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. Dunque, la variazione genetica è necessaria per il miglioramento delle colture in agricoltura. Quindi, quali sono tutti i diversi modi in cui i rendimenti delle colture sono migliorati o che i tratti migliorano, ibridization.Now cos' è l'ibridizzazione?Il processo di combinare diverse varietà della stessa pianta; parlerò di ibridizzazione aboutplant della stessa pianta tale che poi si selezionerà per o le lenzuola ibride che avranno la combinazione dei buoni tratti di entrambe le varieties.Quindi, pur includendola di nuovo un processo casuale così, questo includerà una selectionof le linee cellulari che avranno tutti i tratti positivi che si sono riunite. Poi il DNA mutagenesia può essere modificato in modo naturale o artificialmente da un certo numero di agenti fisico e chimici con conseguente mutazione e poi di nuovo si fa uno screening e una selezione. Poi poliploidia, si applicano determinati agenti che possono comportare cambiamenti nelle inpiante di ploidia conosciute così, che possono portare a un miglioramento dei tratti desired.Ora, la coltivazione delle cellule vegetali in vitro genera una quantità considerevole. Ora sappiamo che la thatin in condizioni in vitro, abbiamo sentito parlare di variazione somaclonale che può essere utilizzata per generare diverse linee cellulari di diverso trucco genetico becausequesto può portare a cambiamenti di poliploidia nel topic carrier natura della cella.Quindi, l'ibridizzazione somatica è cosa?Si tratta di una tecnica ben nota che abbiamo imparato su it.Così, ibridizzazione somatica in cui le cellule somatiche sono fuse insieme tali che i citoplasmi bene come il nucleo si fonderanno e quindi, si finirà in una singola cantina che avrà il club di entrambe le varietà di cells.Così, generalmente si osserva che queste cellule ibride che ne escono sprigioneranno la natura vigorosa; per il miglioramento delle colture vedrete che l'ibridizzazione delle piante è molto diffusa. Così, seedlessfrutti come esempio, non so se avete sentito o visto seedlesspapaya ormolto più grandi frutte.Così, questi sono tutti a causa dell'ibridization.Dunque, generalmente si fa volutamente l'impollinazione; la mescolanza è fatta tale che gli ibridsono generalmente più vigorosi in natura in termini di loro tassi di crescita orin termini di yields.Now, le piante che si ottengono attraverso l'ingegneria genetica contengono un gene usualmente da un non relazione.Così, quando diciamo integrazione transgenica, significa che un gene che non è presente nell'impianto, ma è stato trasformato nella cromosoma vegetale, tali geni sono chiamati transgeni e le piante che contengono i transgeni sono piante calledtransgeniche. La trasformazione genetica può essere definito come il trasferimento di geni stranieri isolati da piante, virus, batteri in nuovi background genetici. Il primo passo nel trasferimento genico è quello di selezionare le cellule che sono in grado di dare a tutto il trasformato.Così, vedremo quali sono i diversi modi in cui la selezione viene effettuata e quali sono i diversi modi in cui la trasformazione delle cellule vegetali è done.Quindi, cosa è un gene costrutto?Quando stiamo trasformando la cellula vegetale questo sarà comune .Così, il gene costrutto per l'integrazione transgenica conterrà diverse assemble di DNA.Generalmente agrobacterium è utilizzato come strumento per trasferire; questo materiale genetico. Ci sono altre tecniche anche le quali parleremo di about.Quindi, l'intera transazione genetica che viene trasferita avrà queste numerose sezioni.Così, il costrutto conterrà un promotore, conterremo un potenziometro o silenziatore di trascrizione, iniziazione sequenza, codon, esoni, introni stop codon, regionali non tradotte tail. Avete sentito parlare di questi termini?Hai heard.So, il promoter è richiesto per il promoter è utilizzato per .. Sii forte .. L'RNA polimerasi è .. La trascrizione del gene, poi la valorizzazione del silenziatore?. Regolano qualcosa .l' avvolgimento del. Giusto così, regolano come ha detto la promoterattività quando si tratta di potenziing.Così, sta potenziando il promotore. Quando si tratta di un silenziatore, si metterà a tacere il promotore. Questo può avere una certa sequenza o questo può portare a una induzione selettiva del promotore da parte di un'aggiunta esogena di alcuni agents.So, è così che può portare alla regolazione dell'attività promotrice.Poi trascrizionale, inizio sequenza leader?Queste sono le regioni di MRNA per la regolazione della