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Ora, in embriogenesi somatica, ci sono due fasi. Se si ha bisogno di produrre embrioni da cellule somatiche che si chiama embriogenesi somatica sono due stadi. Stage uno dove c'è induzione di embriogenesi che significa che le cellule che nel frattempo sono incline a diventare embrioni o che sono incline a diventare embrioni in natura li indurrete a sottovalutare l'embrione o le cellule che non sono determinate a fare embrioni sono l'embrione e la fase uno è l'induzione dell'embriogenesi e la fase due è poi una volta che lo zigote è formedalle diverse fasi da cui si impegna produrre i vostri in vitro plantlet.Quindi, i requisiti per queste due fasi sono diversi in termini di media. Non è necessario in genere qualunque composizione mediatica stia funzionando bene con l'induzione di callus per indurre embrioni potrebbe funzionare bene, ma una volta per lo sviluppo dopo l'induzione di questi ultimi potrebbe avere bisogno di revisione dei media, specifici composition.Così, le diverse fasi nello sviluppo degli embrioni differiscono morfologicamente.Quindi, guarderemo c'è una foto. Ci sono quattro stadi diversi prima che la regione ipocotil si appesantini, quindi, le cellule embrionali in generale, che cosa sono?Quelli che hanno competenza ed embriogenesi in natura sono generalmente ritrovati ad essere piccoli ricchi di citoplasmo e sono le dimensioni vacuole sono meno. E quelle cellule che sono non embrionali saranno grandi vacuolazioni e meno densecittoplasm.Così, le cellule embrogene avranno più denso il citoplasmo in confronto alle non - embrogeniccellule. E in generale, si osserva che sono una volta trasferiti in bassi auxin containingmedium poi induce pro embros.Ora, una volta che gli embrioni somatici vengono trasferiti dal mezzo di induzione al medio sviluppo, quando si sta prendendo posto da un singola cellula, l'induzione, la singola cellula si dividono in un numero di celle da 4 a 5, quindi formarsi di struttura globulare. Una volta che la struttura globulare è formata subisce ulteriori sviluppi che significa differenziazione per diventare una forma torpedo, e poi dopo la forma torpedo si subisce ulteriori formazioni vascolari.Generalmente, si può vedere nelle regioni ipocotilee in cui gli elementi xilici iniziano a diventare visiblee nel cotyledon è regiono.Così, e poi il cotiledons lo sparo e il root promidium appezzo.Così, sviluppo e maturazione, è simile all'embrione zigotico, ci sono quattro stadi conosciuti globulari, poi a forma di cuore, poi torpedo e cotiledonarystage.Now, tutti questi sono morfologicamente distinti. Si può vedere chiaramente una volta che l'embrione inizia a sviluppare gli embrioni somatici è stato. E inoltre, biochimicamente anche molecolarmente sono diverse perché si sta verificando la formazione di bundle vascolare e quindi portando a fromla regione meristem ci sarà un meristema di radice, sparare alla regione meristem appezza.Così, cosa succede?A torpedo la differenziazione delle cellule stadio si verifica stabilendo la radice e sparando meristem.Now, qual è la fase dei torpedi?Questo terzo - uno che sembra un torpedo.Ora, piccole cellule cytoplasmicamente ricche di embrioni sono osservate in questi meristemsabbia il resto delle cellule, sono cellule vacuolate e maturi che formeranno il bulk.Now, quali sono i fattori che possono influenzare l'embriogenesi?Si tratta di un mezzo nutriente appositamente saccarosio e riducono l'azoto. Poi gas leggeri, gas che qui significano ossigeno disciolto, poi ormoni esogeni yourgrowth regolatore.Quindi, quali possono essere le diverse applicazioni degli embrioni somatici?È possibile utilizzarli per la micro propagazione. Sono utilizzati anche come colture d'organo per la produzione metabolita secondaria .Quindi, quando dico produzione metabolita secondaria come si pensa che gli embrioni somatici possano essere usedati per la produzione di metabolita secondaria su larga scala?Micro propagazione ultima classe stessa sappiamo, grande quantità di piccola luce vegetale può arise.Così, allora come mai la produzione di metabolita secondaria?La terza applicazione è data in quanto possono essere utilizzate come sistema modello per studiare la crescita di theplants.Così, anche questo è abbastanza scontato. Come fa un