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Vidéo:

Bonjour tout le monde, bienvenue à une autre conférence pour le génie et les principes de la distribution de médicaments, faisons un bref résumé de ce que nous avons fait dans la dernière classe.
(Reportez-vous à l'heure de la diapositive: 00:37)

Donc, dans la dernière classe, nous avons parlé à la majorité d'un sujet majeur qui est Immuno isolé Cell Therapy et c'est dans le module immunitaire que nous sommes actuellement. Et ici nous cherchions la livraison de cellules ; et quand je dis la livraison de cellules, un médicament dans ce cas est des cellules où le médicament réel est en fait quelque chose d'autre qui est produit par les cellules. Donc, ça pourrait être de l'insuline, ça pourrait être de la dystrophine, de l'insuline, bien sûr, si vous souffrez de diabète, la dystrophine est pour la dystrophie musculaire ou ceci pourrait être autre chose aussi.
Je veux dire que ce sont les deux applications majeures ici, mais vous pouvez potentiellement rechercher toute maladie qui nécessite une certaine protéine comme intervention et vous pouvez ensuite distribuer des cellules qui produisent ces protéines. C'est donc ce que nous avons discuté. Donc, en termes de livraison aux cellules, nous avons parlé de certains paramètres parce que la plupart du temps les cellules que vous obtiendrez, seront de source étrangère et il pourrait y en avoir. Donc, pour l'essentiel, toute source de cellules peut être divisée en trois catégories: l'une est autogène la seconde est allogénique et la troisième est xénogénique, où autogène représente quelque chose qui est dérivé de votre propre corps. Donc, si vous utilisez des cellules autogènes, vous n'avez pas vraiment besoin de vous soucier du système immunitaire, car votre système immunitaire le reconnaistera en tant que vous-même des protéines. Donc, ça ne va pas l'attaquer.
Donc, ces choses survivent beaucoup mieux, mais le problème est que la source de ces cellules est relativement faible et, dans la plupart des cas, n'est pas là. Donc, si vous souffrez de diabète, vos propres cellules pancréatiques ne fonctionnent pas. C'est pourquoi vous avez besoin de plus de cellules de différentes sources. Donc, autogène ne travaillera pas dans ce cas, similaire à la dystrophie musculaire aussi, où vos protéines ne sont pas dans la conformation correcte ou pas dans l'orientation correcte et donc, vos propres cellules ne fonctionnent pas. Ainsi, vous aurez besoin d'une cellule d'une source quelque peu différente qui possède une copie fonctionnelle. Et donc, dans ce cas, allogenic est le plus préféré qui veut dire que l'obtenir de la même espèce.
Donc, puisque nous sommes humains, vous parlez de l'obtenir d'un autre donneur humain. Donc, dans ce cas, le système immunitaire va agir contre lui, parce que le système immunitaire le reconnaira comme une cellule étrangère et qu'il doit être protégé. Et bien sûr, la xénogénétique est encore plus stricte en ce qui concerne la réponse immunitaire, car elle provient d'une autre espèce. Donc, ça pourrait être ça, disons que j'ai des organes ou des cellules d'un porc, puis essayer de l'implanter dans mon corps, mais, évidemment, ceux qui sont si différents de mes propres cellules du corps le système immunitaire les reconnaissera immédiatement et essayeront de tuer ces cellules.
Donc, ce sont quelques-unes des sources bien sûr, maintenant parce que nous disons que principalement les sources allogènes et xénogéniques sont les sources que nous avons, nous devons protéger ces cellules avant que nous les mettez-les dans le corps parce que sinon le système immunitaire va le tuer. Donc, ce qui est fait dans ce cas, c'est que vous prenez un compartiment, qui a une membrane semi-perméable ou une membrane, vous placez vos cellules dans ce compartiment, les cellules que vous livrez et essayez de protéger du système immunitaire. Et cette membrane est telle qu'elle permettra à de petites molécules comme le glucose, l'oxygène de passer à travers ; alors que les grosses molécules plus grosses comme les anticorps ou d'autres cellules immunitaires ne peuvent pas y aller.
Donc, c'est tout le concept, derrière lui et nous avons discuté de plusieurs conformations différentes de ces implants et tout, mais finalement c'est ce que vous voulez. Alors, faisons avancer le débat.

