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Module 1: Ingegneria dei tessuti

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Salve a tutti, benvenuti a un'altra lezione per i principi di Delivery Principles and Engineering. Parliamo di Tissue Engineering che come abbiamo discusso per le ultime lezioni.
(Riferimento Slide Time: 00.37)

Quindi, solo un rapido recap di quello che abbiamo imparato nell'ultima classe. Così, ancora come ho detto stiamo parlando di ingegneria tissutale in questo particolare modulo e nell'ultima classe ci siamo fondamentalmente concentrati su un foglio che in realtà aveva fatto rivestimenti di proteine ECM.
Così, in questo caso particolare questo è stato il frammento di fibronectina e quello che abbiamo mostrato c'è, si può usare l'adsorbimento proteico per rivestire la tua proteina di interesse. E in questo caso particolare quello che ha dimostrato l'autore è se si ricopre una particolare proteina che può legarsi ad integrini alfa 5 beta 1, questo frammento di fibronectina inizierà essenzialmente a segnalare attraverso questa alfa 5 beta 1 e produrrà più ossa su queste superfici. E poi gli autori sono andati avanti e hanno usato un modello di ratto e ha dimostrato che in un modello di ratto questo porta a potenziare l'osseointegrazione

Quindi, tali rivestimenti possono essere poi utili per trattare i pazienti osteoporotici se si ottengono fratture.
Perché un problema più grande che si affrontano è che una volta impiantati con le viti ossee e ossee, in un periodo di pochi mesi, queste viti iniziano a scatenarsi e questo provoca un sacco di dolore e non possono metterci peso.
Quindi, devono tornare indietro per l'intervento e a quel punto hanno anche perso più osso perché questa vite deve essere perforata nel buco nell'osso così come l'osso si sta riassorbiendo intorno alla piastra e alla vite. Quindi, alcune di queste strategie possono essere utilizzate. Quindi, questo è solo uno dei modi in cui l'ingegneria tissutale per supportare la funzione può in realtà potenziare ulteriormente la funzione rispetto a quando è stata dopo la frattura.
(Riferimento Slide Time: 02.38)

Così, continueremo ulteriormente su questa discussione. Concentriamoci ora, intendo questo corso è la consegna della droga, ora concentriamoci di più sulla fornitura di droga nell'ingegneria tissutale. E quello che stiamo dicendo qui sta essenzialmente figurando perché la consegna della droga è importante nell'ingegneria tissutale. Quindi, avendo ottenuto qualche base in ingegneria tissutale; andiamo avanti con questo e diciamo che dipende prevalentemente dall'applicazione. E questo è qualcosa che troverete proprio durante tutto il corso dove la maggior parte delle cose dipenderà da quale applicazione lo utilizziate.
E poi quasi tutta l'applicazione dell'ingegneria tissutale richiederà una sorta di rilascio di sostanze chimiche o di biologeria, farmaci, a volte anche di cellule. Quindi, tutto questo diventa importante nell'ingegneria tissutale ed è per questo che è parte integrante di una consegna di droga

corso. E così nella classe di oggi e il prossimo paio di classi impareranno come la consegna della droga viene utilizzata e come possiamo essenzialmente modulare che per ottenere una migliore risposta tissutale.
Quindi, solo per fare qualche esempio prima di andare più in profondità. Proteine come VEGF e PDGF sono necessarie per la formazione delle navi del sangue. Quindi, diciamo che se metto un impianto nel corpo e questo impianto è abbastanza spesso, diciamo che questo è di 10 centimetri, poi i tessuti e le cellule all'interno non sopravviveranno perché l'ossigeno, il glucosio così come il trasporto dei rifiuti sono gravemente limitati visto che non ci sono vasi sanguigni. Quando metto questo impianto e diciamo che se ci sono delle cellule in esso, le cellule non hanno modo di sopravvivere a meno che non riescano ad ottenere l'ossigeno, possono ottenere il glucosio, possono eliminare i rifiuti dal circostante.
Allora, qual è il problema maggiore? È che non ci sono vasi sanguigni e quindi ciò che la gente ha fatto in letteratura è quella di incapsulare molecole come VEGF e PDGF, che sono fattori di crescita e segnali che causano la forma dei vasi sanguigni. E quindi quello che può accadere è farci dire se impiantato questo e c'era un vaso sanguigno che si avvicinava a questo, può indurre neovascolarizzazione, nuovi vasi sanguigni a formare e penetrare questo e fornire essenzialmente questi nutrienti alle cellule presenti in questi impianti; quindi questo è importante.
Un altro esempio è quello di usare gli antibiotici per prevenire le infezioni. Quindi, molto del tempo che si vede; che se si ha un impianto può ammalarsi. Dal momento che si tratta di un impianto esterno forse al momento della chirurgia le cose non erano puri.
(Riferimento Slide Time: 05.24)

