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Quindi, torneremo al principio di Von Bwaer, quindi siamo in questa embriologia comparata e poi transitando in embrione evolutivo praticamente sullo stesso argomento. Sto mostrando questo solo per ricordare la continuità, così abbiamo affrontato tutto questo.
(Riferimento Slide Time: 00.37)

Così, ricorderà questa preformazione, tutta la struttura è nella testa dello sperma, era nella testa dello sperma, e non più, solo per essere abbondantemente chiaro con i fatti che abbiamo attraversato.
(Riferimento Slide Time: 00.50)

E il principio di Von Baer, ho ritenuto di essere andato un po' più veloce attraverso il principio di Von Baer l'ultima volta, quindi questa volta andremo più attentamente e voglio assicurarti di capirlo perché questo è un insieme cruciale di concetti che i ponti sviluppano la biologia e la biologia evolutiva. Quindi, quindi, dobbiamo ottenere questo chiaro nelle nostre menti. Così, tutti e quattro i principi messi insieme il punto primario è, se si va a dire un organismo più sviluppato comparativamente di un altro, non significa durante lo sviluppo embrionale di questo organismo più complesso che si attraversa le fasi adulte dell'organismo meno complesso che esistevano molto prima. Come ad esempio gli uccelli e i rettili di oggi non attraverseranno le tappe adulte dei dinosauri.

Quindi, questo è il punto principale per ora, avendo imparato un intero lotto di biologia molecolare, teoria evolutiva, etc questo aspetto sembra ovvio ma non lo era, in realtà all'epoca Von Baer propose che ci fosse una precedente teoria concorrente che stava esattamente dicendo il contrario come gli embrioni passano attraverso le strutture adulte di organismi meno evoluti. Allora, quella teoria era lì per lungo e abbastanza ironicamente mentre questa teoria sosteneva la teoria dell'evoluzione di Darwin, Von Baer trascorse tutta la sua vita a optare per la teoria dell'evoluzione di Darwin, mentre Darwin si entusiasmò in quanto questo lo aiutasse a trovare un supporto che vedremo nel dettaglio perché questo voglio sottolineare perché è un punto importante.
(Riferimento Slide Time: 02.47)

Quindi, questo tipo di pittoreschi ti racconta la stessa cosa che abbiamo visto nella slide precedente, quindi se guardate l'umano, marsupiale, pollo, salamandra, pesce, ecc. Se si guarda agli embrioni molto precoci sembrano più o meno simili. Se si assume una due specie diverse di un determinato genere se qualcuno non ha etichettato le bottiglie in cui gli esemplari non saranno in grado di distinguerli, molto precoci. Ma mentre passano, le strutture specializzate specie - specifiche diventano più chiare, come procede lo sviluppo.
(Riferimento Slide Time: 03.34)

Così questo è stato molto emozionante per Darwin perché questo dà, due punti importanti: uno è che, l'embrione molto precoce somiglia a embrioni molto precoci di organismi diversificati che hanno somiglianza in essenza; la somiglianza embrionale supporta l'origine comune, discendente da un antenato comune, e man mano che lo sviluppo procede a strutture specializzate iniziano ad evolvere e diventano più chiare.

Come progredisce lo sviluppo che supporta l'adattamento, adattamento specie - specifico. Quindi, state vedendo due interpretazioni sia coerenti con la teoria di Darwin dell'evoluzione naturale guidata, quindi il vostro materiale di partenza è lo stesso ma poi state modificandone lo sviluppo, quindi le alterazioni nello sviluppo sono il punto che dà le variazioni richieste per la selezione naturale da selezionare.

Ecco cosa questo sostiene ed è lì che Darwin era molto emozionato, un altro punto è che le relazioni evolutive diventano più evidenti quando si guarda la fase embrionale o larvale piuttosto che guardare la fase adulta e che è molto ben illustrato nei due organismi qui mostrati se si guarda il barnacolo di primo pannello e i gamberi entrambi sono artropodi crostacei. Questi hanno le gambe congiunte che vivono nell'oceano, e durante la fase larvale sembrano significativamente simili, si potrebbe sembrare un po' più piccoli e meno complessi ma complessivamente sono molto simili rispetto all'adulto. Così i taxonomisti precoci hanno classificato questo come un mollusco perché la sua struttura esterna assomiglia a quella dei molluschi e questo sembra molto diverso.

