, nos casos em que estão dando a fagia combinada com as micro partículas, eles acham que a proporção é muito mais baixa de fato significativamente menor. Então, eles são eficazes até mesmo contra os biofilmes.
(Consulte O Tempo De Deslizamento: 17:01)

Em seguida, eles foram à frente e fizeram as formulações de pó seco. Então, o que eles fizeram é que liofilizaram seu pó ou eles liofilizaram suas partículas para fazer um pó e descozam que há uma perda mínima da atividade. Então, eu disse que eles foram capazes de obter 10 para a potência 6 fagos por miligrama e você descobre que não há muita perda e este pó é bastante estável em temperatura ambiente. Então, aqui, você pode ver que aqui está o titer e ele realmente não deixa cair muito durante um período de 2 semanas em temperatura ambiente também. Então, isso pode ser uma boa terapia para até mesmo locais de vila que podem não ter acesso suficiente para nos deixar dizer um armazenamento frio ou quaisquer instalações desse tipo.

E, para ajudar ainda mais com a aeroolização, eles usaram a lactose que é um crioprotetor bem como um bom agente aerosolizante. Então, não é essencialmente nada, mas um açúcar e assim, eles misturaram isso junto com a formulação de partículas para que ela comece a fluir melhor. O PLGA em si não flua muito bem. Então, eles têm que misturá-lo com lactose para fazer isso e em seu resultado, você verá que eles acham que isso é uma excelente entrega para o pulmão profundo. Então, aqui está o que eles fizeram; aqui eles fizeram isso em um rato e então eles isolaram vários órgãos.
Então, esse processo é chamado de insuflação onde a traquéia do rato é acessada e, em seguida, através de uma seringa, eles estão refogando o pó diretamente na traquéia; assim, esse processo é insuflação. Por isso, como esperado você vê e essas partículas são rotuladas fluorescentemente e então elas estão usando algum tipo de sistema de imagem animal do sistema de imagem. E o que eles encontram é, eles recebem especificamente a entrega nos pulmões enquanto, os outros órgãos não mostram qualquer entrega final em tudo o que você espera se você estiver fazendo em simulação. Esta é mais a quantificação de que todo o sinal de fluorescência é do próprio pulmão e todos os outros órgãos não mostram nada.
(Consulte O Tempo De Deslizamento: 19:25)

Depois, eles foram à frente e eutanzaram alguns desses animais e depois fizeram o crioseccionamento e por isso, o que você está vendo aqui é pulmão seccionada de crio-seccionado. Este azul é o DAPI que está manchando o núcleo das células de mamíferos e o vermelho são suas partículas e você pode ver que mesmo no pulmão profundo. Então, você sabe que isso é pulmão profundo porque, você pode ver bastante lacuna de ar o que sugere que isso são alvéolos na histologia.
E, você pode descobrir que essas partículas estão depositando nos pulmões profundos e, daí, elas são boas em termos de sua faixa de diâmetro aerodinâmico e esta é a maior quantificação em animais vivos. Então, eles fizeram toda a imagem ao vivo do animal e o que eles encontram é a maior parte do sinal é do pulmão enquanto que, em um animal saudável, se você espera por cerca de 18 horas ele fica liberado.
Por isso, seu geralmente seguro para um animal saudável ele não fica realmente no pulmão por muito tempo, não bloqueia nada. Ele fica liberado dentro das 18 horas, que é o que se espera como eu disse em animal saudável o muco vai se regenerar em cerca de 18 horas e aí eles mostram que a porosidade na verdade é essencial. Então, se eles fazem as mesmas partículas de tamanho que são não porosas e então elas insuflam essas partículas nos pulmões do rato. O que eles encontram é, antes de mais nada se comparados com uma farra livre, eles descobram que as partículas porosas são capazes de dar um titer muito alto de fagia para os pulmões.
Então, o experimento é feito que você insuflou farra ou phage livre carregado na partícula porosa igual quantidade. E, então você homogeneiza o pulmão e o titer para o quanto de phage está presente naqueles homogenados. E, você descobre que quase 4 ordens de grandeza, principalmente porque, mais altas as partículas e a mesma coisa que observaram com a partícula não porosa versus porosa. Por isso, a porosidade é essencial para pulmões profundos e o que eles encontram é na região do pulmão profundo as partículas porosas lhe dão cerca de uma ordem de grandeza de grandeza superior dos fagos em comparação com a partícula não porosa; novamente, lembre-se disto é de titering para as placas. Por isso, todos esses fagos são, na verdade, fagos ativos.
Então, todo esse processo eles foram capazes de atingir a atividade de phage no pulmão e, em seguida, finalmente, eles mostram que isso é realmente infecção responsiva. Então, e o que isso significa, que nos deixe dizer se é um pulmão saudável então você descobre que se você entrega partículas de phage você consegue um certo titer de seus fagos no pulmão lembra e isso está em miligrama agora, então é por isso que você vê uma queda na escala e esta estava em micrograma, esta estava em grama. Então, mas em qualquer caso, se você usa essas partículas de phage, elas dão um certo acúmulo no pulmão. No entanto, se você tiver o pulmão infectado esses fagos então replicar assim, isso é feito 24 horas depois.

