Questo corso dettagliato ti introduce al mondo delle pratiche di laboratorio professionale e dell'elettroforesi. Esplorerai il fatto che la buona pratica di laboratorio (GLP) incarni una serie di principi che forniscono un quadro entro il quale gli studi di laboratorio sono pianificati, eseguiti, monitorati, registrati, segnalati e archiviati. Verranno discussi i tre livelli di categorizzazione dall'Approccio di Rosch. Sarete introdotti al concetto di capacità tampone, una misura quantitativa della resistenza al cambiamento del pH mediante una soluzione, contenente un agente tampone rispetto a una variazione della concentrazione di acido o alcalino. Imparerai inoltre che l'elettroforesi nel sistema di elettroforesi verticale esegue in modo discontinuo con un buffer nella vasca superiore e inferiore, mentre l'elettroforesi nel sistema gel orizzontale esegue continuamente. Scoprirete come vengono utilizzate la curva di calibrazione da gel nativi e denaturanti per determinare il peso molecolare della proteina. Le dimostrazioni, i problemi, gli esempi e le domande di valutazione in questo corso videoludico guidato da istruttore, sono progettati per fornirti una fondazione completa, che ti permetterà di compiere seri passi in questa carriera.
Il corso inizia introducendo la definizione di GLP e i diversi livelli di categorizzazione al suo interno. Successivamente verrà discussa la scheda tecnica di sicurezza materiale (MSDS), mostrancero come contiene informazioni sui potenziali pericoli di un materiale. Esplorerai la soluzione tampone, utilizzata durante gli esperimenti come mezzo per tenere il pH ad un valore quasi costante in un'ampia varietà di applicazioni chimiche. Scoprirete il fatto che ad una forza centrifuga fissa e viscosità liquida, la velocità di sedimentazione di una particella è proporzionale alle sue dimensioni e alla differenza tra la densità di particelle e la densità della soluzione. Scoprirete inoltre che l'elettroforesi si riferisce ad un processo elettrocinetico che separa le particelle cariche in un fluido utilizzando un campo di carica elettrica e i motivi per cui la tecnica dell'elettroforesi non è buona per l'utilizzo nella separazione e nell'analisi di campioni biologici complessi.
Prossimo, imparerai che i campioni biologici complessi sono risolti in modo efficiente in elettroforesi in gel 2-D. Ciò comporta la combinazione di carica e peso molecolare per fornire una separazione molto maggiore rispetto all'utilizzo della proprietà individuale. Si guadagnerà intuito sul fatto che quando si conduce l'esperimento di elettroforesi in gel di agarosio sulla pagina nativa, il campione che viene preparato nella colorazione di carico non contiene agente detergente o denaturante e di conseguenza, il campione viene eseguito in base alla carica. Si vedrà poi che nell'elettroforesi in gel di poliacrilammide orizzontale, il campione biologico complesso viene risolto in base alla sua carica e quindi spostato all'elettrodo di controcarica. Curve di calibrazione di studio da gel nativi e denaturanti prima di muoversi su sistemi di movimentazione del liquido, strutture secondarie in RNA, elettroforesi in gel di poliacrilammide e polimerizzazione in gel di impilamento. Questo corso interesserà gli studenti delle biotecnologie, o quei professionisti in biotecnologie sperimentali.
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