parte di traduzione, poi al ribosomelevel perché una volta che la MRNA è formata si attaccherà al ribosometro per la traduzione.Così, la loro sequenza leader si regola che poi iniziamo codon exons introns.So, qual è il responsabile di cosa dove il tuo gene desiderato è quale parte del gene risponde gli introni di espressione o gli esoni?Exons.Exons.Quindi, c'è RNA splicing che rimuove gli introni allora, ma il ruolo normativo è stato trovato anche delle regioni introniche. Poi stop codon che è la fermata trascrizionale, è seguito da regionarie non tradotte ci sono 5 prime non tradotte regione 3 prime untradotte region.3 prime non tradotte avranno anche la tua polpa una coda che è necessaria per la stabilità dell'MRNA per la processing.Così, il promotore fornisce il sito per il legame della RNA polimerasi ed è involontario nell'iniziazione della trascrizione, poi è richiesto per un'espressione efficiente in fitocells.Così, generalmente il promotore che vengono utilizzati sono promotori industriali o promotori di canbe. Ciò che è promotore inducibile, il che significa che saranno attive le attività promotrici regolate nella presencedi determinate sostanze chimiche. Poi promoter costitutivo indipendentemente dalla condizione, è uniformemente tutto il timeactive.Quindi, il promotore CaMV 35S ha sentito parlare di CaMV che è un promotore del virus cauliflowermosaico molto diffuso per la trasformazione genetica nelle cellule vegetali. Ora è questo un promotore costituente o promotore inducibile?Questo particolare promotore è responsabile dell'intera trascrizione genica del virus del mosaico. Si tratta di un costituente promotore e di altissime attività che è il motivo per cui ed è bene conoscere la cellula vegetale. Così, questo particolare promotore essendo un promotore costituente o un forte promotore è utilizzato per le trasformazioni genetiche nelle cellule vegetali. Tra tutti i promotori noti CamV35S promoter è molto comunemente impiegato negli esperimenti di trasformazione. Il promotore dell'RNA 35S è un promotore costituente molto forte che porta alla trascrizione di tutto il CaMV35S.So, è ben noto per il suo utilizzo in pianta transformation.Una sequenza di potenziatori adatta è anche necessaria per controllare l'attività del promoter. Ora o; quindi, perché si pensa che la sequenza di potenziatore sia utile?Se si supponga di volerlo esprimere in una particolare fase di sviluppo o desiderate una espressionina di un particolare tessuto così, allora è necessario regolamentare l'attività del promoter.Così, che si può fare usando il vostro potenziometro o la vostra altra sequenza di silenziatore. Il potenziatore è definito come la sequenza di DNA che migliora l'attività dei promotersabbia la sequenza di DNA che sopprime l'attività del promotore è nota come silencer.Quindi, come facciamo a recuperare linee cellulari transgene; supponiamo di aver fatto trasformazione usando questo costrutto così, come si fa a scoprire che quale particolare linea cellulare è transformedor non come si fa selezionare?Avreste bisogno di un system.Now, quali sono gli antibiotici del sistema di mercato?Così, generalmente usato è antibiotico resistanza.Dunque, si tratta di un sistema di mercato selettivo. Ora in quale cosa significa, solo quando si esprime nel perché è presente nel cromosoma vegetale; esso si esprimerà nel cromosoma vegetale; esso si esprimerà nel cromosoma vegetale, poi solo sarà in grado di mostrare antibiotico resistanza.Ora, anche una resistenza antibiotica generalmente l'antibiotico, vorreste scegliere una resistenza anantibiotica contro un antibiotico a cui le cellule vegetali sono altamente sensibilizzati.Dunque, che tipo di antibiotici?Generalmente l'hygromicina è usata perché le cellule vegetali canamicina abbiamo sentito nelle batteriformazioni batteriche, ma le cellule vegetali sono ritenute altamente sensibili all'istericina becausedella loro assorbimento e la loro disponibilità a livello di cellule vegetali ed effetto. Quindi, il sistema di hygromicina viene utilizzato come sistema reporter o come marcatore di marker. Gli agenti selettivi differiscono nella tossicità per le diverse specie vegetali. Le diverse fasi di sviluppo delle cellule vegetali o dei tessuti danno risposta diversa al marcatore selezionabile. È necessario utilizzare la corretta concentrazione dell'agente selettivo, quindi erbicidi aregeneralmente più tossica per le cellule vegetali che antibiotics.Now, le colture di callus e cellule sono meglio di quelle organizzate per realizzare la sabbia