Ma mentre i gamberi e il barnacolo allo stadio larvale rivelano la loro antenata comune, quindi questo è quello che ha sottolineato Darwin per cui bisogna guardare allo stadio embrionale per una classificazione accurata degli organismi in base al loro rapporto evolutivo. Così, la tassonomia moderna, gruppi organismi basati su quello, il rapporto evolutivo viene mostrato nel modo in cui classifichiamo gli organismi.

Ecco quindi uno dei principali esiti della teoria di Von Baer quando si guarda dalla prospettiva evolutiva.
(Riferimento Slide Time: 06.25)

Resteremo con questo tema con i due o altri tre esempi così qui è uno così è un embrione di un salamandra, la superficie è aperta e gli archi faringei evidenziati nel colore viola. Si tratta di un gruppo di cellule che formano queste strutture nell'embrione precoce danno origine a questi archi di gelo e questo istomandibulare nei pesci, queste due ossa sostengono le due mascelle. Quindi non sono supportati senza questa struttura iomandibulare nei pesci, e le stesse strutture embrionali o le cellule, le arcate faringee in coccodrillo per esempio in rettile, formano questo osso quadrante della mascella superiore sull'osso articolare della mandibola inferiore. Qui vedete lentamente si ottengono due strutture che stanno supportando le due mascelle e che è una specie di loro importanza per sostenere le mascelle scende da qui a qui. E quando si va verso l'umano non sono lì come sostengono la mascella superiore e inferiore invece lo stesso gruppo di cellule ad arco faringeo forma il nostro incus e malleus le ossa delle orecchie di mezzo, così ecco come una

la struttura embrionale precoce comune è stata alterata durante lo sviluppo per sviluppare strutture specifiche per specie che siano come si adattano gli adattamenti. Quindi, questo è uno dei maggiori esiti dell'embriologia comparata e si può anche dire embriologia evolutiva.

Qui vedete che questi due campi una sorta di fusione non stiamo vedendo come due rubriche separate, e un altro esempio; (Fare Slide Time: 08.19)

Quindi, prima di entrare in questo esempio un paio di definizioni importanti per ricordare sono l'omologia e l'analogia, quindi quando diciamo l'homologia come ad esempio se prendete il braccio umano e sigillate l'arto o l'ala di uccello o batala questi sono tutti gli arti anteriori modificati in mano o nella pineta come struttura per il nuoto o per gli uccelli per volare o pipistrello per volare. Così la struttura ancestrale comune si chiama homology. Così da quella definizione, la nostra ala e ala di pipistrello e l'ala di uccello sono organi omologati. Ma se si guarda all'ala di uccello e a batala sono analoghi, quindi stanno facendo la stessa funzione entrambe le ali ma un'ala non si è evoluta da un'altra ala, il batwing non è venuto dall'ala di uccello o viceversa, così come ali questi due sono organi analoghi ma come antenati, sono organi omologati.

Quindi questo è uno dei migliori esempi per spiegare l'omologia e l'analogia nei sistemi di sviluppo e il secondo punto di cui parleremo è una prosecuzione da parte del precedente che si altera nello sviluppo aiuta nelle evoluzioni. Convergente significa completamente due diverse origini evolutive ma dato il contesto ambientale in cui devono inserirgli, indipendentemente hanno tutta la stessa struttura, quindi è quella che è l'evoluzione convergente. Quindi se osservate le cinque cifre o le cinque dita le stesse ossa qui potete vederla è solo che si sono divise e coltivate più rapidamente, quindi sono più lunghe e le cime che esistevano tra le cifre scomparvero qui ma non sono scomparse qui, quindi solo quelle due alterazioni erano necessarie per fare una batala, le dita dovevano espandersi rapidamente, crescere con più divisioni e anche lì c'è un'asimmetria come una di loro è lunga e l'altra è breve ma questo web non è scomparso. Mentre nel nostro caso in origine c'era la cinghia che ha aiutato nell'asimmetria delle cinque dita, ma per le dita a funzionare indipendenti l'una dall'altra il web doveva sparire per morte cellulare, quindi impareremo in seguito a morte cellulare programmata questo è un esempio, quindi essenzialmente si sta scolando una struttura, si stanno rimuovendo le cose da ciò che già esiste per creare una struttura. Quindi l'alterazione dello sviluppo permette adattamenti diversi.
(Riferimento Slide Time: 11.53)