Então, esses fagos replicam e realmente aumentam seu número por novamente quase de 3 4 ordens de grandeza; indicando que estes são, na verdade, auto-replicantes e sistema responsivo de infecção.
(Consulte O Tempo De Deslizamento: 23:05)

Em seguida, eles foram em frente e usaram esse sistema em um modelo de infecção aguda. Então, o que eles fizeram é que eles entregaram a bactéria nos fépidos até o rato nos pulmões. E assim, trata-se de animais saudáveis, neste caso animais do tipo silvestre e que já entregaram cerca de 0,5 miligrama de partícula. Ele tem um carregamento dos fagos naquele e PAO1 que é uma estirpe de laboratório de pseudomonas foi usado e este é um modelo de 24 horas. Então, ambas as coisas deram e depois estão testando para o que acontece 24 hora depois em termos tanto da bactéria no phage.
E, o que eles encontram é apenas no caso quando eles têm a fagia carregada sobre as partículas.
Então, aqui está a sua farta gratuita, aqui está a sua única bactéria, aqui é a sua única partícula. Então, você não vê nenhuma redução, mas só no caso em que você tem partícula carregada com a farofa você vê uma redução na quantidade de CFU, algum número de bactérias que está presente no homogenato do pulmão. E, então, os fagos também são medidos e a bactéria foi então o animal foi então procurado pela sobrevivência e o que eles encontram é você obter uma redução massiva na sobrevivência entre os dois grupos.

Por isso, se você não der nenhum tratamento a maioria desses animais morre; só talvez 10-15 deles sobrevivem. Mas, se você está dando tratamento de phage quase que de fato, 100 dos animais acabaram sobrevivendo pelo tempo de duração do estudo.
(Consulte O Tempo De Deslizamento: 24:49)

E, então, usam um camundongo CFKO que é um rato que é mutado e imita a fibrose cística. Aqui também eles são capazes de mostrar que de fato, em uma taxa muito melhor que se você usa apenas fagos há algum efeito. Mas se você usa fagos mais bactérias você quase erradicar todas as bactérias que estão presentes no sistema e aqui, elas também estão mostrando se a bactéria está se espalhando ou não. Então, eles analisaram para o fígado onde se a bactéria que ele faz se espalhou sistemicamente, ela vai se acumulando no fígado também. E, eles descozem que se dão às bactérias apenas tratamento quase todos os animais têm colônias bacterianas no fígado. No entanto, se eles usarem uma micropartículas de phage nenhuma das bactérias é encontrada no fígado.
Por isso, não só está impedindo o pulmão, como também está impedindo outros órgãos também e isso é mais dados de histologia. Por isso, em um animal infectado você vê se você só dá a bactérias você vê uma resposta massiva de suas células imunológicas. Você pode ver onde alvéolos, que agora estão completamente cheios com todas essas células imunes você pode ver aqui. Se você der algum tratamento de phage então isso reduz um pouco, mas ele quase se torna como um tecido saudável; se você o fizer com a partícula de micro fálica. E, isso está novamente mais mostrando o número de bactérias que está presente nessas seções de pulmão. Então, você pode ver todos esses vermelhos que estão sendo representados como bactérias e que se reduz ainda mais à medida que o tratamento é dado.
(Consulte O Tempo De Deslizamento: 26:33)