Quindi, diciamo se ho un impianto che è suscettibile di iniziare ad avere colonizzazione di batteri. Quindi, cosa si può fare per prevenire che sia, si possono sempre incapsulare pochi antibiotici. Quindi questo è una sorta di metodo basato sulla prevenzione dove si hanno incapsulato gli antibiotici in un'anticipazione che magari dopo l'intervento potrebbero esserci pochi batteri in giro. E questo antibiotico non ha bisogno di rilasciare per una lunga durata forse si sta solo rilasciando per lasciarci dire 3 giorni, ma questo potrebbe essere sufficiente per uccidere i batteri circostanti e garantire che l'impianto non si infetti.
Perché ancora l'impianto si infetta e poi invece di aiutare la persona con qualsiasi comfort, peggiorerà la vita con molte infiammazioni, molta formazione di pus e la guarigione non accadrà. Infatti il tessuto si otterrà più danneggiato e l'unica soluzione allora la maggior parte dei tempi diventa è quella di rimuovere completamente l'impianto.
(Riferimento Slide Time: 06.34)

Molte volte, come abbiamo parlato nella donazione di organi, si può mettere in qualcosa che è straniero. E se ci si mette in qualcosa che è straniero, di nuovo il sistema immunitario lo riconoscerà.
Diciamo che se queste contengono cellule che derivano da maiali o da qualche altro umano per quella materia, poi il mio sistema immunitario, i miei anticorpi, le cellule T, le cellule B, lo riconosceranno come stranieri e sostanzialmente iniziano ad attaccare questo impianto. E ovviamente, se inizieranno a fare che le cellule impiantate moriranno e non solo, di nuovo causera ' molta infiammazione causando molte malattie al paziente. E così, quello che viene fatto qui è pretestuoso che rilasceranno molecole che sono anti infiammatori o immunosoppressori.

Quindi, molecole come la rapamicina sono tipicamente utilizzate per questo o altri farmaci praticamente e questi usciranno. Questi fanno in modo che questo attacco sia bloccato. E così che l'impianto possa sopravvivere più a lungo. E ancora potreste volere che questo rilascio di immunosoppressori sia in un periodo di durata abbastanza lunga, insomma finché queste cellule sono qui potreste volere che questa immunosoppressione continui a succedere. E quindi è per questo che la consegna della droga così come il rilascio controllato diventa importante in questo scenario.
(Riferimento Slide Time: 08.03)

E poi ovviamente, come abbiamo discusso in pochi casi forse a volte si vogliono le cellule che stanno arrivando al vostro impianto per avere la segnalazione in un certo modo. Quindi, che diciamo che questo impianto è quello di rigenerare il tessuto epatico; diciamo che state mettendo un impianto che contiene matrice essenzialmente.
E ciò che volete sono le cellule per entrare realmente e usare questa matrice per ordinare di costruire il tessuto perduto. Ma poi le cellule da sole potrebbero non essere sufficienti; le cellule possono richiedere determinati segnali e a quel punto si potrebbe voler rilasciare da qui alcuni fattori di crescita.
Diciamo che questi fattori di crescita provocano le cellule, queste sono cellule staminali che ci fanno dire, e diciamo che questi fattori di crescita provocano le cellule staminali per differenziarsi nelle cellule del fegato. Quindi, in quel caso quello che troveremo sono questi fattori di crescita; se li rilasci lentamente e chiedi alle cellule staminali circostanti di entrare nel fegato, questo avrà una terapia migliore per la tua ingegneria tissutale.
Quindi, ancora questi sono solo pochi casi che sto dando, ce ne sono diversi. Si può praticamente prelevare qualsiasi carta di ingegneria tissutale e scoprirete che ci sono rilascio di molecole che sta accadendo in tutto questo processo o adsorbendo proteine o fattori di assorbimento, rilasciando farmaci; tutto questo è una parte continua dell'ingegneria tissutale e discuteremo di alcune di queste strategie man mano che andiamo avanti.
(Riferimento Slide Time: 09.36)

E poi non si limita a queste molecole potrebbe essere qualsiasi altra molecola; potrebbe essere un antidolorifico, potrebbe essere altro solo dipende dall'applicazione e da ciò che si cerca di curare.

