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Module 1: Sistemi di rilascio e Hydrogel

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Ciao a tutti. Benvenuti in un'altra lezione di Drug Delivery Engineering and Principles. Attualmente stiamo parlando di Hydrogel e continueremo che in questa classe come le ultime due classi.
(Riferimento Slide Time: 00.42)

Facciamo un rapido riassunto su quello che abbiamo imparato nell'ultima classe. Allora, abbiamo parlato di idrogel, abbiamo parlato delle idrogel fisiche, che essenzialmente abbiamo parlato di ionico in questo caso, poi abbiamo parlato di idrogel chimici, abbiamo parlato di come questi si formano. Quindi, essenzialmente qual è la maggiore differenza tra chimico e fisico. I fisici sono essenzialmente catene molecolari di catena mentre, la sostanza chimica può avere un legame effettivo che è presente tra queste catene di polimeri.
E poi abbiamo parlato di processo di sintesi. Quindi, tipicamente il processo di sintesi per gli idrogel fisici comporta il riscaldamento o il cambiamento di pH o qualsiasi altro trigger che provoca queste catene ad iniziare a interagire tra loro e formare questi gel. Mentre, gli idrogel chimici, tutto quello che devi fare è solo aggiungere il cross linker o in qualche modo attivare

i gruppi; potrebbe essere attraverso la luce oppure potrebbe essere forse l'aggiunta di glutaraldeide o qualche altro tipo di cross - linker che causa questo innesco.
Poi abbiamo parlato di alcuni calcoli di dimensione dei pori. Quindi, molto brevemente abbiamo discusso di questo. Ne discuteremo di più nelle lezioni future e poi abbiamo parlato di cinetica di diffusione della droga. Così, come possiamo modellare, come il farmaco si diffonde. Così, abbiamo scoperto che possiamo solo usare la legge di Fick e tutto quello che dobbiamo davvero cambiare è il coefficiente di diffusione D, che poi sarà influenzato dal fatto che il gel sia micro poroso o macro poroso.
Quindi, questa micro porosa D non ha davvero molto ruolo da giocare qui. Anche se ci sono alcuni fattori che si aggiungono; mentre, se è micro poroso poi insieme a questi fattori aggiungiamo un altro coefficiente di partizione Kr perché questa catena queste molecole di droga cominceranno ad interagire anche con questo.
(Riferimento Slide Time: 02.24)