Ecco, ecco un altro esempio che è praticamente lo stesso tema ma invece dell'umano stiamo guardando allo sviluppo embrionale di un altro mammifero dove stiamo guardando il mouse, quindi il pannello A mostra, in uno di essi un cinque cifre completamente sviluppate e quelle corrispondenti sono così più piccole, il piccolo dito è quello che qui va molto a lungo e se si guarda allo sviluppo embrionale nel pannello inferiore si vede che molto inizialmente entrambi sono come bud che escono dall'embrione. E mentre si va particolarmente attenti a questo dove c'è una freccia bianca, quindi nella mazza, si ha il web e sta scomparendo nel mouse, ma se si va al precedente uno il web esiste in entrambi, quindi in uno è dovuto sparire in modo che le dita possano muoversi in modo indipendente e si possono afferrarsi più facilmente mentre questo vuole avere il web ma usarlo come ala per volare. Quindi, alterazioni nello sviluppo aiutano nell'adattamento evolutivo.
(Riferimento Slide Time: 13.06)

Quindi, il punto successivo è una leggera variazione del tema essenzialmente, stiamo affermando lo stesso in modo diverso, qui le variazioni di sviluppo o le variazioni durante lo sviluppo o piuttosto le variazioni di sviluppo forniscono le variazioni richieste per la selezione naturale. Quindi qui non è selezione naturale si tratta di selezione artificiale, quindi bisogna immaginare il contesto socio - politico del mondo in cui Darwin pubblicò il suo libro, Origine di Specie. Così non ha voluto subito nella prima frase dire che le specie cambiano, non ha voluto dire che così ha costruito un lungo caso sulla possibilità che le strutture di sviluppo, le strutture di organismi facciano cambiamento e di fare quel punto, ha dato tanti esempi di selezione artificiale, come allevando, riproduttori selettivi abbiamo fatto delle varietà vegetali piuttosto poche per le nostre coltivazioni e simili animali e in particolare va in grande lunghezza sui cani.

Così eccoci a guardare un cane che ha le gambe corte, cioè perché i cacciatori che volevano cacciare un piccolo animale chiamato badger che va in gallerie strette, volevano un cane che potesse attraversare il tunnel e prendere quei badanti e per questo preferiscono quelli che hanno una gamba più corta, quindi si allevano selettivamente ogni volta che cercano quello nella prole che ha una gamba più corta rispetto ai genitori. Ecco allora che c'è una direzione, e poi alla fine ne trovano una più breve. Quindi, ora come biologi dello sviluppo, guardiamo come potrebbe accadere? Quindi tutto quello che ti serviva è una copia in più o sovraespressione di un certo fattore che stimola la differenziazione così quando hai troppo di quello prima di fare abbastanza di quelle cellule che si differenziano, quindi, quindi, fai un organo più corto, ti sei fatto più cellule e poi differenziato avresti avuto una gamba più lunga.

Così un cambiamento del gene potrebbe prevedere che la variazione necessaria per la selezione e si guardi all'altra, bastasse un singolo gene, questo non è da ricordare che i cambiamenti genetici unici sono sempre sufficienti per i cambiamenti questi sono perché la maggior parte delle volte crediamo come possa accadere questo grande cambiamento, quindi per evidenziare il punto sono stati presi esempi di mutazioni monogene. Quindi qui se si guarda un altro gene fgf-5, le sue alterazioni in espressione portano allo sviluppo follicolo dove produce un sacco di peli lunghi. Variazioni selezionabili attraverso la mutazione dei geni funzionano durante lo sviluppo. Quindi vi sta già dicendo che i geni controllano lo sviluppo, questo è un tema che arriveremo più tardi e non è che funziona solo nei cani.
(Riferimento Slide Time: 16.25)

