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Approcci agli studi di sviluppo vegetale

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Benvenuti nella classe odierna di Biologia Sviluppatia, dove andiamo a studiare come la biologia dello sviluppo del tostudio.Così, uno degli approcci molto importanti e e di spicco che prendiamo per studiare lo sviluppo delle piante è Molecular Genetics based approcach.Quindi, la genetica molecolare è sostanzialmente quella di studiare come un particolare gene in un genoma regolatesa un particolare processo di sviluppo nel plants.So, ci sono due grandi approcci nella genetica molecolare, che di solito entriamo allo studio della biologia dello sviluppo vegetale, uno è l'approccio basato sulla genetica in avanti e l'approccio alla genetica inversa basato approaches.Così, nella genetica in avanti ciò che facciamo iniziamo con un mutante o con il fenotipo, e l'ingresso per identificare ciò che è un gene associato a tale fenotipo - considerando che, in caso di genetica inversa prima definiamo il nostro gene di interesse, e poi wetry per capire o progettiamo sperimentazione per individuare quella che è una specifica funzione di sviluppo di quel gene.Così, si può guardare la diagram.Così, nella genetica in avanti, iniziamo con il fenotipo e poi mappiamo il genotipo genetico associato a questo fenotipo. considerando che in caso di genetica inverosimile, abbiamo gene, identifichiamo il gene prima e cerchiamo di capire, questo gene ha un qualsiasi ruolo da giocare nello sviluppo delle piante, andif è così, cosa è il suo funzione specifica nella crescita e nello sviluppo delle piante?Quindi, ora ne prenderemo uno da one.Quindi, prima discuteremo di più sull'approcciofonico basato su misura in avanti. Così, come ho detto il primo passo della genetica in avanti è che si deve avere un mutante; mutante è molto importante, quindi o qualsiasi variante.Quindi, mutante significa un difetto particolare nello sviluppo. Quindi, il difetto è importante perché se non si ha anormalità, è difficile tracodire qual è la normalità o qual è il meccanismo che sta regolando il normale sviluppo .Quindi, tipicamente quali sono i diversi passaggi che seguiamo durante l'inoltro della genetica in avanti?Il primo approccio sta individuando un fenotipo evolutivo desiderato o un mutante con il fenotipo. Poi una volta identifichiamo questo mutante, allora ovviamente, analizzeremo la genetica o ereditando ereditarietà di questo mutante se è dominante, recessiva, semidominante. E poi una volta che conosciamo lo schema del mutante o il modello di eredità del mutante, allora andiamo e cerchiamo di mappare il loci.genetico, questo è importante allora cercare di capire che cos' è il loci genetico che è attualmente responsabile di questi difetti di sviluppo?E poi passo finale nella genetica in avanti cosa prendiamo, poi validiamo il genotipo andfenotipo associazione.Così, come facciamo?Il primo passo normalmente ci prendiamo un mutante o eventuali varianti, le varianti naturali sono disponibili anche per studiare, e poi e poi finalmente, facciamo la complementazione per validare questo one.Quindi, la prima cosa importante in qualsiasi studio di biologia dello sviluppo vegetale è quella di aggiustare la vostra domanda biologica. Quindi, se ricordate le nostre lezioni precedenti, abbiamo parlato di whatare i diversi eventi di sviluppo che si svolgono durante il processo di growthand sviluppment.Quindi, a seconda di come si può prima scegliere la vostra domanda s.So, è possibile definire a quali aspetti dello sviluppo si desidera studio.Per un esempio, sei interessato a studiare quali sono i loci genetici che rispondono a mantenere il meristem, secondo eventi di sviluppo quello che puoi studiare è l'identitàe il modellismo d'organo. Quindi, vuoi capire che quali sono i geni o quali sono i geni genetici, le elementari genetiche sono responsabili