Allora, parliamo di in situ cross linking idrogel. Questo potrebbe essere uno qualsiasi di quei due precedenti idrogel se ne parlassimo, sia fisico che chimico, ma ciò che essenzialmente in situ significa è questo che questi gel possono incrociare sul sito. Quindi, questi sono molto desiderabili quando si parla di qualsiasi tipo di consegna perché quello che si può fare è avere componenti singoli. È possibile mixare insieme quei due componenti e una volta miscelati quei due componenti insieme il trigger viene sostanzialmente dato per la polimerizzazione all'avvio e queste cose si polimerizzano entro un certo lasso di tempo. Questo potrebbe superare un periodo di secondi o un periodo di minuti.
Allora, perché è auspicabile? Diciamo che se sono un clinico sono un medico e sto cercando di iniettare qualcosa attraverso sostanzialmente una siringa e voglio avere un sistema idrogel per avere questo rilascio di droga nel tempo. Quindi, tutto quello che posso fare è mischiare i due componenti insieme nella siringa e iniettare direttamente nel paziente e ciò che accadrà è in quel tempo o in quel trigger questa cosa si polimerizza e ovunque sia stata iniettata rimarrà lì e ordina di formare un deposito. Quindi, questi chiamano in situ perché formano idrogel all'interno del corpo.
E il trigger di polimerizzazione potrebbe essere di diversi tipi. Quindi, un trigger è il tempo. Quindi, tutto quello che devi fare è semplicemente mischiare due componenti insieme e può essere come ho detto pochi secondi 10 seconds, 20 seconds o potrebbe essere minuti, 2 minutes, 3 minutes e all'interno che la polimerizzazione avrà inizio. Può essere la temperatura giusta, insomma forse non devo neanche fare niente in questa siringa. Quindi, in siringa è completamente stabile non devo neanche affrettarmi, ma voglio dire che la temperatura ci faccia dire 25 ° grado Celsius, ma quando ho iniettato nel corpo la nostra temperatura corporea è di 37 gradi Celsius. Quindi, perché ora c'è questo cambiamento di temperatura qualcosa è stato attivato che provoca la polimerizzazione, la gelling per accadere e che bastano 25 a 37 ° livello Celsius che ha fatto i polimerizzati lasciandoci dire entro pochi secondi. Oppure potrebbe essere pH. Diciamo e questo potrebbe essere di nuovo diversi tipi. Diciamo nei miei due tubi che sto mescolando insieme, il pH combinato del polimero qui ci lascia dire il pH di 5 a cui non si polimerizza.
L'altro tubo sostanzialmente contiene solo idrossido di sodio, diciamo con un pH di 8, ma quando li mescoliamo insieme che porta a un pH di 7 e al pH di 7 questa cosa inizia a polimerizzare. Quindi, questo potrebbe accadere che non mi preoccupi nemmeno di mixare con NaOH. Lo inietto solo nel corpo e un pH corporeo è di circa 7 secondi e quindi quando questo si diffonde può causare la polimerizzazione. Quindi, qualsiasi di queste cose può essere esplorata in se si parla di gelateria in situ.
Ci sono alcuni svantaggi. Ovviamente c'è un sacco di vantaggi, ma ci sono degli svantaggi. Uno è questo diffuso in tutto il corpo a destra. Insomma se ci lascio dire iniettarlo in un'area che è altamente fluidica diciamo se è nello stomaco o nella mia cavità peritoneale o qualsiasi luogo che abbia lotti di diffusione e convezione che vanno in giro poi prima di poterla polimerizzare può semplicemente diffusarsi in tutto il corpo. Non ho davvero un controllo di forma.
Quindi, questo è un grosso problema perché come si sa la maggior parte di queste cinetiche di diffusione dipenderà da quella che è l'area attraverso la quale sta uscendo dal sistema. Quindi, se l'area è compatta e il farmaco sta uscendo solo da questa zona molto superficiale, si avrà una velocità di rilascio diversa dove mentre, in caso di cross in situ che si incrocia quello che accadrà una volta iniettato nel corpo, può assumere qualsiasi forma strana che fluisce prima che si polimerizza e ora si ha una superficie molto più ampia e una superficie molto irregolare attraverso la quale il farmaco può iniziare a diffonderlo. In questo caso è molto difficile per me modellare quanto la droga usciranno in un determinato lasso di tempo.
Ecco, queste sono alcune delle sfide. Un altro vantaggio qui è ovviamente, se sto cercando di riempire un difetto; diciamo; diciamo un infortunio e qualche parte del mio muscolo è andato e voglio riempirlo di un gel contenente alcune cellule, tutto quello che devo fare è metterci un po' di liquido sopra. Il liquido prenderà automaticamente la forma, diciamo se questo è stato il mio muscolo e c'è stato qualche incidente attraverso il quale questa è la forma che deve essere riempita. Ora, non ho nemmeno bisogno di preoccuparmi di progettare la forma. Quello che posso fare è riempirlo con il polimero e una volta che lo gelo essenzialmente riprende la struttura che voglio.
Quindi, ci sono alcuni vantaggi, ma ovviamente bisogna guardare a che tipo di applicazioni stiamo guardando prima di poter andare avanti con questo. Quindi, ancora una volta questo è molto diffuso nella ricerca e c'è un sacco di speranza che questo possa tradursi in clinica. Parleremo di un importante documento di ricerca su questo per capire questo.
La carta sta andando a guardare anche cose diverse. Quindi, lasciateci entrare.