E, quindi guarda qui, quindi questa è una mutazione fgf-5 in pazienti che portano le ciglia lunghe e un sacco di capelli all'avanguardia e guancia, quindi questo di nuovo viene dalla stessa mutazione. Ecco quindi che tocceremo un po' più tardi come modelli animali per studiare le anormalità dello sviluppo negli esseri umani. Per esempio, se si dovesse vedere questo primo negli esseri umani e si vuole capire le basi e se si può fare questo in un cane allora si può elaborare il meccanismo qui più facilmente che nei pazienti umani. Quindi il punto principale è che i cambiamenti di sviluppo o le alterazioni dello sviluppo possono generare le variazioni su cui la selezione naturale può funzionare, quindi questo è il riassunto di questo punto principale.
(Riferimento Slide Time: 17.19)

Quindi queste variazioni che si osservano negli animali è ok, possiamo vedere anomalie di sviluppo negli esseri umani? vediamo che ci sono difetti di nascita e c'è qualcosa di chiamato teratologia, quindi andiamo a guardare la teratologia.
(Riferimento Slide Time: 17.41)

Ecco allora un esempio una mutazione in un gene chiamato KIT, che è un fattore di trascrizione causa questi difetti, il difetto visibile che si sta vedendo qui è la mancanza di pigmentazione nella fronte e sull'addome, sulla pancia di questo bambino, e questo KIT si esprime nelle cellule creste neurali da cui come vi dicevo prima i melanociti, arrivano le cellule produttrici di pigmento. E inoltre si esprime in cellule che formano le cellule dell'orecchio e i neuroni intestinali e di conseguenza, questo ragazzo ha problemi di udito oltre che di malformazione del suo intestino e questo è espresso anche nei precursori delle cellule del sangue così le cellule del sangue non si formano e si esprime anche nelle cellule germinali primordiali e come cellule germinali di risultato non si formano e questo bambino è sterile. Questo ragazzo non ce la farà fino alla fase adulta ma se dovesse essere allora sarà sterile. E si può avere un difetto simile in un animale in cui mutare KIT si sviluppano difetti simili, quindi ora questo diventa un modello animale per studiare le malattie umane perché si possono ricapitolare i sintomi della malattia umana in un animale, quindi il punto principale qui è il meccanismo sottostante è probabilmente lo stesso per il normale sviluppo normalmente quello che KIT fa per lo sviluppo è improbabile poter studiare in umano. Ma se i difetti sono gli stessi in un animale allora sarete in grado di farlo in quell' animale e i meccanismi che state andando a districarvi si applicano anche agli esseri umani, quindi questo è quello che chiamiamo modello animale. Quindi i modelli animali ci aiutano a indagare i meccanismi molecolari sottostanti. Quindi questo piebaldismo ne è un buon esempio.
(Riferimento Slide Time: 19.44)