di definire una particolare identità di un organo o di un tessuto. E la seconda cosa è che si può identificare quali sono i geni o quali sono i genetici responsabili della modellazione, questo è importante nel processo di una manutenzione plantologica. Poi si possono identificare mutanti che mostra anormalità in forma o dimensione di un particolarorgano, in particolare una parte della pianta. E poi un'altra cosa molto interessante quello che si può studiare quali sono i mutantoni dello sviluppo che influenzi la transizione di fase. Quindi, se si ricorda ancora la nostra classe precedente, quindi abbiamo già discusso che durante il growthand lo sviluppo, una pianta attraversa fasi diverse a partire dalla fase di embriogenesi. Poi nell'embriogenesi prima si subisce il processo di sviluppo giovanile, il thene è una transizione dal novellame allo sviluppo vegetativo degli adulti. E poi da vegetativo adulto sviluppo, c'è un'altra transizione o una transizione importante da vegetativo allo sviluppo riproduttivo. Quindi, queste fasi sono regolate da nel time.Quindi, cosa possiamo fare?Possiamo identificare una variante o un mutante in cui questa fase o questa transizione sono difettose. Un'altra cosa importante se si ricorda la classe precedente, abbiamo parlato dell'attivazione del branching o dell'attivazione di growth.Quindi, questo sia questo percorso di percorso è regolato e si verifica solo ad un certo tempo point.So, è anche importante o come si può immaginare che siano anche regolati da elementari genetici. Possiamo anche identificare o schermare un mutante dove questi processi sono defective.Quindi, ora andremo a guardare quali sono i diversi modi per identificare il mutant.Quindi, il primo passo della genetica in avanti che abbiamo si stanno portando qui per identificare uno sviluppo desiderato o mutante desiderato. Il primo e forse più importante rispetto agli approcci riproduttivi è stato quello di guardare la variazione.Così, in questa natura, ci sono molte variazioni nelle fasi di sviluppo, organi, strutturazioni.Così, se si cerca l'esempio, questo pannello superiore, quindi ecco diverse adesione di Arabidopsisthaliana.E ciò che si guarda ci sono variazioni morfologiche. Quindi, se si guardano le loro foglie, il numero di foglie, la dimensione delle foglie, la sove sono enormi quantità di variazione anche all'interno della stessa species.Quindi, cosa possiamo fare?Possiamo scegliere uno qualsiasi di questi due contrasti due con l'attuale contrasto con l'attuale contrasto con il tratto diverso, e poi si può provare a identificare l'associatedloci. Se guardate qui, quindi questa è sostanzialmente variazioni alla sesta rosetta lascia, quindi si può vedere che anche non solo la morfologia complessiva, ma la forma e la dimensione di un organo specifico mostrano anche una grande quantità di variazione su queste specie o attraverso le accessioni. Ecco la variazione dell'architettura.Così, si possono osservare questi tutti gli impianti sono confrontati al momento di dopo la transizione floreale transitoria si è verificata. E si può vedere che attraverso queste diverse varianti o diverse accessioni, ci isa grande quantità di variazione nella loro struttura finale generale o finale di fila architetta.Così, questa potrebbe essere una fonte in cui è possibile identificare un particolare tratto di interesse, si può desiderare di studiare il gene associato. Secondo modo di muoversi è possibile indurre le mutazione.Quindi, si possono creare piante mutanti dove cercare un fenotipo speciale. Ci sono molti modi per farlo, non ne parleremo più, ma possiamo fare qualche esempio di modo molto diffuso per studiare la per generare tesviluppo di mutants.Così, ci sono tre principali categorie, mutageni chimici, mutagene fisiche e biologicalmutagens. Nei mutageni chimici la più frequentemente utilizzata è EMS; EMS genera una pointmutation.Quindi, ciò