(Référez-vous à la diapositive: 05:07)

Alors, parlons de la compatibilité des implants polymériques dont nous avons besoin dans ce scénario. Donc, tout d'abord, bien sûr, lorsque nous en avons discuté un peu, c'est la biocompatibilité, ce qui signifie que, ça ne devrait pas vraiment adsorber beaucoup de protéines sériques et tissulaires, et c'est un peu évident parce que c'est votre implant qui porte votre cellule, si beaucoup de protéines commencent à enrobage sur elle ; il peut d'abord empêcher l'adhésion cellulaire du transport cellulaire de différents nutriments ainsi qu'il peut aussi conduire à l'attraction de cellules plus immunitaires venant, comme nous avons discuté de l'adsorption des protéines est généralement une couche qui aide dans plus de cellules à entrer et s'attacher à ce site.
Donc, il est donc nécessaire que nous caractérisons complètement le type et la quantité de protéines qui adsorbent sur elle, et nous pouvons utiliser des polymères hydrophiles comme nous avons discuté des polymères hydrophiles sont plus semblables à l'environnement que les protéines sont actuellement dans lesquelles est l'eau hydrophile. Donc, ils auront moins d'adsorption et moins de changement de confirmation et parfois même si vous ne pouvez pas vraiment travailler avec des polymères hydrophiles, ce que vous pouvez faire c'est sur votre implant que vous pouvez décorer avec notre molécule préférée ici qui est le cheville. Et ce qu'il fera, c'est qu'il agira comme un essuieur de pare-brise, comme nous en avons discuté à plusieurs reprises dans ce cours et s'assurer qu'aucune des protéines ne s'absorbe, même s'il s'agit d'une surface hydrophobe. Donc, ce sont peu des conditions et des exigences en termes de biocompatibilité.

(Référez-vous à la diapositive: 06:46)

Alors qu'en est-il de l'inflammation? Il devrait donc réduire l'inflammation et l'adhésion cellulaire à la surface du polymère. Donc, ça va de pair avec les données sur les protéines dont nous avons déjà parlé, mais même cela devrait aussi réduire l'inflammation. Ainsi, cela permettra à la barrière de ne pas se former en termes de diffusion de produits thérapeutiques et d'éléments nutritifs dans et à l'extérieur, et le succès est essentiellement pour ces implants directement liés à la quantité que vous pouvez minimiser la capsule fibreuse.
Parce que finalement, si votre capsule est bonne et que le corps ne peut pas le dégrader, et si un corps ne l'aime pas, alors ce que nous essaierons de faire, va essayer de le mettre au mur comme nous l'avons discuté.
Donc, le corps va d'abord essayer de le retirer s'il ne peut pas et puis il va juste le mettre à l'abri, de sorte que le reste du corps est protégé de cette capsule particulière, mais ce n'est pas ce que nous voulons dans notre thérapie, parce que nous voulons qu'il continue à interagir avec différents types de nutriments, avec de l'oxygène, ainsi que la libération du produit que nous voulons de ce dispositif particulier.
Donc, tout le succès de cette approche dépendra de la formation ou non d'une capsule fibreuse. Donc, encore une fois si une capsule fibreuse épaisse est formée, alors c'est la fin de l'appareil, parce qu'à ce point vous ne pouvez vraiment pas avoir un quelconque échange se produire à un taux substantiel que vous pourriez avoir besoin de ce dispositif. Et encore une fois remonte à l'exigence selon laquelle vous devriez avoir un polymère hydrophile ou au moins un revêtement hydrophile, vous pouvez utiliser l'arrimage pour faire ça et les surfaces normalement non chargées auront moins d'adsorption de protéines.