Poi, quindi questo è un difetto di nascita quindi questo è un buon esempio di fatto in realtà questo è quello per cui il titolo di teratologia dovrebbe riferirsi. La teratologia è di solito quando succede qualcosa di tossico allo sviluppo embrionale, quindi ti piace per esempio veleno che ci uccide o provoca problemi ma ci sono farmaci o condizioni ambientali che possono influenzare lo sviluppo embrionale. Un esempio classico è quello che è accaduto nei primi anni del 1960s, dove le donne incinte sono state prescritte un farmaco chiamato thalidomide è un lieve antidolorifico per evitare la malattia del mattino. Qui il punto è che questo episodio ha cambiato il modo in cui testiamo nuovi farmaci per la sicurezza. Così prima che la gente guardi se c'è qualche problema con adulti o animali, quindi e quando non c'è nessun problema allora si dice che è sicuro. Ma poi alcuni farmaci possono influenzare lo sviluppo embrionale, quindi il thalidomide ne è un buon esempio. Quindi il problema con la talidomide è questo influenzi il lungo sviluppo osseo delle membra e questo è il motivo per cui si vedono le mani e le gambe di quest' uomo estremamente brevi e parlando con le donne che questo è stato prescritto, quando l'hanno presa quanto tempo l'hanno presa e matching con il loro periodo di gestazione sono arrivati con questo grafico. Quindi se ci si prende 34 giorni dopo le ultime mestruazioni, diciamo 34 giornata entro 34 giorni dalla concezione poi si hanno problemi con lo sviluppo dell'orecchio e quindi a seconda di quando ha preso, l'embrione ha sviluppato questi problemi ma dopo di che, è sicuro non ci sono problemi. E ora in realtà la talidomide sta tornando perché è utile per trattare altre cose, tranne che non si può prescrivere alle donne incinte. Quindi la dimensione del campione penso che siano circa 400 gli individui che nascono con questo, quindi questo non è un esperimento che è stato fatto, quindi qui in base al risultato si torna indietro e si guarda cosa è successo. Ecco, questo è ciò che le persone spesso fanno per studiare molte malattie umane ed è per questo che la tenuta del medico e l'albero di famiglia sono molto utili per trovare geni collegati, quindi questo è un teratogeno. Quindi thalidomide è un teratogeno perché influenza lo sviluppo embrionale così questi sono utili per comprendere lo sviluppo.
(Riferimento Slide Time: 22.47)

Passiamo dunque ai nostri prossimi argomenti come andare lentamente verso la morfogenesi. Così, ora nell'embrione le cellule non sono statiche sono estremamente dinamiche, fanno un sacco di cose diverse che si dividono e si dividono a tassi diversi, in parti diverse, migrano, si secernono, cambiano forma, restano insieme come gruppo o si mescolano con altri gruppi, tutti quei cambiamenti accadono. E quelli sono elencati in questa tabella che va in quattro slide. Non leggerò tutti, ma i punti principali sono che abbiamo due tipi principali di cellule uno è mesenchimale dove non sono attaccati a nulla e si migrano prontamente e così all'interno che se lo si guarda si ha la condensa per realizzare un particolare tipo di struttura così è un evento morfogenico. Poi si ha divisione che fanno un sacco di cellule come il limb mesenchyme come esempio, la morte cellulare; le cellule muoiono come mesenchimi interdigitali che abbiamo già visto nello sviluppo delle cifre umane.

(Riferimento Slide Time: 24:06)

Poi si hanno più migrazioni: le cellule del cuore migrano, le cellule germinali migrano, le cellule germinali migrano su una lunga distanza per arrivare alla gonade somatica poi la secrezione di matrice e anche a volte degradare la matrice, entrambi sono essenziali per lo sviluppo. Un buon esempio è la cartilagine, quindi la cartilagine viene secreta come parte di questo e l'ECM, la matrice extracellulare è sostanzialmente secreta dalle cellule, e a volte sbarazzarsi di loro è importante se la migrazione è ciò che è richiesto per quelle cellule nella fase successiva dello sviluppo. Poi la crescita, alcune cellule semplicemente senza dividere le loro dimensioni raccapigliate, buoni esempi di cellule dei tessuti adiposi che sono le cellule adipose.
(Riferimento Slide Time: 24:49)

Poi un altro tipo di cellule sono le cellule epiteliali, dove sono attaccate, possono essere attaccate ad una membrana seminterrato così come sono attaccate l'una all'altra e queste sono quelle che fanno fogli e tubi, ecco una sezione trasversale di un tubo e queste cellule spesso, per esempio durante il cancro, queste diventano mesenchimali ed è così che avviene la metastasi. Così lo chiamano come EMT, epiteliale alla transizione mesenchimale, e capire come questo accada è un settore di ricerca attivo. La delaminazione è quando parte dell'epitelio diventa mesenchima. Poi si hanno dei cambiamenti di forma che rimangono attaccati ma poi fanno forme diverse come per esempio la formazione del polmone avviene in quel modo, quindi queste sono le diverse cose che accadono.