embrione a sviluppare siti?Così, possono fungere da sistemi modello per embrioni l'embrione zenzero vero e proprio, ma come mai possono essere utilizzati per i metaboliti secondari?Come e perché pensi?Gli embrioni somatici sono più organizzati della cellula cultures.Signora, è perché tutti si formano dalle cellule somatiche che sono moreconsistenti nella produzione del metabolita secondario, e nessuna grande quantità di variatore e nella qualità del metabolita secondario non può essere seen.Così, questo è il motivo. Una delle ragioni può essere che. Essere una struttura organizzata è meno incline alla variazione.Così, è e peraltro il metabolismo secondario è legato anche nelle cellule vegetali con la differenziazione organogenesi. È la funzione dell'ordine superiore. Il metabolismo secondario è arrivato più tardi, primario il metabolismo è per la crescita e lo sviluppo .Così, il metabolismo secondario è parte di funzioni superiori che significa molto più organizzativo per sopravviv.Così, che ha bisogno di cellula di contatti cellulari, organogenesi per accadere, e la differenziazione in organformazione non è altro, ma entrare in quelle funzioni organizzate. Le diverse cellule si uniscono per svolgere una funzione specifica, quindi è più definita now.Quindi, questo tipo di cellule quando si uniscono diventano strutture organizzate, lì il metabolismo secondario è più visibile in termini di capacità biosintetica.Così, i metaboliti secondari si trovano ad essere più alti nella strutturazione organizzata - Ora, e l'altro sono più stabili rispetto alle colture di callus o cellule. Nell'ultima classe anche si sono mostrati per micro propagazione embrioni somatici canbe coltivati in reactors.Quindi, una volta somatico si darà origine ad un altro embrioni somatico, la moltiplicazione dovrebbe essere accerchiata. La coltivazione su larga scala significa cosa?Che nella moltiplicazione dei reattori stia avvenendo .Quindi, una volta embrioni somatici formeranno un altro embrione somatico, deve partire dalle cantine. Quindi, un logicamente si può dare una soluzione?Quale dovrebbe essere il materiale di partenza?Che tipo di cellule?Tutte le cellule, la somatica o molto più vicine che avranno probabilità più alte.Ricordate di aver parlato di cellule con embrione che sono determinate a embrioni di produceembrioni, e quelle che sono indotte a produrre embrioni, potenziale.it, le cellule che ora siete in grado di trovare se, se riuscite a trovare quelle cellette che hanno potenzialità embrionali, utilizzateli in sospensione, fate coltivazione su larga scala e poi date loro le condizioni per formare strutture organizzate calledsomatiche embrionali, la cultura meristem non è nulla, ma si fa uso delle regioni meristematiche del plantato regioni bud laterali, regioni bud axillari o meristemi apicali e che saranno utili a rendere le piante libere da virus. Abbiamo discusso anche della ragiona.Ora, la distribuzione del virus è disomogenea in tutta la pianta ed è molto meno in un meristema, le ragioni sono state il virus non possono viaggiare abbastanza velocemente attraverso il plasmodellismo.Così, essendo queste regioni meristematiche le cellule sono rapidamente diviing.Quindi, il tasso a cui si sta dividendo e informare le nuove cellule, il virus per viaggiare fromattraverso queste connessioni è il tasso è minore di quello .Così, uno è questo, la probabilità di trasferimento del virus è ridotto. La seconda è che si sta parlando della presenza della vascolarizzazione, mancano i vascularbundle nelle regioni meristematiche. Sono ancora a formare delle elementari vascolari. Quindi, il trasferimento di conseguenza, virus difficile a queste regioni.Quindi, la cultura meristema è preferita per generare piante libere da virus. Coming su protoplast culture.Now, cosa è il protoplast?Celle priva di. Cell wall. Cell wall.Quindi, dove pensi, perché pensi che la cultura protoplast faccia?. Può essere d'uso. Cell non può essere utilizzato per l'ibridazione .. Anche con intere piante che vediamo in agricoltura si producono, ma si tratta di quello che è molto più facile, rendendo la processa più semplice. Così, quando diciamo ibridazione somatica, faciliterà perché le cellule somatiche si combinano insieme. Quali sono gli ibridi?Cosa sono gli ibridi?Quando dico un ibrido, viene