Donc, vous pouvez réduire la charge de votre surface de ces appareils, et enfin, si nous parlons de compatibilité immuno et cela signifie, que le premier de tous nos anticorps ne devrait pas être capable de pénétrer et nous avons déjà discuté de ceci dans la classe précédente que, la taille des pores devrait être telle que les anticorps ne peuvent pas passer. Parce que si les anticorps passent, alors ils altéreront la fonction de ces cellules.
La deuxième chose est que nous devrions réduire l'activation du complément. Donc, maintenant, c'est très délicat, parce qu'en termes de la plupart des autres molécules et cellules basées sur le système immunitaire, elles sont assez grandes, je veux dire que nous parlons d'anticorps qui sont plus de 100 kDa, nous parlons de cellules qui sont en microns. Donc, il est facile de ne pas les faire pénétrer et de petites molécules pénètrent pour le glucose et l'oxygène, mais quand nous parlons de ces protéines de complément, comme nous en avons discuté il y a quelques classes, ces protéines de complément sont aussi assez petites. Nous parlons donc de protéines de complément de 10 à 20 kDa qui flottent autour de nous.
Donc, il est extrêmement difficile d'empêcher l'activation du complément à partir de ces surfaces, mais il y a différentes stratégies dont nous avons parlé, comme une activation c 5 un revêtement avec certaines molécules qui peuvent ne pas laisser ce complément activer. Ces stratégies peuvent donc être adoptées dans le scénario. Donc, c'est pourquoi vous avez besoin d'un contrôle très serré sur la taille des pores pour minimiser ces protéines de complément autant que vous pouvez et avez toujours un bon flux de nutriments à travers cette membrane.
Et non seulement la taille, mais la charge, la structure secondaire tout cela influenceront la pénétration des protéines à travers cette membrane. Et vous voulez aussi réduire la pénétration des cytokines parce que ce sont aussi de petites protéines comme des compléments qui peuvent passer. Encore une dizaine, certains d'entre eux sont d'au moins 10 à 50 kDa, puis vous voulez prévenir et bien sûr, vous voulez aussi avoir assez de pores pour le glucose et l'insuline ou quoi que ce soit que ces cellules produisent pour sortir.
Donc, ça devient assez difficile et c'est pourquoi il y a une limite à la durée de ces implants, typiquement quand les patients reçoivent ces implants ces implants survivent pendant 1 ou 2 ans, mais après cela dans une période de 5 à 10 ans, la survie est assez faible et donc vous avez quitté pour obtenir un autre implant. Et donc, cela met davantage de pression sur un plus grand nombre de dons d'organes, ce qui est tout à fait faible à ce stade. Il s'agit donc de choses à prendre en compte lorsque vous concevez-vous vos véhicules pour la livraison de cellules.

(Référez-vous à la diapositive: 11:05)

Donc, maintenant nous allons parler de thérapie génique, qui est à nouveau très similaire à ce que nous venons de discuter, mais un peu tordu à la livraison des cellules.
(Référez-vous à la diapositive: 11:17)

Alors, parlons d'abord de ce qui est des gènes et de ce qu'ils font. Alors, qu'est-ce que vous pensez des gènes? Donc, pour être très simple la définition de base sera, les gènes codent pour les protéines. Donc, tout ce qui est encodé, cette information est dans les gènes à ce point, et les protéines sont synthétisées en fonction de ce qui est des séquences génétiques. Donc, vous pouvez changer la séquence de protéines sur la base de la séquence génétique. Les protéines font la plus grande partie de la biologie et de la