Quindi il riassunto è che le cellule sono molto dinamiche nell'embrione, quindi se volete seguire quali strutture provengono da quelle che cellule e quelle che quelle cellule hanno dovuto sottoporsi in termini di questa dinamica è necessario seguirle e che si chiama tracciamento di derivazione e che si chiama tracciamento di derivazione e quando si ha traccia di un embrione molto precoce avendo pochissime cellule poi basandosi su quali strutture formate da quelle cellule si può tornare all'embrione precoce e mappare diverse regioni di esso provenienti da questa regione e che si chiama mappatura del destino.
(Riferimento Slide Time: 26:31)

Ecco allora che il nostro prossimo grande argomento probabilmente questo è l'unico argomento che faremo oggi per il resto del tempo. Quindi, ti spiego come andiamo.
(Riferimento Slide Time: 26:41)

Così si guarda all'embrione molto precoce di quattro organismi diversi. Così tutti i vertebrati, stiamo osservando una fase iniziale e questi colori vi dicono che questa parte sta per formare l'epidermide della pelle e poi come non è visibile in questo ma qui questo è l'ectoderm neurale che formerà il sistema nervoso centrale e questo formerà il notochord e questo è endodermo, quindi è ciò che è mappato. Ciò che significa è che le cellule di questa regione alla fine danno origine all'endoderm; ecco cosa è la mappatura del destino. Così si sta mappando e si ha un embrione precoce, che tipo di strutture arriveranno in seguito da quella parte è quello che è una mappa del destino e quando lo si guarda alcune caratteristiche conservate sono evidenti come se ne indicizzo uno se si guarda il notochord in tutte le sue caratteristiche. Quindi stiamo guardando dall'alto ok che stiamo guardando la parte posteriore, non il lato ventrale, quindi è sul centro superiore, è dove si ha il notochord che si forma e che è proprio adiacente all'ectodermo neurale da cui si ha la formazione del tubo neurale che abbiamo visto nel ciclo di vita della frog così questo guadagno di struttura vi racconta la somiglianza precoce tra questi vertebrati, quindi ora guardiamo come facciamo a fare questa mappatura? Quali sono le varie tecniche che ci permettono di risalire alle cellule? (Fare Slide Time: 28:24)

Lo guarderemo di nuovo storicamente in modo da capire come tutto è iniziato. Così Conklin ha preso un organismo chiamato squirt di mare che è perché i loro embrioni precoci hanno cellule piuttosto grandi e cellule diverse ma fondamentalmente i blastomeri hanno pigmenti colorati diversi e quindi si può osservare dove quei pigmenti vanno come i proventi della divisione cellulare e quindi ha iniziato con quelli così è l'osservazione diretta. Così si può fare in molti organismi l'osservazione diretta per esempio C. elegans si può fare che l'osservazione diretta significa non con l'occhio ma serve un microscopio dissetante per osservarli e osservarli.
(Riferimento Slide Time: 29:08)

Così questa è la mappa che finalmente è arrivata in una fase molto precoce, questo è il polo animale e vegetale ed è riuscito a mappare il futuro ectodermo al polo animale e endodermo al polo vegetale e poi le altre strutture come etichettate qui e questa è come 16 stadio di cella che penso o 8 cell. Così dove si hanno le singole cellule che già si stanno comportando in questo modo si farà solo l'ectodermo epidermico. E poi il sistema nervoso arriverà da a4.2 e poi endodermo quindi questo non farà che l'unico endodermo da questa cellula si otterranno cellule che formano il notochord anche come parte del sistema nervoso. Così i muscoli arrivano da questi e i muscoli non vengono da questi così se si prende in carico non succede nulla allo sviluppo muscolare.
(Riferimento Slide Time: 30:07)