(Riferimento Slide Time: 07.34)

Quindi, in questo caso si tratta di un articolo che sta usando un collegamento incrociato in situ, ma poi questo è qui quello che sto cercando di fare è praticamente darvi qualche idea su come questi idrogel vengono utilizzati nel sistema.
Così, in questo particolare paper quello che stanno facendo è che stanno usando un collegamento incrociato a base di maleimide di un idrogel PEG per migliorare la cinetica di reazione nella cross che si collega per accadere sia per l'incapsulamento cellulare che per la consegna in situ. Quindi, in questo caso il farmaco è in realtà cellule e vogliono fare un sistema che possono solo iniettarsi nel corpo e non devono preoccuparsi di interventi chirurgici e tutti.

(Riferimento Slide Time: 08.13)

Così, in questo caso l'obiettivo dello studio è quello di utilizzare un maleimide come una croce alternativa che collega la moietà al polietilenglicole e quando dico alternativa esistono diversi tipi di metodi di collegamento incrociati e vedere che è molto diffuso.
Quindi, prima che questa carta arrivasse le persone tipicamente usavano un acrilato o lasciateci dire qualche EDC NHS o qualche altro utilizzo qualche altra forma di accoppiamento, ma ora questo articolo si propone di usare un collegamento incrociato di base maleimida. Quindi, quello che hanno fatto è che hanno confrontato i moietti di collegamento incrociati che sono di nuovo come acrilati, diacrilati e solfone in vinile che è un altro gruppo funzionale.

(Riferimento Slide Time: 08.57)

Così, maleimide come abbiamo discusso in passato è una struttura come questa in presenza di tioli che questo reagisce con il gruppo sulfidolo. Così, i tioli tutti avranno un solfidro. Quindi, qualcosa come la cisteina o qualsiasi altro gruppo di tioli potrebbe essere presente a causa di qualche altra molecola e questo reagirà direttamente con questo. Quindi, questo è di nuovo molto utilizzato nelle reazioni bioconiugate peptidiche, ma poi qui lo propongono ora di usarlo con idrogel.
La cinetica di reazione è molto veloce come vedrete nel resto dei dati in questa carta. Questo ha una specificità molto elevata per i tioli. Così, a pH fisiologico questo è di nuovo per la maggior parte delle applicazioni biologiche che cerchiamo di pH fisiologico. Quindi, questo gruppo maleimide ha un'altissima affinità e specificità per i tioli. Quindi, non avrebbe troppe reazioni in giro.

(Riferimento Slide Time: 09.50)

Quindi, vediamo cosa hanno fatto in questa carta. Quindi, hanno usato idrogel. Questi sono di nuovo come ho detto che queste sono reti di polimeri collegati incrociati. Sono una sorta di analogico sintetico alle matrici extracellulari in cui le cellule risiedono tipicamente. Ecco, questa è una struttura molto simile come ho raccontato nelle ultime due classi e c'è facilità di modifica e si possono modificarle. Si tradurranno in alcune proprietà bioattive che sono indipendenti da ciò che si sta incapsulando in esse.
E in questo caso hanno usato l'idrogel PEG. Ancora come ho detto PEG è molto diffuso.
Quindi, e da qualche parte sappiamo già che è molto basso l'adsorbimento proteico. Viene effettivamente utilizzato in diverse aree per evitare che l'adsorbimento proteico accada. Provoca minimamente qualsiasi infiammazione. Anche se abbiamo parlato di alcuni anticorpi PEG deboli, ma in generale se non ci sono anticorpi PEG provoca un'infiammazione molto bassa.
Sicurezza d'uso in - vivo; ancora una volta è stato usato molto ampiamente per gli ultimi decenni e lì moltissimi prodotti commercialmente disponibili che hanno usato diverse funzionalità per incorporarli. Quindi, tutti questi sono un plus a questo.