trasformataper la selezione delle cellule trasformate. Ora, sistema reporter, come è diverso dal vostro sistema marcatore? Generallyyou areGUSyou are GFP GFP; devi aver sentito non è perché è usato. Spectro fotometrico Quindi, provate a collegarlo con il dire il gene del wordreporter. Volete sapere quali livelli di proteine sono espressed.Così, possono essere correlati con. Può essere quantificato oltre che qualitativo in nature.Quindi, se è qualitativo in natura, vi dirà cosa?. Espresso o not.Così, generalmente questi sistemi in celle vegetali che si erediteranno come dice molto frequentemente usedidasi che è glucoronidasi luciferase.Quindi, in cui la fluorite blu o il colouredproduct blu arrivano così sulle cellule che una volta sono esposte a X-Gluc substrate.Così, questo particolare enzima se è espresso correttamente nelle linee cellulari transgeniche sarà possibile suddividere il substrato X-Gluc in prodotto che è di colore blu andyou potrete visionare che e poi questo diventa un'indicazione di integrazione.Ora, i geni devono essere taggati con altri geni che sono chiamati come segnalato. Ora stavo dicendo che si può confermare se si tratta di una trasformazione di successo o non di sistemi di usingreporter. Ora l'altra cosa come può qualcos'altro può essere l'uso del sistema reporter?Può essere utilizzato anche per controllare l'attività promoter o l'attività è nel promoter è attiveor not.Così, allora se si utilizza lo stesso promoter che si è utilizzato per la sua integrazione transgene desiderata per questo particolare GUS per luciferasi e se ciò si esprime allora c'è ahChance che il promoter sia in tagged; l'attività promoter è in tagged è in grado di mostrare una buona attività in questa particolare pianta species.Così, un gene reporter è un'unità di codifica il cui prodotto è facilmente assaggiato come GUS il cui prodotto può essere facilmente rilevabile .Così si chiama assaggio istochimico.Così, questo gene può essere collegato a qualsiasi promotore di interessi. Così, che l'espressione del gene possa essere utilizzata per assaggiare la funzione promoter che attesta il trasferimento e l'attività del promotore. Due geni ampiamente utilizzati sono la beta glucuronidasi e l'altra è la luciferasi, la regionalizzazione di questi geni non vegetali. Questi sono i geni non vegetali sono stati fusi per piantare promotori e poliadenylationsequenze che significa avere bisogno di un 5 prime utr e 3 prime utr., 5 prime utr si sta utilizzando lo stesso promoter che si sta utilizzando per il proprio genee 3 prime utr per l'intero costrutto per l'intero costrutto il tuo GUS o beta glucuronidasi o l'enzima yourluciferasi per l'espression.Così, il trasferimento genico mediato mediato. Quanti tipi di plasmidi vengono utilizzati per il trasferimento genico?Si tratta di plasmidi coniugali su plasmidi trasmissibili, gli altri sono plasmidamenti non coniugati che sono anche chiamati come plasmids..it non trasmissibili, cosa sono i plasmidi?Autoreplicando il DNA extra extracromosomico mantenuto come molecole indipendenti; generallyesse sono state trovate in batterial.Quindi, il DNA plasmide può essere circolare o lineare in natura la dimensione delle plasmidi variesis da 1,15 kb a 1500 kb.Quindi, plasmidi coniugali quali sono questi possono mediare il loro trasferimento tra batterabue il processo di coniugazione.Quindi, c'è un appendaggio, sì che si formano e poi le due cellule verranno riunite in modo da facilitare il trasferimento del materiale.Così, allora i plasmidi coniugali possono mediare il loro trasferimento tra batteri per via del processo di coniugazione, poi i plasmidi non coniugativi non sono autotrasmissible.Quindi, generalmente quando utilizziamo plasmidi non coniugativi il loro trasferimento è fatto con i plasmidi conjugativi. I plasmidi possono essere classificati anche in termini di numeri di copia inferiori e alti; livelli di copia bassi quando sono quasi 1 a 4 copie alti numeri di copie superiori a 100.So, plasmidi coniugativi sono grandi con un rigoroso controllo della replicazione del DNA e sono presentatori di numeri bassi. I plasmidi non coniugativi sono piccoli alti numero di copie e hanno un controllo rilassato di replicationX.Quindi, se supponiamo di lavorare per la clonazione moltiplicazione, che tipo di plasmide preferite?. Plasmidi non coniugali; numerose copie sono prodotte a causa del controllo rilassante della replicazione del DNA. I plasmidi di alto numero di copie sono utili per l'espressione di geni clonati a yields.Così, quando dico vettore