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Quindi, ecco solo un articolo di recensione che parla di usare strategie di consegna dei fattori di crescita polimeriche per l'ingegneria tissutale. Quindi, quello che state vedendo qui sono essenzialmente tre diversi casi. In un caso quello che hai fatto è molto simile quello che ho appena dato in precedenza.
Vuoi che le cellule migrino dentro e se vuoi che le cellule migrino in te stanno praticamente causando una sfumatura di questi puntini neri all'interno del tuo impalcato; che poi usciremo lentamente e queste cellule si attrarranno da questi puntini neri, diciamo. E così queste cellule entreranno e inizieranno a migrare in questo impianto a causa del gradimento di queste molecole che avete incapsulato.
Un altro esempio qui è forse che si vuole usare le cellule staminali e vogliono che si differenziino. Quindi, ancora ci potrebbero essere farmaci incapsulati in una matrice che farà entrare queste cellule per poi differenziarsi nel tipo di cellule che si desidera. Magari se è per il fegato o se il suo per polmone, solo di nuovo dipende da quello che è l'organo che si sta cercando di trattare e che provocherà le applicazioni di ingegneria tissutale. O questo potrebbe essere solo per aumentare il numero di cellule.
Quindi, magari si sta mettendo in cella con l'impianto stesso, ma si vuole aumentare la densità delle cellule in modo che sempre più di loro ci siano e la funzione venga ripristinata sempre di più; in modo da poter fare anche usando questi agenti proliferativi o questi piccoli farmaci che aiuteranno nella proliferazione della cellula.

(Riferimento Slide Time: 11.24)

Ecco una lista di alcuni dei fattori di crescita comunemente utilizzati, molto diffusi in realtà e fattori di crescita nell'ingegneria tissutale. E qui sono alcuni dei più grandi.
Uno è EGF, Epidermal Growth Factor, di nuovo molto diffuso. La sua maggiore funzione è quella di causare la proliferazione di cellule epiteliali, mesenchimali e fibroblastiche. Così, nel caso precedente è stato un esempio c che abbiamo visto che si desidera che queste cellule proliferino e possano essere dovute ad un qualche incidente si può perdere il 20% delle cellule.
Quindi, in quel caso si può voler consegnare EGF in una scocca in quella zona in modo che non solo le cellule facciano migrazioni, ma bisogna comunque rimediare per le 20% celle perse e così possono iniziare a differenziarsi e proliferare. Poi abbiamo parlato del PDGF; il Platelet derivato Growth Factor. E ce ne sono tre tipi e come vi ho detto prima che questo sia quello di maturare i vasi sanguigni.
E così, quello che si ottiene è la proliferazione così come la chemioattrazione di cellule muscolari lisce che sono essenzialmente le cellule che circondano i vasi sanguigni. E questo provoca che la maturazione accada. Provocano anche la sintesi e il degrado ECM. Quindi, se volete che l'ambiente delle celle migliorasse, volete che più ECM sia presente alcuni di questi fattori di crescita sono utilizzati.
Un altro è Trasformare Growth Factor alfa; così anche noto come TGF alfa e questo viene utilizzato per la migrazione e la proliferazione delle cellule, molto simile a EGF e anche sintesi di matrice extracellulare. Poi ci sono diversi di loro poi ci sono le beta TGF anche come chemioattrattivi, hai BMP; una delle proteine più importanti in un corpo e hanno diverse applicazioni in diversi tipi di cellule. Hanno chiamato l'osso morfoogenetico, ma essenzialmente hanno applicazioni e altre cellule, ma essenzialmente la migrazione differenziata delle cellule che formano le ossa. Poi hai VEGF, abbiamo parlato, di nuovo molto diffuso, VEGF è il fattore di crescita endoteliale vascolare. E che provocherà la migrazione, la proliferazione, la sopravvivenza delle cellule endoteliali che sono le cellule che allineano i vasi sanguigni.
Quindi, se volete che i nuovi vasi crescano; volete avere un po' di VEGF in quella zona e che attireranno queste cellule endoteliali, provocherà la migrazione, prolifereranno così come sopravviveranno e formeranno nuovi vasi sanguigni in quei siti. Ancora, quindi non bisogna ricordare le funzioni per la parte di questo corso. Ma è ancora bello sapere perché molto di questi leggete in documenti e molti di questi saranno forse che userete nella vostra ricerca. Quindi, questo è qualcosa solo per le tue informazioni.
(Riferimento Slide Time: 14.10)