Quindi questo è un insieme complesso, qui questa linea verticale è ciascuna divisione e la linea orizzontale è la due e di solito, questa non è disegnata su scala, questa lunghezza orizzontale indica il tempo impiegato per quella divisione cellulare. Così è così che disegnano una mappa di derivazione. Finora abbiamo lineamenti completi per un solo organismo, una specie chiunque lo sa? le persone hanno ricevuto il Nobel per questo, C.
eleganti, Drosophila è fin troppo complesso che non si vuole farlo nel prossimo futuro, il suo cervello come milioni di cellule. Così, C. elegans, adulto C. elegans hermaphrodite ha 959 cellule, quindi sappiamo esattamente queste 959 cellule, da dove provengono dallo zigote alle 959 cellule e cioè il processo, questo allestimento di un organismo nel tentativo di trovare l'intero allestimento di un organismo.
Pensavano che una volta che conoscessimo l'insieme delle cellule e le loro origini sarà più facile teorizzare il suo sviluppo. E nel processo finirono per trovare una cellula, per esempio, se dovessi usare questo C. elegans lineage. Diciamo che AB2 divide in A3 e B3 e poi questo si divide in questo e questo divide in questo e poi questo divide questo, embrione dopo embrione si vede lo stesso schema e in un primo embrione quando si trova A6.1 si divide per esempio A7.1 e che è morto. Poi gli scienziati hanno pensato, forse ho sbagliato qualcosa mentre lo facevo e poi si va a rifarlo per n numero di volte e ogni volta che si può prevedere A7.1 sta per morire e cioè quando si sono resi conto che non muore per infortunio o malattia o lesioni, è programmato per morire. Così è così che il web è scomparso qui per rendere le dita indipendenti, così è quello che chiamiamo morte cellulare programmata. Ecco quindi un esempio di scoperte non intensi che accadono quando si concentra sulla ricerca scientifica di base così che è un punto lontano dalla biologia dello sviluppo qui ma è un buon esempio, quindi è così che è stata fatta la mappatura del destino iniziale e il tracciamento della lineage.
(Riferimento Slide Time: 32:26)

E questo funziona facilmente dove si hanno grandi blastomeri e ogni blastomere ha pigmenti distinguibili e la divisione cellulare è invariante. Quello che intendo per invariante è, lo schema di cleavage e posizione delle cellule, e il numero di cellule è costante da un singolo embrione a un altro embrione individuale durante lo sviluppo. Non è così in un organismo complesso come gli esseri umani, siamo di dimensioni diverse, giusto? Quindi, non necessariamente il numero di cellule è identico o la cleavage è invariante durante la nostra embriogenesi.
(Riferimento Slide Time: 33:15)

Quindi questo è il finale, quindi è l'embrione di squirto marino completamente sviluppato dove hanno fatto una dissezione e lo hanno fotografato usando un microscopio confocale e le diverse strutture etichettate qui, sono state nettamente colorate e questo potrebbe essere ottenuto attraverso quello che abbiamo appena visto attraverso il tracciamento della lineage o la mappatura del destino così è come sappiamo che questa struttura è il notoglio nell'embrione e questa struttura è ciò che sta per formare il tubo neurale e così via.
(Riferimento Slide Time: 33:46)

D'accordo, quindi va bene per il tunicato embrione dove i pigmenti hanno aiutato, cosa dire degli altri organismi. Quindi questo è un tentativo di Vogt, quello che ha fatto è che ha mescolato agar con coloranti diversi e questi coloranti sono coloranti vitali, quindi ciò che significa colorare vitale è un colorante che viene ripreso da una cellula vivente e non danneggia la divisione cellulare o lo sviluppo dell'organismo, quindi essenzialmente si può etichettare certe parti dell'organismo vivente fornendo questo colorante. Quindi non uccidono l'organismo. Quindi un esempio comune che facciamo in molti laboratori è cercare cellule apoptotiche, quindi incubare le cellule o nutrire l'organismo con un colorante vitale, chiamato acridina arancio o syto-12 e solo le cellule morte cellulari programmate lo prenderanno, e poi si potrà vedere che queste sono le cellule che stanno sottoponendo apoptosi. Così si tratta di un colorante vitale, le colorazioni vitali delle colorazioni che vivono le cellule, questo è il punto principale per cui ha mescolato i coloranti vitali con l'agar e ha permesso di asciugare e realizzare piccoli chip di questo agar che è impregnato di colorante e delicatamente posizionato sull'embrione. Questo è un embrione di frog, anfibio, parti diverse hanno colori diversi e una volta che le cellule hanno preso il colorante ha rimosso l'agar e guardato cosa succede alle cellule o al gruppo di cellule che ha macchiato con questi coloranti.
E vedete questo è il labbro dorato dove le cellule vanno ad entrare e poi le vedi come le cellule si moltiplicano e migrano a seguire con i coloranti. Quindi questa è una vista dorata del tubo neurale, queste sono le due creste neurali, e poi quando si prende una sezione trasversale e se la si taglia si vede l'altra vista laterale e poi si vede dove sono migrate, quindi le cellule di questa regione sono migrate in questo modo. Quindi questo è un altro modo di tracciamento di derivazione. Quindi un problema con questo è come le cellule si moltiplicano questi coloranti si diluiscono e alla fine diventa difficile da vedere, così come la modifica di questo è usare coloranti fluorescenti molto più intense e quindi durano poco più a lungo.
(Riferimento Slide Time: 36:15)