che succede si vedrà nella slide successiva che crea una sorta di cambiamento di thenucleotide in un modo che la coppia base GC si trasforma in AT base pair.Quindi, questa è una sorta di mutazione puntiforme e questa qualsiasi mutazione del punto ha molto beneficio. Il secondo mutagene è mutageno fisico dove si possono usare diversi raggi di radiazione elettromagnetica, raggi X, luce UV e possono indurre mutazioni casuali nel genoma. E noi faremo un esempio di radiazioni di raggi gamma. Terzo modo di generare mutanti sono i mutageni biologici, dove stiamo usando un siero di batteri chiamato Agrobatterum.And Agrobacterium praticamente stiamo usando questo sistema di trasformazione mediato da Agrobacterium, e vogliamo creare un gene del tipo di tipo basato su cellule inattivazione.Così, di nuovo se si guarda come funziona EMS, quindi supponiamo che qui si tratti di un basettaggio GC. E se si tratta con lo SME, cosa fa; cambia modifica questo nucleotidi theG e aggiunge metilene. E una volta che questa modifica si è verificata nel prossimo round di replicazione questo metylatedG non può accoppiare con la C, invece può accoppiare con il T. Quindi, ora ha aggiunto T in un solo punto e una volta questo DNA si sottoporrà al secondo round di replicazione al posto di T, naturalmente A sarà added.Quindi, se guardiamo da qui a qui c'è una transizione di coppia base di CG alla coppia base TA. Questo è creare una sorta di mutazione del punto di riferimento. E questo è uno dei potentissimi mutagene chimici che utilizziamo o persone che stanno lavorando nel campo della biologia dello sviluppo è esteticamente usato per generare punto mutations.Quindi, che ne fai di questo?Quindi, il modo di generare facciamo l'esempio tipico di Arabidopsis thaliana.Quindi, prendete un gran numero di semi, ed esponete i semi con la sostanza chimica. E cosa vi aspettate?Ci si aspetta una mutazione casuale in alcuni semi, ovunque nel genoma, non si può controllare. E poi si genera una popolazione dove si avrà qualche mutante, qualche mutante. E ogni qualvolta questa mutazione si verificherà nella linea germinale e si prendono queste piante, c'è una possibilità, se la tua pianta è arrivata dai semi non mutati, avrà una normale, creerà uno schema normale, ma c'è una possibilità che tu scherzi una pianta che sta arrivando dove il genoma è stato già mutated.Quindi, hai generato qualche mutazione puntiforme e come ho detto che in questo modo di generatingmutazione è totalmente casuale. Quindi, devi schermare una popolazione molto numerosa di mutante per trovare il tuo desiderio mutante. Poi scherzi questa popolazione e cerca il tuo fenotipo, aggiudica il tuo fenotipo. Per prima cosa, supponiamo che se vuoi studiare lo sviluppo della radice, allora youlook un mutante in cui la radice è difettosa. Se vuoi studiare lo sviluppo spara, trovare o schermo per mutante, il fiore è difettoso, qualunque sia il tuo interesse, puoi aggiustarlo e poi provare a identificare un fenotipo mutante. E sappiamo dalla genetica questo mutante può essere dominante, recessivo, canta sia in condizione di homozygous o condizione eterozigote; questo tutto ciò che si canalizza, e si capisce che cos' è la schemn.So, questa è la radice di Arabidopsis, questa è una radice di Arabidopsis, questa è una tipica o primissima stageArabidopsis. Quando questo seedling era la mutagenesia EMS ed era e la gente stava cercando qualche difetto di difetti nella radice, e quello che osserviamo che se si guarda questo, lo sviluppo spara piuttosto normale. Ma c'erano tre mutanti indipendenti, che è stato identificato da questa popolazione dove lo sviluppo delle radici era affettuoso. si vede che sono radici molto corte. Non solo questo è uno strumento potente. Si può addirittura realizzare uno schermo genetico molto sofisticato. Per esempio, se si guarda queste due foto, qui vogliamo identificare il tessuto modellante in un