Les travaux chimiques dans notre corps, les gènes ne sont que des unités de stockage qui stockant l'information, de sorte que chaque cellule peut fabriquer de plus en plus de protéines.
Et nous avons environ 40 000 gènes différents dans notre système et ceux qui se combinent pour former environ 1 000 000 protéines différentes ; ainsi, toutes les fines et toutes les bonnes. Donc, ce qui se passe quand un gène est absent et muté ; et nous en avons brièvement discuté dans certaines circonstances de la maladie, mais bien sûr, si un gène est manquant, alors cette protéine ne peut pas être synthétisée par le corps ou si elle mutée, la protéine ne peut pas être
Fonctionnelle.
Alors, disons qu'il y a un gène qui code pour nous dire la lysine, et puis il y a un autre gène qui code pour une autre séquence qui code pour nous dire alanine. Donc, si en quelque sorte le gène a été muté que la séquence du gène de la lysine est maintenant codant pour l'alanine, alors votre protéine éventuelle qui se forme au lieu d'avoir la lysine aura l'alanine et peut-être que cette lysine a été assez importante dans la fonction.
Donc, maintenant les protéines vont perdre leur fonction, elles pourraient même changer la structure à cause de quelques protéines. Donc, cela conduit à des déficiences fonctionnelles, parce que peut-être que cette protéine est impliquée dans une fonction importante nous disons son insuline ; ainsi, peut-être que l'insuline est une protéine si importante que si nous n'en avons pas, il est très difficile pour la personne de survivre et diverses autres maladies.
(Référez-vous à la diapositive: 13:27)

Donc, alors ce que nous pouvons faire, c'est surmonter ça, nous pouvons alors comme nous avons parlé dans les deux classes précédentes, nous pouvons encapsuler des cellules pour faire de la thérapie génique. Et donc les cellules sont génétiquement modifiées pour produire et sécréter des niveaux élevés de ces protéines qui sont absines de cette personne. Donc, dans le cas précédent, nous étions plus en train de parler de diabète et dans ce scénario, le système immunitaire a détruit toute la cellule. Donc, le gène était toujours là, mais cette cellule a complètement été détruite. Donc, il n'est pas produit. Donc, maintenant, tout ce que vous pouvez faire, c'est que vous pouvez maintenant modifier génétiquement ces cellules et ensuite les faire produire de l'insuline qui n'est qu'un exemple.
Donc, ce processus utilise généralement un type de vecteur viral tel qu'une lentivirale ou un rétroviral, et ces vecteurs viraux sont extrêmement efficaces pour délivrer une protéine ou un gène à l'intérieur de la cellule, puis les faire intégrer avec l'ADN et ensuite les faire produire plusieurs copies de cela. Donc, si vous avez un gène muté, vous pouvez prendre vos propres cellules, vous pouvez ensuite les muter à travers ce processus lentiviral ou rétroviral et ensuite les faire parvenir à une transfection stable, c'est une façon.
L'autre façon est que vous avez conçu ces cellules, qu'elles sont encapsulées à l'intérieur d'une microcapsule de polymère et implantées in vivo semblables à celles que nous avons discutées précédemment pour la thérapie des îlots.
Donc, une fois que vous avez ces cellules, vous pouvez les encapsuler et les utiliser pour la livraison dans notre corps, puis ces cellules sécrètent toutes les protéines que vous voulez pendant une période prolongée. Si vous voulez qu'ils soient récupérables, vous pouvez les avoir dans un micro-appareil que vous pourrez ensuite retirer. De cette façon, vous pouvez éviter de livrer de l'ADN plasmidique que nous couvrons dans notre prochain module.
Il est donc beaucoup plus facile à cet égard. Il s'agit donc d'une solution à long terme plutôt que de livrer un ADN plasmidique et, encore une fois, nous revirons à l'ADN plasmidique dans un ou deux
Des classes.

(Référez-vous à l'heure de la diapositive: 15:27)