(Riferimento Slide Time: 11.08)

Ecco, ecco alcuni dei metodi che hanno usato. Come ho detto che questi malefici reagiranno davvero con i tioli a formare questo legame tioetere e quello che hanno fatto è che hanno acquistato il PEG commercialmente disponibile che ha i quattro gruppi di acrilato, è un PEG a 4 arm. Ecco quindi il collegamento incrociato tra i quattro bracci del PEG. Quindi, questo è braccio 1, braccio 2, braccio 3, braccio 4 e ognuno di queste braccia contiene un gruppo maleimide alla fine. Quindi, e poi invece di maleimide hanno anche fatto modifiche analoghe e ho ottenuto un solfone acrilato e vinile che sono due dei gruppi che sono stati usati piuttosto un po' nel momento in cui è stato pubblicato questo articolo.
E poi ancora questa reazione avviene a un pH di 7,4. TEA è una sorta di catalizzatore a questo e così per acrilato la polimerizzazione avviene sulla base di un collegamento incrociato UV e il solfone in vinile reagisce anche con i tioli per formare legami.

(Riferimento Slide Time: 12.09)

E così, è quello che hanno fatto hanno fatto delle reazioni. La reazione che hanno fatto è che hanno un macromer PEG, mettono un legante adesivo. Perché questo è richiesto? Cosa si intende per adesivo ligand? Questo è un legante che reagisce o che in realtà interagisce con le cellule e provoca la cellula ad aderirlo. Come abbiamo detto che PEG non consente alcuna aderenza. Così, hanno messo su qui alcuni leganti adesivi che si tradurranno in PEG per essere cellulari compatibili. Le cellule possono ora legarsi.
E così, una volta che lo fanno, ottengono una struttura come questa, dove diciamo che a qualunque rapporto ci fanno dire che stanno mettendo questo in un rapporto di 1 è a 1, poi ognuno di questi macromer PEG si tradurrà in una media avrà uno di questo adesivo ligand e poi hanno un altro linker cross peptide. Quindi, questo è tipo un linker incrociato che contiene i tioli. Quindi, questo contiene anche il tiolo, ma è solo un solo tiolo. Così, può reagire una volta, ma non formerebbe un gel, ma in questo caso ora si parla di un peptide che contiene il tiolo a entrambe le estremità.
Quindi, ora può essenzialmente incrociare in un'intera rete come questa. E hanno usato condizioni diverse che hanno usato il peptide adesivo a 4 milli molari o 400 millimolari, hanno usato per tempi diversi fino a un'ora e poi il collegamento incrociato è fatto da un peptide che è anche cleavabile che è una proteasi cleavabile, quindi, questo significa che le cellule possono secernere proteasi. Quindi, diciamo che la cellula vuole muoversi e si affida in questa maglia gigante, quindi, se una cellula è qui e vuole allontanarsi da qui può solo secernare qualche protesi, degradare questo e questo si aprirà e poi la cellula può muoversi.
E, quindi, tutto questo ha comportato questa struttura di idrogel come potete vedere qui è che l'hanno formata in forma di disco. Così, ha appena preso la forma del disco che si sono formati e ha provocato idrogel.
(Riferimento Slide Time: 14.10)

Parliamo di alcune della chimica di collegamento incrociata che hanno usato. Così, come ho detto l'acrilato è la polimerizzazione radicale. Quindi, se si dispone di alcuni metodi basati su UV, si utilizza qualche iniziatore di foto, che si tradurrà in polimerizzazione. Ricordate che il inconveniente qui è naturalmente, l'UV stesso è tossico per le cellule e l'iniziatore fotografico è anche tossico per la cellula. Così, in realtà si può avere una ridotta viabilità cellulare lì. Ecco, questo è un problema che è stato identificato con acrilato così, piuttosto un po' di tempo.
E non è davvero molto propizio a fare una consegna in situ e parleremo di questo non succede davvero molto in fretta. La reazione è molto lenta e nella reazione è lenta e se lo si inietta, diciamo che è se ci vogliono 30 minutes minuti e poi 30 minutes tutti i tuoi componenti di idrogel verranno appena diffusi nel tuo corpo e non costituirebbero davvero un deposito sul sito a cui lo stai iniettando.