tessuto molto particolare che si chiama phloem.Quindi, si tratta di una proteina fluorescente verde proteica. E cosa succede che se si esprime o se si produce la proteinina fluorescente verde nelle cellule di phloem, e si arriva a distribuire in theroot tip.Now, se qualcuno vuole identificare cosa sono il locus genetico o quali sono il gene whichis responsabile di dare una corretta identità alla cellula di phloem o di regolamentare una proprietà differenziata alla cella di phloem, è possibile mutare queste piante e guardare la pianta in cui questa proprietà di phloem è affettuosa, qui si può vedere che abbiamo il segnale fluorescente verde da qualche parte qui, ma in qualche modo il fluorescente non si muove, il GFP non si muove, questo racconta che in questo mutante qualche aspetto di entrambi gli sviluppi di phloem sono affettualità che stanno trasportando le molecole sono affected.Così, puoi sistemare qui la tua domanda biologica e poi puoi andare a risalire quali sono i loci genetici associati a questo ok.Analogamente, questo approccio mutageno che si può assumere, supponiamo di avere già avuto mutante, si conosce funzione di un gene particolare attraverso la genetica in avanti. Si può cercare di identificare altri componenti genetici di quell' intero pathwayby inducendo mutazioni e screening per le mutazioni del secondo sito identificativi, identificando suppressor.Quindi, si può do.assumere questo gene che si chiama AG AGAMOUS gene.So, in questo mutante, questo è un singolo mutante, si può vedere qualche fenotipo, un fenotipo isindeterminato floral meristem no carpello, ma stamen sta bene. Quando questo mutante è stato mutato e ha cercato un'altra mutazione del secondo sito, così è stato identificato un altro mutante che è stato identificato hua 1, hua 2; e questi mutanti insieme a mutanti mutanti sono ancora lì, ma anche le stameni sono gettingconvertiti in petal.Quindi, la mutazione del secondo sito può potenziare la prima mutazione. Un caso simile, puoi qui arrivare a 1, a 2, da solo non hanno alcun fenotipo, non c'è un fenotipo unico, non c'è un fenotipo evidente, ma quando si screenfor altri mutanti di ordine superiore, così hua 1 e 2 con la gallina 1, c'è una perdita di floraldeterminacy c'è la conversione omortica di stamen in petal.Analogamente, hua 1, e hua 2 con il gene fa 10 c'è perdita di determinatezza floreale, c'è perdita di determinatezza floreale e conversione. Quindi, se si guarda questo è un modo molto potente per eseguire uno schermo genetico speciale o molto mirato e identificare il doppio mutante, triplo mutante, e poi cercare di capire l'intero percorso genetico in cui si può tracciare il patogeno genetico che tutti i geni sono responsabili di regolamentare un particolare processo di sviluppo. Un'altra cosa importante se si guarda qui si tratta di uno screening a soppressor.Così, supponiamo di aver identificato un mutante dove la foglia è difettosa. Se guardate qui questo è tipo selvatico ci sono così tante foglie e forma ed è diverso. Ma quando si ha un mutante dove si alterna il numero delle foglie e la forma e la dimensione delle foglie arealtered.Ora, ho identificato un gene o un componente genetico che è responsabile di questo modellamento, voglio identificare quali sono gli altri geni o quali sono gli altri componenti genetici che interagiscono con questo gene per fornire questa particolare forma e dimensione. Si può prendere questo mutante e ora si può cercare il doppio mutante dove anche le anteprime sono soppresse. In questi casi si sta aggiungendo loro mutanti e si sta identificando un fenotipo mutante più grave. Qui stiamo cercando un mutante in cui anche il fenotipo esistente sta scomparendo per identificare entrambi i tipi di geni. Ok non andrò nel dettaglio, ma potete guardare questa foto qui la mutagenesia di gamma, le radiazioni che si usano per mutare le piante. E quello che potete vedere che