Et encore une fois, comme dans le cas précédent, il s'agit d'un système très similaire. Donc, encore une fois, c'est le même exemple que c'est probablement le même chiffre. Donc, vous avez un polymère d'alginate et vous avez une solution de chlorure de calcium. Ainsi, l'alginate est un polymère chargé négativement, puis le calcium bien sûr, est un cation divalent. Alors, qu'est-ce qu'il fera? Il formera un lien entre deux chaînes différentes portant des charges négatives et c'est ainsi que ces chaînes formeront un hydrogel et tout ce qui était présent dans le gel d'alginate avant de toucher la solution de chlorure de calcium, sera encapsulé dans ces chaînes.
Donc, encore une fois très doux, vous pouvez utiliser toutes sortes de cellules. Donc, vous pouvez utiliser des myoblastes musculaires, vous pouvez utiliser nous dire si vous déficient du facteur 9 ou du facteur 8 ceci est impliqué dans le mécanisme de coagulation du sang, il provoque une maladie appelée hémophilie dans laquelle s'il y a une petite coupe, les patients vont saigner. Donc, vous pouvez utiliser ce genre de cellules, les livrer et elles sont encapsulées dans une matrice. Alors, entouré et protégé par le système immunitaire, s'ils ne sont pas eux-mêmes.

(Référez-vous à la diapositive: 16:43)

Donc, voici un exemple. Donc, ce sont les microsphères alginate, et comme vous pouvez voir chacune de ces microsphères encapsulant plusieurs cellules à l'intérieur, cette microsphère pourrait être à peu près un millimètre ou dans cette gamme de taille et elle porte plusieurs cellules et vous pouvez obtenir des millions de ces microsphères et, en fonction de la quantité requise pour un patient, vous pouvez mettre ces cellules là que cette barrière l'empêche d'attaquer par le système immunitaire.
(Reportez-vous à l'heure de la diapositive: 17:26)

Voici un exemple de littérature sur le moment où cela a été utilisé. Donc, ils ont d'abord fait une implantation chez une souris immunodéficientes, ce qui signifie que la souris n'a pas de bon système immunitaire et donc voyons ce que vous voyez. Donc, dans ce cas, ils utilisaient le facteur hémophile, qui était absent de cette souris et donc ce que vous voyez est essentiellement deux choses qu'ils manquent, quand est le FIX et une autre est APTT dans une souris hémophile nude, que la souris nude ici signifie que le système immunitaire est éliminé.
Aucun système immunitaire adaptatif, puis hémophile ne signifie fondamentalement qu'ils ne peuvent pas ciller le sang. Donc, cette souris a une blessure ou quelque chose de ce que même si une blessure mineure, ces blessures pourraient être potentiellement mortelles simplement parce qu'un sang ne s'accrochera pas et donc ils vont enlever tout leur sang dans le temps et bien sûr, le manque de sang qu'ils mourront parce qu'ils ne seront pas assez d'oxygène allant au cerveau et au coeur.
Donc, c'était alors qu'ils ont mesuré cet antigène qui est l'antigène hFIX, ce n'est rien, mais est produit par les cellules qu'ils ont implantées. Donc, ceci n'est normalement pas présent dans la souris nude, mais puisque maintenant que vous avez implanté ces cellules, elles sont aussi à part de produire ces facteurs qui sont nécessaires pour inverser l'hémophilie, elles produisent aussi d'autres protéines. Donc, ils mesurent une de ces protéines qui est appelée hFIX et ce qu'ils trouvent, c'est bien sûr, l'unité est dans le temps et cela montre la quantité de protéines ; et donc, ce qu'ils trouvent est après l'implantation ils voient une augmentation de cette quantité d'antigène, ce hFIX qui est présent dans le système de souris.
Cela signifie que les cellules ont en fait greffé et ont survécu jusqu'à 80 jours et que cet antigène particulier est également produit pour que les cellules soient en bonne santé. Maintenant, les cellules implantées font ce qu'elles sont censées faire avec d'autres fonctions et d'autres protéines de survie qu'elles produisent. Donc, c'est super et cela a été fait dans le n de 7. Donc, 7 souris ont été utilisées pour ces sept souris ont été utilisées pour cela et ce sont les cellules qui ont été utilisées, alors l'autre chose qu'ils regardaient était le niveau APTT et qu'est-ce que c'est? Vous pouvez considérer cela comme une référence pour l'activité de coagulation.
Donc, ça montre ces secondes. Donc, combien de temps ça prend pour que le cailleur se forme et donc, vous voyez chez la souris hémophile plus tôt il était rarement élevé, mais une fois que vous avez mis cela vous voyez que le temps de coagulation a diminué. Donc, ça veut dire, qu'il y a maintenant plus de facteurs de coagulation dans le sang de cette souris et qu'ils sont capables de former un cailleur qui signifie que l'hémophilie est quelque peu guéri qu'ils ne saigneront pas complètement ou immédiatement ; et encore une fois la même chose que vous voyez est jusqu'à 80 jours je pense que c'est ce que les auteurs ou 77 jours, c'est ce que les auteurs ont cherché pendant la durée de l'expérience et ils ont continué à voir ces cellules produire ce qui était nécessaire.
Maintenant, bien sûr, c'est une souris immuno déficientes. Donc, vous vous attendez à ce que ces cellules survivent assez facilement, juste parce que la souris immunodéficient n'est pas un système immunitaire adaptatif pour attaquer ces cellules particulières qu'elles n'ont pas de système immunitaire.
(Référez-vous à la diapositive: 21:21)