Quindi, ancora usando un ponteggio si può principalmente consegnare tre cose e ancora non solo queste cose si possono consegnare anche alcune piccole molecole, ma maggioramente si guarda alla consegna proteica. Quindi, diciamo se sto consegnando qualche VEGF o qualche PDGF per causare la forma dei vasi sanguigni in questi scaffi. Quindi, allora posso usare la consegna proteica, posso rilasciare lasciarci dire VEGF; andrà a segnale su queste cellule endoteliali che stanno guarendo i vasi sanguigni e sostanzialmente causera ' la germogliazione di nuovi vasi sanguigni.

Quindi, queste cellule ora saranno attratte e vorranno muoversi in quest' area. Così, inizieranno a formare una germogliata, che ora sta entrando in questo e prolifera ulteriormente come va. E in questo modo si può avere una buona presenza di ossigeno e presenza di glucosio all'interno dello scaffo.
L'altra cosa che si può fare è invece di consegnare una proteina; è possibile consegnare il DNA che codifica per quella proteina.
E che il DNA rilasci lentamente qualunque cellula si trovi nelle vicinanze assume questo DNA e poi producono la proteina di interesse. Così, in questo modo si può avere un rilascio più sostenuto perché il DNA ci sarà per una durata molto più lunga. Perché una volta che la cellula viene traslocata forse rimane transita con quel DNA per un periodo di più di giorni a mesi e in questo modo si può rilasciare in un periodo di mesi. Oppure il terzo esempio qui è una consegna a celle dove essenzialmente si possono solo avere delle cellule incapsulate in esse. E queste cellule possono svolgere determinate funzioni forse lei se manca di insulina.
Così, si può produrre insulina attraverso queste cellule; attraverso le cellule beta pancreatiche o se diciamo che manca un certo enzima, queste cellule sono note per produrre quegli enzimi, si possono incapsulare quelle cellule. E in questo modo rimangono nel sito in cui si vogliono che queste proteine siano presenti; così come sono felici perché sono in una matrice circondata da loro.
A volte si vuole proteggerli dal sistema immunitario, anche per quella usa anche la matrice. E discuteremo di alcuni di questi casi attraverso questo corso mentre andiamo avanti.

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Quindi, ecco qualche altra sorta di zoom in immagini di matrice. Quindi, parliamo di affinità non covalente prima per le matrici biomateriali. Quindi, hai un biomateriale, questo potrebbe avere un'affinità naturale per il fattore di crescita. Il che significa che i fattori di crescita se stessi andranno e interagiscono con esso e se faccio il biomateriale completamente fuori da queste catene; allora quello che accadrà sono questi fattori di crescita da quando interagiscono; sono vincolanti per queste catene con qualche affinità. E poi rilasceranno lentamente nei media man mano che il tempo va avanti o come il materiale si degradi.
L'altro caso che si può prendere è che si può usare una molecola chiamata eparina. Quindi, questo deriva dalla letteratura dove scoprirete che l'eparina ha abbastanza affinità per i fattori di crescita e ha diversi siti di legame a questi diversi tipi di fattori di crescita. Quindi, quello che puoi fare è; puoi coniugare la tua heparina alle tue catene polimeriche e quello che farà è che creerà un'affinità per i fattori di crescita da solo. Quindi, non si deve assolutamente incrociare il fattore di crescita e in questo modo si può essenzialmente assicurare che questi fattori di crescita ci siano.
Quindi, punto importante da notare qui è che l'ECM naturale, quindi se si prende il fattore di crescita naturale, hanno tutti questi siti di legame per l'heparina e i vostri fattori di crescita. Quindi, anche quelli possono essere utilizzati, ma questo è se si desidera una certa classe di polimeri per la sua particolare proprietà; si possono comunque modificare questi polimeri per poter rilasciare questi fattori di crescita.