E poi l'altra reazione è l'aggiunta di tipo Michael e così, questa è in sostanza una reazione di Michael dove si verifica un'aggiunta nucleofila su un altro nucleofilo. Ecco, questo è quello che hanno usato per reagire il maleimide ai tioli.
(Riferimento Slide Time: 15.27)

Così, ancora, come dicevamo di avere un legante adesivo cellulare così, uno dei leganti è stato incorporato è questa molecola RGD. Si tratta di una molecola molto diffusa in fibronectina o vitronectina e altre molecole ECM attraverso le quali queste cellule hanno dei leganti e quando trovano RGD in una catena di polimeri possono semplicemente legarsi a essa e tipo di tether da lì. Quindi, questo è quello che hanno usato.
Hanno anche modificato anche questo per contenere anche un tiolo in modo che ci sia un gruppo sulfydrile presente attraverso il quale può reagire e poi il gruppo RGD è ancora disponibile per le celle a cui legarsi. Ecco, questo è quello che hanno fatto. Quindi, hanno usato 20 kDa 4 - braccio PEG con tiolo contenente peptide adesivo. E poi in un passo due, quello che hanno fatto è il peptide degradabile è questo. In questo caso questo è tutto il peptide e questo sito VPM è dove le cellule la ripuliranno.
Così, quando la proteasi è nella soluzione che ripuliranno questo peptide VPM, una volta la si vede e poi di nuovo lo hanno modificato con due cisteine ognuna contenente un tiolo e così, di nuovo ciò che fa è che ti permette di avere un controllo sul sistema dove ora si può avere la polimerizzazione che avviene da questo oltre che la sua degradabile. Quindi, spero che questo sia chiaro.

Quindi, ora, si parla di lasciarsi dire che questa è la nostra catena da 4 braccio che contiene RGD in grado di legarsi a una cella e le altre braccia sono poi incrociate tramite questo VPM. Quindi, se uso un altro colore. Quindi, ora, hai una catena contenente VPM dal resto di loro che poi sarà bonificata ad un altro PEG a 4 arm. Così, ecco come si forma l'intera struttura. Quindi, questo è ingrandito a uno di questi ed è così. Quindi, ora, le cellule possono davvero degradare questa serie di VPM per muoversi così come legarsi a questa struttura RGD.
(Riferimento Slide Time: 18.01)

Quindi, ecco che ci si va, è solo la stessa cosa che disegnavo. Quindi, lo reagite per la prima volta ad un rapporto 1 è di 1. Quindi, si ottiene essenzialmente una giusta funzionalizzazione con RGD e poi si mescolano questo con il rapporto che diciamo che il 1 è a 3. Quindi, ora, hai tre siti su cui tutto il VPM viene bonificato così che inizia a incrociarsi in tutta la rete.

(Riferimento Slide Time: 18.29)

Quindi, ora vediamo quali sono i dati che ottengono da questo. Quindi, prima di tutto, il PEG - 4MAL mostra maggiore incorporazione RGD e VPM. Quindi, questa reazione è più efficiente che è quello che stanno cercando di proporre. Quindi, guardiamo a questo. Quindi, nei casi di PEG - 4MAL quello che vedono è anche se hanno una bassa quantità di TEA che qui è un catalizzatore, anche nel 10 minutes si ottengono quasi tutte le reazioni. Quindi, sull'asse y si ha il tiolo inreagito. Quindi, misurano quanto è presente il tiolo inreagito. Quindi, se fossero stoichiometricamente mescolate, quindi ipotizzando che tutto il tiolo dovesse essere finito, ecco cosa vedono che quasi ottengono il 100 di conversione del tiolo e la stessa cosa accade a 60 minutes. Mentre, se si guarda allo sguardo al PEG vinile sulfhone o PEG acrilato almeno per le concentrazioni di TEA per il 10 e il 60 minutes si vede solo pochissima incorporazione. Quindi, intendo dire che si parla di soli 40% o in questo caso molto poco.
Se ora si aumenta la concentrazione TEA che è di nuovo un catalizzatore qui, si arriva a 100 volte. Quindi, intendo dire che questo è essenzialmente stiamo parlando di 100 volte in aumento della concentrazione catalana anche allora si sta vedendo non un'ottima incorporazione solo dopo un bel po' di tempo si inizia a vedere quasi il 100 di reazione e la stessa cosa vale con un PEG-4-acrylate. Così, chiaramente dimostra che questa chimica di reazione è con molto più efficienza per continuare con questo particolare sistema.