usato per l'ibridizzazione. Mezzi cosa?Così, quando due celle possono essere combinate in modo tale che i due nuclei si combinano per realizzare un solo nuclei, tutto il loro contenuto cellulare, un citoplasmo e un nucleus.Quindi, i nuclei che devo combinare insieme e il citoplasmo viene mixed.So, questo è ciò che è fatto?Le cellule sappiamo che le cellule vegetali sono attaccate l'una all'altra. Sono attaccate attraverso lo strato ricco di pectina. Che cos' è quel strato chiamato?Mezza lamella. Medio lamella.Quindi, quel strato deve essere rimosso prima che la parete cellulare venga rimossa, quindi ora, l'attachmentis off.Now, la parete cellulare viene rimossa per il protoplasmo a venire insieme. Ci sono due modi per rimuovere la cella uno è meccanico, l'altro è enzimologico - Così, in meccanica si usa una lama molto affilata per tagliare la cella wall.Now, se la membrana plasmatica in generale sarà più vicina alla parete cellulare, quindi ci sono dei canceche che la membrana può avere scrupolare .Quindi, cosa bisogna fare per evitarlo?Per facilitare questo processo, la separazione meccanica delle cellule cosa si dovrebbe fare?Si può dare una soluzione?Tutto è fatto sotto il microscopio. Primo prerequisito è cosa?Per disintegrarsi, per separare le cells.Così, ora, che è operazione richiede trattamento pectineo o, quindi una volta supporre che le cellule siano state separate avete una singola cell.Ora, c'è una parete cellulare e la membrana plasmatica, devo tagliare la parete cellulare. Conoscendo che la membrana plasmatica è molto vicina come evitare che la membrana plasmatica venga rottamata .. .Molto bello, molto good.Quindi, ora, puoi semplicemente elaborare su questo?Plasmolisi aiuterà come? contenuti come entrambi e mettendo un ipocrisia. Sei d'accordo?Hm.So, ecco cosa è done.Quindi, si cambia la pressione osmotica aggiungendo osmoticum tale che tale che la membranedistratta i contratti di tipo tale che la parete cellulare può essere facilmente tagliata off.Now, che cura dovrebbe essere presa in questo?. La viabilità non deve essere perduta .. Così, come si taglia l'equilibrio deve essere maintainedperché ora sta diventando più fragile con l'unico membrane.Quindi, allora devi riportare la pressione osmotica tale che se è plasmolizzata e una volta che il muro della cellula è fuori la, la cellula è fuori la membrana plasmatica è l'unico barriertra l'esterno e l'interno ora è plasmolised.Quindi, ora, cosa accadrà?Era plasmolizzato a causa di?. Concentrazione superiore o inferiore al di fuori dei soliti dei sali?Hyper significa?Ha detto .. Concordato .. Quindi, se si tratta di concentrazione maggiore e la membrana plasmatica o il plasmoliato o la membrana plasmatica è l'unica barriera rimasta. È molto high.Quindi, ora, che cosa accadrà?La viabilità si reduce.Così, ora, vorreste bilanciare it.Now, mentre bilanciare vorreste ridurre la concentrazione. Si consiglia di non ridurre improvvisamente la pressione osmotica. Che cosa è; perché è consigliabile così? acqua di pressione da. E la cellula buratta.Così, questa cura deve essere presa. L'equilibrio della pressione osmotica quando si crea protoplasm.Così, si tratta di cellule individuali funzionali con membrana plasmatica come unico rivestimento esterno. Quali possono essere le diverse applicazioni di realizzare protoplast o fare protoplast culture?È possibile ottenere celle singole. Perché le singole cellule?È tu che vuoi fare la propagazione clonale da singole cellule che vuoi poi dividere farmacaluse poi rigenerate in plantlets.Così, questa è una propagazione clonale. La trasformazione cellulare o la trasformazione animale ed è l'assorbimento della genetica extracellulare. Quindi, o anche una modificazione genetica desiderabile in te è necessario fare alcuni aggiornamenti dall'extracellularto intracellular.Ora, qual è ciò che facilita quell' assorbimento?In cella vegetale, se volete fare trasformazione qual è la barriera, prima barriera?Parete cellulare. Cell wall.Quindi, il protoplast è privo di cellulari wall.Quindi, ora la trasformazione è molto più facile perché l'unica barriera è la membrana plasmatica, si può produrre completa di singola origine cellulare, poi la trasformazione è facilitated.Ora, si può anche studiare.Una volta che si dispone di protoplast a seconda