E ovviamente si può sempre coniugare direttamente anche lui; non c'è problema con quello. E poi l'altra cosa che puoi fare è che puoi usare alcuni di questi frammenti ECM stessi; che ho appena detto ha affinità naturale per questi fattori di crescita, puoi coniugare il frammento ECM e poi cominceranno automaticamente a legare i tuoi fattori di crescita.
Quindi, questo è un modo per ordinare le vostre cose consegnate oltre che legate; quello che assicura è che in nessuno di questi casi, si è in realtà covalentemente vincolanti un fattore di crescita alla vostra catena polimerica. E questo garantirebbe che i vostri fattori di crescita non stiano perdendo la loro attività perché se si collega covalentemente la molecola; allora quelle molecole tenderanno ad avere un'attività inferiore rispetto al non covalente legato.
E poi ci sono altre strategie è quella di utilizzare affinità non covalente per ECM endogeno.
Quindi, in questo caso questo non è affatto un problema. Quindi, hai un materiale naturale chiamato; diciamo qui per esempio, il collagene e quello che puoi fare è puoi legare il tuo fattore di crescita con un dominio di legame collagene. Quindi, questo dominio dal momento che il suo legame di collagene va a legarti le catene di collagene; collegando essenzialmente il tuo fattore di crescita alle tue catene.
L'altro esempio è l'heparan solfato; quindi la stessa cosa che puoi fare è che puoi di nuovo avere affinità di legame coniugata al tuo fattore di crescita con l'heparina e poi il dominio coparin binding andrà e si unirà alle tue matrici di eparina. E ancora molto simile a questo puoi rendere il tuo ECM o incorporare altri componenti ECM nelle tue cose e puoi nuovamente mettere il tuo dominio di collegamento ECM.
Quindi, queste affinità non covalenti sono in realtà molto importanti perché vediamo cosa succede; diciamo se arriva una cellula e la cellula vuole prendere questo fattore di crescita. Quindi, diciamo che c'è una grande cellula che ha un sito vincolante per questo fattore di crescita. Se questi fattori di crescita sono covalentemente legati al vostro materiale allora le cellule non possono davvero prenderle in mano perché le cellule cercheranno di portarle in alto perché, ma il materiale è enorme rispetto alla dimensione cellulare.
Quindi, le cellule non sono in grado di prendere questo. In questo caso ciò che si sta facendo è se l'affinità cellulare è superiore a questa affinità naturale o una qualsiasi di queste affinità. Poi le cellule possono arrivare possono riprendere i fattori di crescita al ritmo che vogliono scavare così e questo garantirà che le cellule abbiano molto più controllo che tipicamente porta sempre a guarire meglio.

Ecco, ecco alcuni dei vantaggi qui per usare affinità non covalente. Ovviamente puoi sempre fare l'affinità covalente e la banca sul polimero per degradare o forse è solo un recettore di superficie cellulare la cellula non ha bisogno di internalizzarlo. In quei casi quei sistemi funzioneranno anche, ma tipicamente quello che si è visto con la ricerca è che questi sistemi funzionano molto meglio rispetto a quelli covalenti.
(Riferimento Slide Time: 21.19)

E ancora come stavamo discutendo; così si può avere un legame covalente; così si può effettivamente prendere una moietà chimica e incrociare il proprio fattore di crescita o si può avere collegato tale che c'è un sito di cleavage proteasi. Quindi, quello che fa è anche se il suo legame covalente c'è un sito di cleavage; le cellule possono ripulirle tutte le cellule hanno proteasi sia secrete che sulle membrane. Quindi, se si fa che poi questi saranno essenzialmente ripulisciti e le cellule possono venire e legarsi a questo fattore di crescita; ogni qualvolta ne hanno bisogno e lo prendono.
Ecco quindi un tipico esempio di come questo aspetto; così un ambiente fisiologico extracellulare dei fattori di crescita. Così, si possono avere fattori di crescita collegati o alle vostre catene o appena incapsulati, le cellule entreranno; interagiranno con la vostra ECM così come questi fattori di crescita e sostanzialmente in grado di aiutarli a svolgere o potenziare la loro funzione in modo abbastanza buono.