(Riferimento Slide Time: 20.07)

Poi, quali sono le diverse concentrazioni di polimeri che possiamo utilizzare per formare questo idrogel. Quindi, qual è il peso più basso possibile? Quindi, e se si continua a ridurre le catene di polimeri non si può ottenere un idrogel ad un certo punto di tempo. Così, hanno scoperto che con il PEG - 4MAL si può formarsi anche un gel da 3% mentre, con acrilato si può ottenere un gel solo ad un minimo di 7,5% di questo polimero e con PEG - vinil-solfato si ottiene a 4% e poi il PEG - DA si sta formando almeno a 7,5%.
E i tempi di gelazione sono anche molto diversi. Quindi, i moduli PEG - 4MAL entro 1 a 5 minutes mentre, l'altro impiega fino a 30 minutes e durate più lunghe. Così come ho detto, non sono molto favorevoli alla gelateria in situ perché se ci vogliono 60 minutes minuti per formare un gel, allora per il momento in cui viene iniettato nel 60 minutes tutto il polimero PEG sarà tutto disperso in tutto il corpo. Quindi, e non solo che se si stanno incapsulando le cellule e se ci si lascia dire di farlo in un piatto di coltura cellulare quello che accadrà ha preso la gravità le cellule sono ormai sistemate.
E, quindi, se lasciatevi dire se questa è la vostra struttura in gel 3D. Diciamo che questa è la tua struttura in gel 3D. Tutte le tue cellule saranno un po' popolate alla base e il resto del gel avrà una popolazione molto sparsa a causa della gravità che queste cellule si sistemano. Quindi, ecco perché non avrete una buona distribuzione delle cellule neanche se il tempo di gelazione non è veloce.

(Riferimento Slide Time: 21.51)

Poi sono andati avanti e hanno guardato il rapporto di gonfiore dell'idrogel. Quindi, quello che hanno scoperto è che il PEG - 4MAL ha avuto un gonfiore molto alto in percentuale inferiore. Quindi, questa è stata la percentuale del 3 che è il minimo che possono ottenere e mentre si aumenta la concentrazione di polimeri il gonfiore diminuisce. Mentre, in altri casi, non si ha davvero molto gonfiore perché si richiede percentuali piuttosto elevate.
(Riferimento Slide Time: 22.24)

E così, poi sono andati avanti e hanno incapsulato alcune celle per 3 giorni e qui ci sono i dati per questo. Allora, cosa stiamo guardando ora è in questa direzione di fila, si sta vedendo ogni

