Capire i Basics of Electrophoresis

In questo corso gratuito online si introduce al mondo dell'elettroforesi. Scopri se questa tecnica è adatta per la separazione e l'analisi di campioni biologici complessi. Discutere le quattro diverse macchie disponibili per il rilevamento di proteine in gel di poliacrilammide. Sarete introdotti ai due tipi di gel che vengono inseriti in un'elettroforesi in gel verticale e vedere come il sistema verticale esegue in modo diverso un sistema di gel orizzontale. Scoprirete se una macchia di tanerino sinergica può essere utilizzata per rilevare le fasce proteiche soffiate. Le dimostrazioni, i problemi, gli esempi e le domande di valutazione in questo corso videoludico guidato da istruttore, sono progettati per fornirti una fondazione completa in elettroforesi.

Il materiale ti introduce alla definizione di elettroforesi in gel orizzontale e verticale e ai diversi tipi di macchie che servono a rilevare le proteine nei gel di poliacrilammide. Successivamente verrà discussa l'elettroforesi nel sistema di gel orizzontale, che viene eseguito in continuo con entrambi gli elettrodi e le cassette di gel sommerse all'interno del buffer. Esplorerai il fatto che il reagente di ammonio persolfato viene utilizzato come iniziatore nel processo di polimerizzazione dell'acrilammide, mentre il solfato di sodio dodecile è un reagente che viene utilizzato per denotare e fornire una carica negativa alla proteina. Scoprirete il fatto che il reagente dell'agarosio viene utilizzato nella preparazione del gel orizzontale per l'analisi del DNA e degli accessori aggiuntivi necessari per il casting del gel di agarosio. Si chiarirà che ci sono due elettrodi di platino nella camera di elettroforesi che fanno parte del sistema di elettroforesi in gel orizzontale.

Prossimo, imparerai che i campioni biologici complessi sono risolti in modo efficiente nell'elettroforesi in gel 2-D, che comporta la combinazione di carica e peso molecolare per fornire una separazione molto maggiore rispetto all'utilizzo della proprietà individuale. Si guadagnerà intuito sul fatto che quando si conduce l'esperimento di elettroforesi in gel di agarosio sulla pagina nativa, il campione che viene preparato nella colorazione di carico non contiene agente detergente o denaturante e di conseguenza, il campione viene eseguito in base alla carica. Scoprirete poi che nell'elettroforesi in gel di poliacrilammide orizzontale, il campione biologico complesso viene risolto in base alla sua carica e quindi spostato all'elettrodo di controcarica. Vi verrà insegnato che nel metodo della pagina dell'urea, le proteine insolubili vengono disciolte in urea e i campioni sono separati in base alla loro massa subunitaria. Infine, si studieranno reagenti in gel elettroforesi, colorazione e analisi delle immagini, varianti di elettroforesi in gel e componenti di elettroforesi in gel. Questo corso sarà di interesse per gli studenti delle biotecnologie o per quei professionisti in biotecnologie sperimentali che vogliono huna la loro conoscenza tecnica.