(Riferimento Slide Time: 22.23)

Ecco un altro esempio di questo; questo è un gruppo di Jeffrey Hubbell, gruppo dove hanno sviluppato dei derivati della fibrina per il rilascio del controllo dei fattori di crescita vincolanti. E così quello che hanno fatto questi autori è che hanno fatto dei gel o si possono anche chiamarli gel idro dato che i derivati della fibrina sono piuttosto idrofili.
Così, hanno fatto questi idrogel e in quello che hanno fatto; hanno attaccato alcuni peptidi. Quindi, questo è un peptide a dominio bi dove un dominio si lega alla tua fibrina e un altro dominio si lega per farci dire eparina. Quindi, se si tratta di un dominio bi un dominio si lega a questo, un dominio si lega all'eparina e quindi questa è la tua eparina.
Quindi, tutto quello che devi fare è che devi fare l'idrogel; devi collegare il tuo peptide di dominio bi. Allora tutto quello che devi fare è solo incubare questo con l'eparina e una volta incubato questo quello che accadrà è prima di tutto questo peptide di dominio bi andrà a legare le tue catene di gel idro; che sono fatte di fibrina.
E una volta che hai messo l'eparina lì puoi lavarlo in mezzo se vuoi, se hai messo questo in eccesso. Questa eparina andrà a legarsi a questo peptide di dominio bi. E poi tutto quello che devi fare è solo mettere i tuoi fattori di crescita e come ho descritto nella slide precedente che l'eparina è abbastanza promiscuo in lotti vincolanti e lotti di diversi tipi di fattori di crescita e quelli andranno automaticamente a legarsi. Quindi, essenzialmente questo G qui rappresenta il fattore di crescita che si lega all'eparina e ce ne sono diversi, quindi,

in questo modo si può ottenere; così di nuovo questo G è ora disponibile bene intendo se arriva una cellula e vuole interagire con questo fattore di crescita.
(Riferimento Slide Time: 24:47)

Tutto quello che deve fare è avere solo più affinità e rispetto all'eparina che tipicamente più i recettori di superficie sulle cellule fanno. E così sarà in grado di accogliere questo fattore di crescita. Ecco, ecco qualche esempio; quindi quello che state vedendo qui e questo è un gel che si sta formando e sull'asse x, avete tempo che è in giorni. E sull'asse y si ha quanto del fattore di crescita in questo caso un fattore di crescita che viene utilizzato è che NGF viene rilasciato e sostanzialmente in frazione. Quindi, frazione di uno praticamente significa che tutto il fattore di crescita è stato rilasciato.
Quindi, se hai la fibrina non modificata che non è coniugata al tuo peptide di dominio bi e l'heparin quello che vedi è praticamente dentro meno di un giorno, quasi tutto viene rilasciato. Mentre, se mettete in una eparina contenente matrice, dato che utilizziamo il dominio bi e lo leggiamo all'eparina e poi mettiamo il fattore di crescita in là, si vede un rilascio più continuo e alcuni di esso non sono stati rilasciati nemmeno alla fine di 2 settimane, ma le cellule possono naturalmente entrare e prendere qualunque cosa sia rimanente Così, tali sistemi vi daranno un effetto molto più sostenuto, sempre più celle continueranno a muoversi nel vostro idrogel. Perché percepisce continuamente questo fattore di crescita che ne viene rilasciato; mentre, in questo caso le cellule si muoveranno per 1 al giorno. Ma una volta che le cellule sovrastano le cellule non hanno davvero alcun incentivo a muoversi o addirittura rimanere lì; quindi questo è un esempio.
(Riferimento Slide Time: 26:25)

E poi più gli autori sono andati avanti e hanno mostrato, quindi questi gel poi hanno iniziato a usare intendo NGF è un Neural Growth Factor. Quindi, queste cellule e loro usate per un esperimento di estensione neuronale; dove se hanno solo fibrina, come mostrato qui, ottengono una certa estensione che hanno normalizzato a 1. Ma poi mentre si mettono questi fattori di crescita e si usa il sistema, si vede un effetto molto più pronunciato che si può iniziare a vedere; quindi la barra solida non è sostanzialmente eparina.
Quindi, si vede che se non si ha l'eparina e si sta rilasciando fattori di crescita; non si ottiene molta risposta come era abbastanza chiaro che questi fattori di crescita vengono rilasciati entro un giorno anche. Ma se mettete la vostra eparina vi vedete molto più estensione di queste cellule neuroniche solo perché vi è un rilascio sostenuto di fattore di crescita nel tempo.
Quindi, essenzialmente questo è quanto descritto qui la concentrazione che usavano qui era di 20 nanogrammo. Ma ancora questa è più una cosa concettuale, se si dispone di un rilascio continuo utilizzando qualche eparina o conservazione continua di questo fattore di crescita, le cellule lo limonano molto mor. Penso che ci fermeremo qui e continueremo ulteriormente nella prossima classe; ci vediamo allora.
Grazie.