condizione. E così, se potete vedere, quindi, il bottomest è un PEG - 4MAL e su questa colonna si sta vedendo essenzialmente quale gel percentuale è stato utilizzato. Quindi, questo va dal 10 al 4% e quello che vedete qui è che il PEG - DA non forma davvero gel al 5 e la percentuale del 4 come è stato mostrato prima come lo stesso caso con il PEG - 4A.
E il solfone in vinile PEG fa i gel, ma se guardate tutte queste cellule sembrano tutti abbastanza arrotondati. L'unico momento in cui si sta vedendo un po' di allungamento è su questo, ma tutto il resto di loro sembrano abbastanza arrotondati; questo significa, quando le cellule sono fuori, significano che non possono davvero impastare qualcosa. Così, quando le cellule sono tethering iniziano a stretching, iniziano a allungare e a diffondersi sulla superficie o su un gel, ma in questo caso non si vede.
Mentre, se si guarda a PEG - 4MAL a concentrazioni più elevate, sì, le cellule sono una sorta di arrotondato, ma mentre si sta diminuendo la concentrazione del polimero a 4 e 5% si vedono molto ben allungate. Questo è come sarà una tipica matrice ECM. Questo è un gel di collagene che è la matrice ECM naturale che troviamo nel nostro corpo e così, ecco come le cellule tipicamente guardano. E poi le uniche due condizioni che sono in grado di imitare che sono queste due. Quindi, il resto di loro non è nemmeno in grado di fare alcun tipo di imitatore come il collagene.
Quindi, le macchie qui utilizzate sono essenzialmente Calcein AM, ovvero un colorante che è permeabile attraverso la membrana cellulare e va dentro. E una volta che è lì è ridotto all'interno del sistema a un byprodotto che poi ha una fluorescenza. Così, solo le cellule vive la fluorite.
E poi si ha una colorazione non percorribile che è un propidio ioduro, ovvero un colorante che non è in grado di diffondere nelle cellule è vivo, ma la membrana è compromessa. Si diffonde e si lega al DNA e poi dà il rosso fluorescente. Così, si può vedere quale sono vivi e morti. Quindi, tutti questi sono la maggior parte di loro che mostrano il verde quindi, il che significa che sono cellule vive.

(Riferimento Slide Time: 24:42)

Poi, sono andati avanti e hanno fatto qualche attività metabolica. Così, hanno scoperto che l'attività metabolica è alta in maleimidi. Quindi, qui si hanno maledetti in rosso e tutti voi vedete che rispetto a un controllo 2D, quindi, in questi sono tutti paragonati a un controllo 2D in cui non c'è gel, scopri che sono abbastanza bene metabolicamente attivi mentre, l'attività metabolica diminuisce in altre condizioni e questo è di nuovo solo un controllo del collagene. Collagene di corso, è un'attività metabolica superiore per queste cellule.
Si tratta di C2C12 che sono essenzialmente alcune cellule mioblastiche muscolari e si vede che anche se l'attività non è buona come il collagene, ma rispetto agli altri chimici sintetici di polimeri, hanno un'attività metabolica molto migliore.

(Riferimento Slide Time: 25:31)

E poi vediamo cosa succede quando si applica questo in vivo. Quindi, quello che hanno fatto questi autori è poi metterlo su un cuore di topo; così, su un animale vivo. Quindi, questo è quello che succede. Quindi, quando basta dispensare il poco di liquido su questi cuori di topo il cuore pulsante. Quello che vedete è poi che il liquido è stato poi diffuso per un po ', ma poi ha iniziato a polimerizzare. Quindi, si ottiene un gel polimerizzato che prende la forma della superficie esterna della parete cardiaca.
E non solo che quello che gli autori hanno fatto hanno incapsulato qui un po' di FITC, che il verde fluorescente. Quindi, questo è tutto gel, questo è tutto tessuto, il tessuto cardiaco in questo caso e quello che vedete è che c'è una sorta di interfaccia. Quindi, il gel è in realtà in grado di diffamarsi e polimerizzare e poi le cellule sono state in grado di muoversi anche qui. Allora, quello che si vede è una regione sovrapponente. Quindi, si ha questa regione sovrapposta in cui queste cellule interagiscono con il tessuto e questa è una superficie molto compatibile.
Quindi, questo è praticamente tutto sulle idrogel in situ per questa classe. Proseguiremo ulteriormente con una discussione idrogel e qualche calcolo in più di calcolo della dimensione dei pori di rete e di tutti nella classe futura.
Grazie.