ci sono molto diversi tipi di mutanti con fenotipo diverso, si può vedere fenotipo fenotipo, fenotipo a foglia, fenotipo a foglia, fenotipo fiore, tutto questo tipo di fenotipo o mutanti possono essere generati con questo mutagenesis.Così, questi sono i due modi di fare mutagenesi.Così sono i due modi molto importanti per generare un mutageno biologico di mutantesi. Qui ci sono tre principali approcci che si sta facendo. Prima uno è la mutagenesia T - DNA che viene fatto da Agrobacterium mediato, l'inserzione di T-DNA. Secondo è la mutagenesia basata su transpositi e terza è la marcatura di attivazione mutagenesis.Così, nei trasposoni tutti voi avete studiato nel vostro corso o in precedenza che i trasposoni sono gli elementi genetici mobili che naturalmente presenti nell'organismo, e cantano in modo canonico nel genoma che è il motivo per cui sono tutti chiamati anche jumping genes.Quindi, possiamo usarli come tecnica per sconvolgerci un gene particolare e identificarne fenotipo ematico, cosa possiamo aspettarci attraverso questo?Quindi, qui in sostanza questo processo si chiama inattivazione inserzionale o mutagenesis.Così, cosa succede?Quindi, o prendi transposon o prendi l'attivazione dell'attività; l'attivazione tagging è diversa, ma se prendi T-DNA o trasposon.Quindi, ciò che praticamente stai facendo, stai permettendo a questa molecola di inserire casualmente il genoma. E se succede che, è stato inserito nel gene o negli elementi normativi del gene, può influenzare l'espressione o la funzione del gene e che provoca qualche mutantfenotipo, queste sono alcune possibilità.Supponiamo che se questo è stato inserito nella regione codificante, potrebbe disturbare la codingregion e si potrebbe ottenere una perdita di funzione fenotip.Così, dove il gene è dirompente, non si fanno proteine funzionali ed è per questo motivo che si avrà un fenotipo a causa della perdita dei geni. La seconda possibilità è che se l'inserzione avviene in qualche modo nella regione promotore oruntraduzione.it, le regioni promotrici si sa che questo è molto importante per regolamentare l'espressione e l'espressionpattern di una regione gene.UTR - Regione Unita, non sono coinvolti direttamente nella codifica della proteina, dei natalizi avviene attraverso la regione.it non tradotta, se c'è inserimento o interruzione a causa del T-DNA o dei trasposoni in queste regioni, cosa ci aspetteremo?Possiamo aspettarci un'espressione ridotta o un modello di espressione alterata. E in entrambi i casi potremmo avere il fenotipo. Un altro modo è che accade che in qualche modo l'inserzione accada in un gene o negli elementi tegenetici e possa anche potenziare l'espressione. Questo è più rilevante quando si parla di marcatura di attivazione, ma è stato anche seenche se l'inserzione avviene da qualche parte nel promoter o succede nell'elemento whichis like silenziatore o repressore di un gene. E se questo inserimento sopprime o uccide i regolatori, allora si potrebbe avere incrementi. Ma ancora come ho detto che questo processo sono totalmente casu.Così, c'è anche la possibilità che ci sia un inserimento multiplo nello stesso genoma del sito multiplo e questo possa generare un knockout multiplo o abbattere qualunque sia la condizione di disturbo ok.Quindi, parleremo brevemente di come la mutagenesi di T-DNA si ricorre .Così, Agrobacterium è un batterio che si chiama Ti plasmid, plasmide che si sa che è un plasmide cromosoma extra. E cosa succede che quando i batteri infettano una cellula vegetale, una sezione una porzione di plasmidi tisplasmid Ti che si chiama T-DNA viene trasferita nello stabilimento cell. E poi questo T-DNA si è integrato nel genoma delle piante, ma che l'integrazione è totallyrandom.Così, può andare e integrarsi anywhere.Quindi, se volete creare e ci sono alcuni elementi che possono essere più rilevanti nella transgenica, potreste discutere di infuttivi. E cosa