binario questi plasmidi possono essere espressi in più di un diverso tipo di organismi. Come quando nei vettori binari di trasformazione delle piante possono essere espressi in e colias bene come si moltiplica in e coli come in agrobatterio. Quando tali plasmidi vengono utilizzati come vettori, essi utilizzano completamente il metabolism.Così, qual è il demerito?Utilizzeranno il metabolismo ospite se si esprimono in un organismo. Ogni plasmide ha un'origine di replicazione può far capire che perché lo diciamo noi isa carico metabolico, poi qualsiasi tipo di integrazione transgenica. Ogni plasmidi ha un'origine del DNA plasmide di replicazione nei batteri può essere da 0,1 a 5 percentilit totali del DNA.Now, i metodi di trasferimento genico; uno è il trasferimento genico indiretto e l'altro è il trasferimento genetico diretto. I metodi di trasferimento dei geni indiretti sono i metodi di trasferimento di geni indiretti più frequentemente utilizzati nelle integrazioni transgene alle cellule vegetali Trasferimento di geni indiretti. Questo è vettore i vettori di trasferimento genico mediato sono vettori di DNA in cui vengono inseriti gli orgeni di DNA stranieri di interesse per realizzare un DNA.Now ricombinante, quali sono i diversi tipi di vettori di clonazione e vettori di espressione?I vettori di clonazione che sono richiesti per se si desidera moltiplicare desiderano un numero elevato di copie, i vettori di espressione questi vettori di espressione sono utilizzati quando si desidera espressionare il transgene nella pianta utilizzata per l'espressione del gene clone per produrre il prodotto. Ora la maggior parte dei vettori porta ciò che abbiamo già studiato questo gene reporter che consente di riconoscere l'esempio antibiotico resistanza.Così, il plasmide mediatico transfer. Plasmidi sono i vettori più comunemente utilizzati nella clonazione di geni. Quali sono i diversi tipi di plasmidi che vengono utilizzati?Si tratta di diversi tipi di plasmidi che vengono utilizzati, arriverai attraverso i plasmidi Ti plasmidi Ti plasmidi Ti. Ti plasmidi Ti è tumore inducente plasmidi o plasmidi di radice. Ora alcuni di questi una volta disarmati. Ora arriverò a malattie rare in natura o a causa di batteri che contengono questi plasmios.Ora, questi plasmidi avranno serie di geni. Ora perché secondo te un batteri infetta l'impianto dovrebbe essere uno scopo dietro a this.So, contiene alcuni geni che non possono essere espressi quando il plasmide è presente incappucciato i batteri, ma come si integrano nell'impianto che esprimeranno questi geni e questi geni portano alla produzione opina questi pareri sono fonte di carbonio e azoto forthe battera.Quindi, ora in questo corso la porzione che si integrerà avrà alcuni geni oncogenici, ora l'impianto sta permettendo a questa infezione di accadere .Così, ha determinate auxina e il gene del citochinina oltre che causealcune alterazioni biochimiche al punto delle infezioni. Ora gli eventi morfogenetici possono o può portare a una rapida moltiplicazione della cellomina a coronamento della galla o forma di radice organogena o avveniente per cui sono calledas hairootz.Now, questo stesso quindi, questi agrobatterio e il plasmide che lo contengono e come sono stati modificati o in disuso; la rimozione in disuso di questi geni oncogenici che significa areoterapia e i cytokinins geni e mettere un MCS il loro più sito di clonazione con differenze di sites.Quindi, che il gene desiderato possa essere integrato ora questo intero casset è incluso nella T-DNAregion che parte del costrutto che si integra nel cromosoma vegetale, questo si chiama T-DNA.Now, questa porzioni contiene un bordo destro e un bordo sinistro. Queste sono sequenze di ripetizioni dirette venti coppie di base intorno a lungo confine a destra e a sinistra borderthen l'intera esterna di questo T-DNA anche ci sono diverse regioni del plasmide di Ti plasmid i geni che sono responsabili della rottura e della moltiplicazione di questa lavorazione T-DNA di questo T-DNA, poi trasferimento di questo T-DNA nella cellula vegetale che protegge fino a raggiungere il cromosoma delle cellule vegetali e si ottiene integrated.Quindi ci sono geni virulenza poi ci sono altri geni che saranno necessari all'intero imballaggio del T-DNA.So, non è solo T-DNA, ma è il T-DNA con altre proteine coinvolte l'intero processo di movimento fino al cromosoma vegetale anche con la sua interazione con la pianta con la sua interazione con la proteina vegetale, facilitando così l'integrazionin il cromosoma vegetale.