Alors, que se passe-t-il chez la souris immuno compétente? Donc, la souris immuno compétente est assez une souris saine, c'est un système immunitaire complet est présent, mais il y a encore de l'hémophilie dans cette souris et donc, maintenant, ils font la même chose et ce qu'ils voient, c'est le facteur IX dont je parlais plus tôt. Au début, bien sûr, avant l'implantation, il n'y a pas d'antigène pour ce facteur IX qui est manquant dans cette souris et comme le temps augmente vous voyez que cette implantation a fonctionné et cette quantité de cet antigène particulier qui est maintenant flottant dans la circulation de la souris, mais alors alors que le temps augmente au-delà de sept jours, vous commencez à voir une grosse goutte. Et finalement, au bout de 15-20 jours, vous voyez la suppression complète de cet antigène particulier.
Qu'est-ce que cela signifie? Que le système immunitaire s'attaque à ces cellules et qu'il a fallu un peu de temps pour que le système immunitaire commence à développer une réponse contre lui, mais une fois que vous l'avez vu, même avec les stratégies de micro-encapsulation, nous voyons que ces cellules sont

Mourir. Et c'est parce qu'il y a plusieurs cytokines et des facteurs complémentaires qui ne permettent pas à cette cellule de survivre. Donc, gros problème et la même chose que vous pouvez voir avec le temps de coagulation. Donc, dans un premier temps, il a diminué un peu, un peu de variabilité, mais il a finalement commencé à remonter, dès que ce niveau commence à baisser.
Donc, ça veut dire que cette souris retourne à l'hémophilie, retourne à ce 120 secondes qu'elle était avant l'implantation et c'est évidemment, pas bon et donc, c'est le défi majeur ici. Donc, s'il ne travaille pas dans un système de souris, il est peu probable que cela va fonctionner dans un système humain, et c'est ce que beaucoup de recherche a été en train de faire, même dans une souris immuno compétente, comment faire pour que ça marche mieux.
(Référez-vous à la diapositive: 23:32)

Et puis voici un autre exemple. Donc, maintenant, dans ce test particulier, ils essaient de déterminer s'il y a un anticorps contre cette protéine humaine et ce qu'ils font bien est oui lorsque le temps augmente, le titre d'anticorps contre cette protéine humaine qu'ils ont mis dans une souris a aussi
Augmenté.
Ainsi, même si cette protéine humaine était fonctionnelle quelques jours après le début de l'apparition de l'anticorps, le système immunitaire est à l'origine d'une poursuite et d'une poursuite active du système immunitaire contre ces cellules particulières, ce qui entraîne la mort de ces cellules. Donc, vous pouvez voir comment ces titres d'anticorps augmentent avec le temps. Donc, avant que nous disions jusqu'à 80 jours il y a eu 77 jours il n'y a pas de problème, maintenant nous voyons que même au jour 25 ou 24 ces cellules sont parties.