succede qui che se puoi ingegnerizionare geneticamente questo T-DNA, puoi praticamente usare questa tecnologia per generare mutants.Così, cosa fai, in questo bordo sinistro e destro puoi mettere un marcatore visibile, questo ti aiuterà ad identificare le piante dove si è verificato l'inserimento o te può puta una sorta di marcatore di selezione. Selezione marcatore, puoi inserire un antibiotico resistenza gene.Quindi, puoi praticamente selezionare direttamente il transformante usando questo antibiotico. E poi usare questo e generare un gran numero di piante transgeniche. E poi scherza su un marker di selezione visiva o selezionando sull'antibiotico. E questo è stato molto usato nella pianta modello Arabidopsis thaliana. E infatti, di collezioni complete di queste piante di inserzione T-DNA o mutanti si generano, ed è stata conservata o mantenuta come azienda di un grande programma dove chiunque acrosse il globo possono ordinare queste linee, possono utilizzare per poi il proprio studio specifico.Quindi, se si guarda come sembrano, quindi tipicamente è così che è così. Quindi, se si fa un esempio questo è un gene, e quello che è stato scoperto che attraverso il processo di inserimento di T - DNA, l'inserimento di più siti è stato generated.Così, in alcuni mutanti è stato inserito qui; qui; qui; qui; si può dire che per questo gene almeno 6 allele è stato generato attraverso il T-DNAinsertion e tutti i 6 mutanti hanno fenotipo. Così, se si considera questo è un normale impianto di tipo selvaggio, e i mutanti sono 1, 2, 3, 4,5, 6, a seconda del loro sito di inserimento, ci sono variazioni di fenotip.Così, tutti questi mutanti possono essere semplicemente generati integrando il T-DNA.So, il secondo modo di generare mutazione è la mutagenesia basata su misura. Un trasposone molto usato è l'Ac Ds based.Quindi, ciò che accade Ds è l'elemento del trasposone che effettivamente salta da un luogo e si fa integrato all'altro posto. E Ac è la parte che aiuta nella process.Quindi, è possibile generare un plasmidi Ti plasmidi puoi ingegner Ti plasmid e tu puoi mettere Ac qui in un plasmidi Agrobacterium; puoi mettere Ds in un altro plasmidi Ti plasmidi in theAgrobacterium.E quello che puoi generare linee transgeniche indipendenti una per gli elementi Ac un elemento di forDs. La cosa importante è che l'elemento Ds non può saltare fino a quando e a meno che l'elemento Ac possa funzionare in trans, quindi hanno bisogno di non stare insieme. Anche se se sono presenti nella stessa pianta a diversi loci genetici, è bene, possono ancora funzionare. E poi quello che fai tu prendi questa pianta; e se li incroci si sta praticamente portando l'elemento Ac come elemento di Ds nella stessa pianta transgenica, e una volta che questo Ac sarà disponibile questi Ds inizieranno la trasposizione. E durante questo la trasposizione può andare e si può inattivare o ottenere insertedor integrati a diversi loci genetici e che potrebbe creare un mutante evolutiva. Vedi l'esempio qui di seguito, si tratta di piante di mais, sono stati generati alcuni mutanti, questi mutanti, le foglie non sembrano normali. Questo è più tipo di foglia di drooping che stanno cadendo off.Ok, un altro trasposone molto importante che viene usato per la generatingmutazione è Tos 17.Tos 17 è un retrotrasposon ed è molto importante perché questo transposon normallyè stabile allo stabilimento per adulti o nella fase successiva dello sviluppo .Così, una volta che è l'elemento è presente, ma non è molto attivamente sottoposto al processo di trasposizione. Ma se si genera un callo da queste piante, a callo stadio questo traspositore viene attivato e si avvia jumping.Quindi, in particolare per quelle piante in cui possiamo generare un sacco di mutazione inserzionale di questo uno. Riso è un ottimo esempio di it.Quindi, quello che si può fare, si può fare un callo; nel callo si verificherà una trasposizione