della composizione mediatica, una volta che il protoplast startsdividendo le condizioni nutrizionali di queste cellule divise può essere diverso dall'originalprotoplast.Così, le condizioni nutrizionali possono addirittura portare al piombo - Ora, le nuove cellule non hanno bisogno di protoplast perché sono la lavoroterapia genetica in quanto si tratta di ridurre le pareti cellulari, quindi le cellule più nevicate che verranno prodotte sviluppano le cellule wall.Quindi, i loro requisiti nutrizionali sarebbero diversi e possono essere utilizzati anche per l'isolamento di diversi organelli cellulari se gli studi dopo essere done.Così, allora parlavo di quali sono i diversi modi di fare protoplast, un ismeccanico l'altro è enzimmatic.Now, meccanico comporta taglio di cellula plasmolyzzata con lama affilata per rilasciare il protoplast.Now, enzimatico implicherebbe esporre le cellule a vari tipi di enzimi che conosciamo. Che tipo di enzimi?Bisogna rimuovere la cella wall.Quindi, tutti quegli enzimi che possono degradare la parete cellulare o decomporre la parete cellulare, ad esempio .. Quali sono poi, si deve sapere qual è la composizione della parete della cellula vegetale, cellulosa, emicellulosa, pectinase.Hm.So, non è nulla, ma una miscela di macerozime, driselasi, questi sono nomi indicati da alcuni companidi origine dell'organismo è generalmente fungus.Quindi, queste classe di enzimi in insieme come mix sono chiamate anche per la degradazione della parete cellulare, la degradazione a parete delle cellule vegetali .Quindi, come si fa?Usa sterilizza l'esplorazione.Così, generalmente si sterilizza le foglie esplete. L'epidermide viene rimossa, e poi e l'esploratore viene incubato con questi mixturismi enzimatici per qualche tempo. E si dice che le foglie flaccide facilitano la pelatura, la flaccida lascia mezzi. Pensate logicamente, cosa può significare?Si riferisce alle foglie secche o a qualcosa?Foglie di Right.Drooping. Drooping lascia significa cosa?Minore .. Turgor pressure.Quindi, quando utilizziamo cellule poi si utilizzano cellule attive attivamente che sono da luogo esponenziale per l'isolamento di protoplast.Now, condizioni che dovrebbero essere ottimizzate se si vuole isolare protoplast ci sono concentrazione enzimatica, tempo di esposizione, composizione enzimatica, quali sono i diversi tipi di enzimi che stiamo usando, poi la pressione osmotica, la presenza di osmoticums.Quindi, la pressione osmotica, che tipo di soluti, quali concentrazioni stiamo usando per l'osmoticums.Now, l'enzima generalmente usato è nella gamma di concentrazione da 0,5 a 2%, wheremacerozyme che è una miscela di questi tipi di enzimi o separatamente si può usare cellulosa, pectinasi, emicellulosa, un altro mix enzimatico come drieselase.Quindi, soluzione enzimatica. E sorbitolo, mannitolo, qual è lo scopo?Osmoticbalance.Molto nice.Così, vengono utilizzati come osmoticum per bilanciare la pressione osmotica. Poi cloruro di calcio, per la stabilità a membrana.Questo, neutralizza neutralizza la carica superficiale, riduce il charge.Quindi, che .. Si tratta di protoplast o ibridization.Quindi, generalmente, se devono essere riuniti per l'ibridazione il chargedo di superficie deve essere neutralizzato, in modo che non si ripete, le membrane devono faticare, è notit.Così, è detto che il genotipo e i fattori ambientali possono anche impactprotoplast isolation.Quindi, i fattori che influenzeranno la cultura protoplast, se si vuole solo fare cultura ofprotoplast allora ovviamente, perché l'unica barriera è la membrane.Così, la pressione osmotica deve essere bilanciata con attenzione.Quindi, la pressione osmotica, l'osmolarità del mezzo viene regolata allo stesso livello dell'enzima la soluzione di lavaggio a cui si sta esponendo, altrimenti la cellula può rottura o getunviable.Poi, la coltura prolungata ad alta pressione osmotica può provocare la sfoglia delle cellule. La sfoglia di osmolarità significa necrosi o viabilità loss.Ora, l'osmolarità del mezzo cosa è fatto?Si diminuisce gradualmente con la formazione a parete cellulare e la divisione cellulare. Gradualmente diminuisce la nostra discussione, la ragione è improvvisamente se si diminuisce la cascata all'interno della cellula e la cella può burst.Così, poiché la parete cellulare si sta formando, con