E, che viene mostrato in questo esempio di zebrafish. Qui un gruppo di cellule, in questa regione ciò che vedete nel pannello giusto, si ha colore verde, si tratta di una molecola fluorescente che viene iniettata nelle cellule lì e poi si vede cosa succede e poi si vede qui che si trova nell'area midbrain e all'avanguardia del tubo neurale, quindi è qui che queste cellule sono migrate a e utilizzando coloranti di colore diverso e etichettando diverse parti dell'embrione.
(Riferimento Slide Time: 36:52)

Possono mappare in questo modo. Così queste regioni dell'embrione precoce si sviluppano in queste strutture in seguito. Quindi questo labeling fluorescente è avanzato un po' più di coloranti vitali, ma poi non hanno fatto una mappatura molto estesa e sofisticata con questo. Quindi queste sono come le osservazioni iniziali con embrioni come le rane, ma poi velocemente i coloranti fluorescenti e in questo momento si usano metodi genetici più sofisticati. Così vedremo che mentre si va avanti.
(Riferimento Slide Time: 37:28)

Qui si approfittano quindi della somiglianza in specie strettamente correlate, quindi qui prendete due uccelli uno è quaglia e un altro è un pulcino, quindi in una fase embrionale più o meno simile prendete le cellule quaglie di questa regione e la mettete sulla regione simile nel pollaio embrione e guardate cosa succede. Qui potete quindi seguire principalmente a causa di due cose illustrate qui: una è che avete un anticorpo che riconosce solo le cellule quaglie e non le cellule di pollo e lo vedete. Ecco quindi il tubo neurale qui, quindi la cresta neurale si è fusa, qui la piega si è fusa e si vedono le cellule quaglie messe lì. E un'altra cosa è guardare alle sue differenze morfologiche cellulari le cellule quaglie hanno un nucleolo poco più grande e che aiuta nell'identificazione delle cellule di quaglia da cellule di pollo e si può estendere ulteriormente come si può usare l'etichettatura radioattiva.
(Riferimento Slide Time: 38:29)

E qui, un embrione è coltivato in aminoacido radioattivo contenente medium e l'altro è senza radioattività e poi si prende e si trapiantano, strutture simili in uno stadio simile, e poi si vede dove si migra ed è così che hanno trovato i melanociti. Queste cellule epidermiche nell'epidermide che rendono il pigmento in realtà provengono dalla cresta neurale e poi si hanno altre cellule come le cellule gonadiche somatiche, le cellule gliali queste provengono dalla cresta neurale e questo mostra anche le cellule che migrano esteticamente.
(Riferimento Slide Time: 39:12)

Quindi un po' più avanzato qui un pollaio che ha la pigmentazione tutta attraverso la sua parte è stato preso e trapiantato nell'altro che non ha avuto alcuna pigmentazione e ora si aspetta e si guarda quando si esce e si vede questa parte del corpo dove si hanno le cellule pigmentate. Così puoi arrivare fino a questa fase in cui hai iniziato e quali cellule contribuiscono a questo. Quindi l'ultimo esempio di questo è il modo genetico di farlo.