(Référez-vous à la diapositive: 24:32)

Alors, qu'en est-il s'il ne livre pas de cellule. Donc, maintenant, nous disons que nous livrons ces cellules, c'est ce qui cause toute cette immunogénicité, les cellules produisent plusieurs autres protéines, peut-être que certaines d'entre elles causent la réponse immunitaire à se déclencher à un niveau plus élevé.
Alors, que faire si on fait toujours la thérapie génique, mais enlever la cellule de la photo ou de la cellule de la photo? Donc, ça veut dire que nous avons besoin d'une autre cellule pour que dans ce cas nous utilisions notre propre cellule. Donc, retournons à votre concept autologue ; et si nous utilisons leurs propres cellules d'une manière ou d'une autre génétiquement les modifier génétiquement et de cette façon et quand nous le remettons au moins la cellule entière elle-même n'est pas immuno génétiquement peut-être une protéine est peut-être son non, mais il est beaucoup plus probable que ces cellules autologues survivent beaucoup plus longtemps dans notre système et ne seraient pas aussi immunogènes que les autres.
Donc, encore une fois, ces gènes peuvent remplacer un gène manquant ou défectueux. Donc, si un gène est complètement manquant, nous pouvons essayer d'ajouter une ou deux copies de ces gènes ou s'il est défectueux, nous pouvons essayer de faire la même chose. Nous pouvons réparer un gène non fonctionnel non fonctionnel. Donc, peut-être que ses gènes sont grands. Donc, les gènes peuvent être n'importe où dans les bases de kilo, et s'il n'y a qu'une mutation ponctuelle il y a peut-être une séquence peut-être que nous disons que A a changé en G, ATGC est le code génétique des nucléotides de droite. Il est donc essentiellement composé d'un ou des autres nucléotides à travers son génome.

Alors, disons qu'un G a changé à A et que tout le reste est le même dans ce gène. Alors, pourquoi changer tout? Pourquoi ne pouvons-nous pas réparer ce A de retour à G et de cette façon nous aurons un fonctionnement normal pour cette protéine particulière. Et puis d'autres cas, c'est quand nous produisons la protéine thérapeutique qui aide à traiter la maladie. Donc, faites une de ces deux choses, produisez-vous cette protéine qui vous aidera dans le traitement de la maladie et ils peuvent aussi être utilisés pour vacciner le patient contre une infection, et j'y reviens dans un moment, mais traitez cette information que je viens de vous donner un par un ok.
(Référez-vous à la diapositive: 27:00)

Donc, voici ce dont nous parlons. Alors, disons que voici votre cellule, vous avez votre génome. Donc, ça dit que plusieurs chromosomes sont là, dans l'un des chromosomes, nous avons un gène défectueux ici.
Donc, une chose que vous pouvez faire est que vous pouvez ajouter un gène. Donc, ce gène peut s'intégrer dans le génome à un autre site car il est montré ici ou peut se trouver à l'extérieur du génome, mais dans le noyau séparément. Donc, ce sont deux options dans l'addition ou le remplacement des gènes. Donc, si vous êtes en fait, vous êtes en train de parler. Donc, c'est un chromosome supplémentaire qui signifie que son extérieur du chromosome, mais qu'il conduira encore à la production de protéines. Il s'agit d'une insertion chromosomique, bien sûr, parce qu'elle s'est maintenant intégrée à votre reste du génome. Et puis c'est la réparation de gènes où ce que vous faites nous permet de dire si une partie de votre gène n'est pas fonctionnelle Donc, vous avez un segment incorrect, le reste tout est correct. Vous venez et vous insérez le segment en cours en remplaçant le segment défectueux.