la barriera si riduce quindi la diminuzione di osmoticida. Abrupt diminuisce quindi nella pressione osmotica. Quali sono i requisiti nutrizionali neutri?Come ho detto generalmente per iniziare con essi possono essere simili alla cultura cellulare o callus, ma una volta che le cellule iniziano a dividersi o poi è necessario che la composizione mediatica possa essere necessaria per la revisione. Presenza di alta concentrazione di ammonio può essere tossica per protoplast.Perché?Siamo stati quel giorno a discutere che il nitrato e l'ammonio sono la fonte di azoto per le cellule delle piante, non è così. E facile assimilazione è l'ammonio. Nitrato anche una volta che viene assimilato ripreso, viene convertito in ioni di ammonio tostato integrato in aminoacidi ammoniacali o molti diversi ovunque sia bisognoso, allora perché?Generalmente si osserva che se si danno concentrazioni più elevate di ammonio, um thereis loss loss, c'è perdita in crescita della pianta. Questa si chiama tossicità di ammonio.Sapere che, non è interessante. Ammonio in definitiva è necessario, il nitrato viene anche convertito in ammoniaca solo prima entra nel metabolism.So, perché non dare direttamente l'ammonio.Se si dà ammonio, cercate di dare ammonio direttamente alle piante può essere tossica per le cellule vegetali ammonio. Perché così?Ci siamo. Molto bello, molto good.Quindi, l'assimilazione di ammonio si trova anche imparentata a rilasciare una chance perché si sopporta, quindi per bilanciare ci sono channels.Quindi, anche il trasporto ionico si svolge con qualcosa che si sta immettendo in qualcosa, c'è un parallel.Così, c'è un riflux andinflux parallel.So, una volta che gli ioni di idrogeno sono refluiti, poi c'è l'acidificazione nell'ambiente delle cellule e c'è il pH della cellula viene disturbato .Quindi, si dice che sia uno dei motivi per cui le piante poi la crescita è inibita. Si ha di solito le vitamine azotate di carbonio i regolatori di crescita vegetali, sono manipolati per facilitare il caso di qualsiasi forma di cultures.Now, i regolatori di crescita. Combinazione di auxina e cytokinin stimola la crescita e la divisione sappiamo che la coltura cellulare e protoplast può essere utilizzata, ecco perché ho detto che la combinazioneche stiamo usando per la coltura di callus o cellule potrebbe funzionare inizialmente per le colture protoplast, ma una volta la coltura protoplast che si divide in cellule potrebbe avere bisogno di revisione. E fattori ambientali, luce, intensità, altissima intensità luminosa possono inibire la divisionina protoplast.Così, lì generalmente si preferisce che si usi la luce dim o si effettua in dark.Quindi, e che altro, la temperatura del pH è generalmente la stessa cosa usare per le vostre colture cellulari, il trattamento di right.Heat e l'impulso elettrico si trova a indurre la divisione in protoplast. Si dice che l'immobilizzazione a volte aiuta nelle colture di protoplast che è molto evidente. Perché pensare che l'immobilizzazione sarebbe utile nelle colture di protoplast?Non leggere solo pensare?Pensate che sia di supporto in cell.Right.Protection.Così, perché sappiamo che è molto fragile c'è solo la membrana cellulare barrier.Quindi, incapsulandola in forma di gel la sta dando più protezione.Ora, l'infermiera scultura e i media di condizione si trovano a volte utili alle protoplastculture. La tecnica della cultura dei tessuti infermieri che avevamo letto prima di quello che era?Usando il callo. Non usare un altro, possono essere gli estratti delle altre cellule può essere utile per la crescita del loro desiderato culturi.Così, la fusione di protoplast di ibridizzazione somatica come è fatta e qual è?Si tratta di un alternarsi all'allevamento convenzionale. La fusione di Protoplast può superare l'incompatibilità sessuale e ottenere ibridi somatici, se si va a usare le cellule somatiche per produrre cellule ibride - Ora, la fusione di cellule somatiche e la produzione di ibridi è nota come ibridization.Now, fusione per trattamento di somatic.Dunque, di cosa serve tutto?Hai bisogno di ioni di sodio, quindi è trattato con nitrato di sodio, forse sarà il cloruro di thencalcium, poi la peg.Polietilenglicoli. Polietilenglic.Così, è facilitato si dice che devi fondere, devi portare le cellule insieme. Quindi, quindi, ti