Em seguida, eles queriam ver se algo assim vai funcionar em cepas clínicas.
Então, eu disse que os autores usaram inicialmente a cepa de laboratório que era PAO1. Por isso, as cepas de laboratório são boas para fazer sua otimização, mas obviamente, as cepas clínicas são muito mais virulentas e muito mais difíceis de tratar. Então, o que eles fizeram foi checá-lo em várias cepas de bactérias que estão isoladas do paciente. E, o que eles encontram são suas micropartículas de phage é capaz de matar a maioria destes; há uma ordem aqui, que não foi capaz de matar. Mas, quase todos esses isolados clínicos estavam sendo capazes de serem mortos por meio da formulação de micro-partículas desses fagos.

(Consulte O Tempo De Deslizamento: 27:21)

E então, eles fizeram um experimento in vivo usando uma dessa estirpe clínica, que é PA103 e o que eles encontram é novamente o mesmo resultado que, se eles só conferem fagos, eles realmente não veem muita redução. Na verdade, não há uma redução significativa enquanto que, se dão a sua micro partícula de fagia, eles veem bastante redução no número de bactérias que está presente nos pulmões. A outra coisa que eles fizeram é obviamente que isso funciona bem com uma única bactéria de infecção em sistema de mouse. Mas os humanos são expostos a vários tipos de bactérias, vários tipos de Pseudomonas, várias estirpes de Pseudomonas de cada vez.
Em um momento, paciente pode ter muitos tipos de cepas de Pseudomonas que estão colonizando os pulmões. Então, como isso pode funcionar com tudo isso? Porque eles estão usando os 5 phages e então eles mostraram que esses fagos são eficazes contra a maioria das cepas que são encontradas em humanos. Eles foram em frente e tentaram isso e descobiram que, mesmo que você tenha duas cepas diferentes misturadas e então você dê a terapia de phage mesmo assim pode causar a redução no número de bactérias que está presente.

(Consulte O Tempo De Deslizamento: 28:33)

E então uma questão que surge repetidamente com o tratamento de fagia é o que sobre a resposta imune contra a própria fagia; assim, porque os fagos são estrangeiros e eles podem provocar alguma resposta imune. Então, nesse caso então os autores quiseram testar o que acontece se eles dão fagia antes e depois tentar fazer terapia. Por isso, neste experimento em particular eles usaram pela primeira vez o mouse para entregar a micropartícula de phage sem nenhuma bactéria. Eles esperaram cerca de 21 dias o que é um tempo bom o suficiente para deixar que a resposta imune adaptativa se desenvolta.
E, então o que eles fizeram foi, então eles foram em frente com seus originais com seu estudo normal onde eles usam o mesmo camundão para então, dão tanto os fagos na bactéria e viram a resposta 24 horas depois. E assim, o que eles encontram é se você tem pré-tratado versus nenhum pré-tratamento de phage. Então, neste caso houve pré-tratamento com phage, neste caso o pré-tratamento é apenas com partículas e obviamente, esta que nunca foi exposta aos fagos. O que você encontra é que ambos funcionam como bons e não há diferença entre as terapias?
Então, se houvesse resposta imune contra os fagos o corpo teria tentado limpar os fépidos e você não teria esse tanto de liberação. E assim, pelo menos em termos de sua eficácia funcional eles não enxergam nenhuma redução. Eles também procuraram anticorpos contra os fagos no sangue e eles não conseguiram encontrar nenhum anticorpos e usar os fagos pelo menos para uma administração. Obviamente, isso precisa ser feito em uma duração muito mais longa e em um

modelo crônico para ser capaz de dizer com sucesso que isso vai funcionar ou não. Mas há muita promessa nesta terapia em particular. Ok! Então, nós vamos parar aqui e vamos continuar na próxima aula.
Obrigado.