Segment. Donc, c'est la réparation de gènes et cela semble très futuriste, mais c'est en fait assez faisable et nous en parlerons dans un moment aussi.
(Référez-vous à la diapositive: 28:27)

Donc, voici votre bon modèle et vous pouvez le mettre. Mais alors il y a plusieurs obstacles à cela, je veux dire que c'est bon sur la caricature que nous pouvons faire ça, et il y a beaucoup d'enthousiasme à ce sujet, mais ensuite il y a plusieurs obstacles à la façon de faire ça. Alors, parlons d'abord de quelques barrières extracellulaires. Donc, on est l'ADN que vous livrez, s'il se passe dans le plasma qui est bien sûr l'un des principaux fluides du corps, les vaisseaux sanguins.
Si le gène nous laisse dire ici, le plasma contient plusieurs nucléases et ce ne sont rien, mais quelque chose qui dégrade n'importe quelle longue chaîne de nucléotides. Donc, ça se dégradera et une fois que vous aurez dégradé, il n'est plus fonctionnel. Donc, c'est un gros problème quand vous livrez n'importe quel gène, alors le problème est que ces ADN externes peuvent se lever et se débarrasser par ce système réticulo-endothélial qui n'est rien, mais votre système immunitaire, donc RES. Donc, votre rate et vos autres cellules immunitaires peuvent effacer cet ADN. Donc, tout n'est pas sur le site.
Alors le problème est de dire si je veux seulement que la distribution des gènes se produise dans le pancréas, disons que si c'est pour les îlots ou pour quelque chose d'autre, alors il est difficile pour moi d'aller à cet endroit et de cibler seulement cet endroit parce qu'ils iront partout. Ils sont en grande partie inefficaces par la voie orale qui est bien sûr, parce que la plupart d'entre eux ne sont pas en mesure de la rendre à votre circulation, bien qu'elle fonctionne relativement bien pour l'immunisation. Alors, disons, si nous utilisons une autre voie qui est la voie muqueuse. Donc, quelque chose qui vient en contact avec la muqueuse, et puis ces gènes ne se déplacent pas vraiment très bien dans les couches muqueuses. Donc, vous n'avez pas vraiment de bon mouvement de ces gènes dans les
Circonstances.
Donc, ils sont tous extracellulaires, alors qu'ils voyagent par le corps, puis il y a plusieurs barrières intracellulaires. Alors, disons, après tous ces obstacles, certains d'entre eux ont pu atteindre la cellule cible. Donc, une fois qu'il atteint la cellule cible, le premier est comment il va d'abord à l'intérieur de la cellule parce que la membrane cellulaire n'est pas perméable à de grosses molécules aussi bien que l'ADN est également chargé. Les DNAs chargées négativement ont plusieurs phosphates
Groupes.
Donc, vous ne pourrez pas diffuser à travers la membrane cellulaire. Donc, il doit être pris par une méthode d'endocytose dont nous avons discuté précédemment, mais le problème est que ces méthodes d'endocytose finiront par aller vers les endosomes. Donc, si ça va à l'endosome, alors vous devez vous inquiéter de comment vous échapper de ces endosomes qui est un problème. Beaucoup d'entre eux se dégradent dans le lysosome. Finalement, les endosomes se rendent dans les lysosomes et ils contiennent eux-mêmes un environnement très rude et beaucoup de nucléases. Donc, ça ne va pas fonctionner.
Disons si cette chose sort dans le cytoplasme, puis à quel point elle est stable dans le cytoplasme, c'est un autre défi parce que ce n'est pas un environnement où l'ADN était censé être, puis nous disons que si c'est dans le cytoplasme et qu'il a besoin d'aller au noyau, et ensuite comment il voyage vers le noyau parce qu'il est une molécule assez grande, il a une diffusivité assez faible à travers le cytoplasme. Et puis la même question se pose de nouveau que lorsqu'il atteint le noyau qui est également entouré d'une membrane, comment l'ADN passe de l'extérieur du noyau à l'intérieur du noyau.
Donc, une autre barrière est la translocation vers le noyau, je suppose que c'est déjà écrit ici. Alors, comment ça va au noyau? Et enfin, c'est s'il va à la bonne région du noyau, où il peut s'exprimer. Donc, il y a tellement de barrières que cet ADN devra traverser et c'est un bon point où nous nous arrêterons, et nous verrons comment nous pourrons surmonter ces défis dans la prochaine classe.
Je vous remercie.