piacerà trattarla con cationi come ioni di sodio o ioni di calcio e glicole di polietilene. Come è il glicole polietilenico?Peg è usato in trasformazione, non è così. Sì Cosa sta facendo?Permeabilità.Quindi, sta manipolando la permeabilità della reversibilità della membrana cellulare, reversibilmente.Quindi, se si usa, faciliterebbe cosa?Le membrane cellulari devono fondersi insieme, in modo che ci sia un trasferimento di nuclei, organelli, il citoplasmo deve diventare uno negli ibridi, non è it.Così, allora i pori transitori devono essere formati e le membrane devono farsi fused.Così, il glicole polietilenico sta aiutando in fusion.Quindi, tutto questo non facilita nulla, ma in arrivo insieme delle cellule, fusione dei themembranes cambiando la permeabilità delle membrane, fluidità delle membrane. Quali sono i passi in avanti?L'isolamento del protoplast prima, poi l'induzione della fusione a membrana, mescolando gli organelli citoplasmi si sarebbe poi verificato, poi la formazione di carrioni di peccato. Formazione di carrioni di peccato dopo che la miscelazione è avvenuta ci saranno forme di peccatore. Sin carrioni significa?. Due nuclei si uniscono per formare onenuclei. Poi selezione di prodotti di fusione t.Quindi, una volta ottenuta la selezione sceglieremmo il diritto, l'auspicabile se la perfusione sia avvenuta non sotto il microscopio si selezionano le cellule fusite o ibrids.Now, questo allora si usano quelle cellule che si danno condizioni ottimali per quelle ibride moltiplicate, una volta che si moltiplicano poi si formano callus e poi da callus youcan si rigenera in plants.Quindi, le proprietà di membrane a fusione di protoplast sono ciò che stavamo discutendo .Now, processo di fusione di protoplast richiede cosa?Richiederebbe il contatto diretto della protoplast.Così, cosa è facilitato?L'aggiunta sarebbe facilitata aumentando le cationi divalenti che significa calcio o sodiumions.Così, ne abbiamo già discusso. Questo cambierebbe le proprietà superficiali delle membrane cellulari, e usando polietileneglicole cambierebbe la fluidità delle membrane, cambiando reversibilmente la permeabilità o reversibile permeabilità.aumento della permeabilità delle membrane per accogliere il material.Ora, il DNA diretto o la macromolecola uptake che sono ora membrane cellulari che conosciamo sono semi - solidarires.Questo è ciò che abbiamo imparato e fluido mosaico modello.Ora, fluidità di questo membrana si tratta di una caratteristica fisiologica s.p.So, ora, cosa è richiesto?Come si fa?Dobbiamo avere come detto reversibilmente aumentare il pore size.Generalmente, questo è ciò che sta accadendo nelle cellule anche. Sono le cellule se vogliono riprendere alcune macromolecole, ci sono porzioni che si formano dei pori aretransienti che si stanno formando e poi anche quando viene danneggiato, c'è la poreformazione, ma c'è processo che è presente nella cellula per riportare nuovamente la membraneto la sua posizione e chiudere l'holes.Quindi, lo stesso processo viene facilitato utilizzando il tuo glicole polietilenico o qualsiasi chemioterapia o anche a breve durata di. Bisogna aver sentito per il trattamento termico di trasformazione è fatto o pulseselectroporazione elettrica è fatta, quindi la stessa cosa può essere usata qui per migliorare i risultati di somatichybridizations.Così, questo è uno dei protocolli che vengono utilizzati per la fusione di protoplast in cui si utilizza la concentrazione di ioni di calcio, carica elettrica e il pH è cambiato anche perché è detto che ha un effetto profondo sulla fusione di questi protoplast.Così, che cosa è fatto?Mescolate sodio, nitrato di nitrato e saccarosio, saccarosio essendo un osmoticumente che una volta i protoplasti sono there.Quindi, dovete bilanciare la pressione osmotica. Poi lo si riscalda a 35 ° C o quindi il protoplast in questa miscela e poi si centrifuga le diverse cellule che si vogliono produrre un ibrido somatico quelle cellule sono centrifugate e poi di nuovo è lasciata a 30 ° grado C per qualche tempo per la fusionto succede. Così si sta facilitando la diffusione e poi si sta dando tempo per la forma del peccato carrionsto, una volta formate le carrioni di peccato poi si controlla il suo fare lo screening e si modifica la composizione mediatica per dividere e formare le culture.