di geni o loci diversi. E poi usare questo callo per semplicemente rigenerarsi attraverso il processo di coltura dei tessuti e realizzare pianta transgenica. In queste piante transgeniche è possibile identificare un difetto di sviluppo, mutante dello sviluppo e si possono generare raccolta di simili mutanti. Qui sono pochi esempi nel riso che usano questo Tos 17 retrotrasposone di mutanti sono stati generati. Si può guardare qui questo è il cult. Poi si ha una specie di fiore anomalo, si ha una sorta di fiore anomalo, si ha un panicino molto denso, il panicone è praticamente inflorescence.Quindi, denso panicone significa avere più panicetta filiali, più numero di fiori, più numero di seeds.Così, questo tutti i mutanti sono stati generati usando la trasposizione posteriore Tos 17. Entrambi hanno questi approcci normalmente l'Ac, gli approcci basati su Ac o T-DNA based approcachesnormalmente o solitamente genera perdita di funzionalità mutanti, perché potrebbero uccidere i geni sono più inclini a disattivare un gene. Ma un altro modo per uno studio una funzione gene che se si può potenziare l'espressione di un gene particolare, e come si può potenziare?Così, qui questo si chiama guadagno di funzione. Un modo per potenziare è che non si cambia il loro dominio di espression.Così, si esprimono ancora nello stesso tessuto, dove normalmente si esprimono, ma il loro livello di espressionalità sale. In secondo modo, se si cambia il loro dominio di espressione o si può far sì che si cambi di espressione una cellula o nel tessuto, dove non sono state espresse in precedenza. E se questo tipo di regolatori genetici sono sufficienti a dare una corretta identità o gli eventi di proprietà dello sviluppo, se sono sufficienti ad avviare quel tipo di programma, daranno un fenotipo diverso. E questo viene utilizzato attraverso un processo che si chiama attivazione tagging.Quindi, cosa succede nella marcatura di attivazione, inserimento casuale di più potenzicer.Dunque, i potenziatori sono gli elementi genetici, che possono aumentare l'espressione di un gene.Quindi, cosa stanno facendo le persone?Stanno usando più copie di potenziatore e sono geneticamente ingegnerizzati T-DNA ora Ti plasmid e stanno usando questo potenziometro attraverso la trasformazione mediata di Agrobacterium e stanno generando un gran numero di piante. E poi ci sono quelle piante che stanno cercando ok, se c'è una pianta dove c'è un fenotipo, e molto probabilmente questo fenotipo potrebbe essere a causa dell'attivazione di un gene.Quindi, supponiamo che venga inserito da qualche parte qui molto vicino a promoter di un gene particolare o gli elementi normativi di questo particolare gene, ci sia la possibilità che perché della sua attività di potenziamento, potenzierà l'espressione di questo gene o di questo gene. E potreste avere un fenotipo evolutivo in questo caso. Questo è un esempio in cui la marcatura di attivazione è stata utilizzata per generare mutazioni. Come potete vedere questo è il sito delle mutazioni e queste mutazioni possono effettivamente aumentare la theespression.Quindi, se si guarda questo è un tipo selvaggio, questo è RT-PCR, discuteremo di un po' di tempo in anotherclass, come facciamo esattamente.Ma questo è su misura per quantificare il livello di RNA messaggero di un particolare gene.Quindi, se si guarda questo gene e questo gene, e se si prende l'etichetta di espressione nel carattere jolly, questi geni sono espressi a basso livello, ma quando c'è una marcatura di attivazione dell'elemento potenziatore in tra di voi è possibile vedere il livello di espressione dei thesegeni è significativamente aumentato in queste righe ok.Quindi, ci fermeremo qui questa classe, nella classe successiva, prenderemo questo ulteriore e ci faremo discutere se avremo un mutante come possiamo andare oltre e cercare di identificare il lociassociato genetico con esso. Grazie mille.