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Module 1: Polymères biomédicaux et systèmes contrôlés

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Bonjour tout le monde, bienvenue à une autre conférence de notre cours Principes de prestation de médicaments et de génie, juste une récapitulation rapide ou ce que nous avons appris dans la dernière classe. Dans la dernière classe, nous avons parlé de certains mécanismes de dégradation induits par l'hôte, de la façon dont les polymères peuvent se dégrader, de la façon dont le dispositif peut se dégrader dans le corps. Certains d'entre eux ont été médiés par l'ion, ils peuvent être des changements dans le pH, ils peuvent modifier le taux de dégradation, ils peuvent être oxydants les espèces présentes sur le site à cause de diverses raisons et moduler le taux de dégradation.
Nous avons ensuite parlé de certains polymères biodégradables très largement utilisés qui comprennent des polyesters, des polyanhydrides, certains des polyesters sont comme PGA, PLA, PLGA, très largement utilisés, puis des polyanhydrides, nous avons aussi discuté et nous avons également parlé de certains autres polymères très largement utilisés.
Une autre chose dont nous avons discuté est la stérilisation et le stockage. Donc, comment les stocker, vous voulez les stocker dans un environnement qui n'a pas trop d'humidité parce que cela peut provoquer une dégradation hydrolytique ; et la stérilisation à nouveau nous avons parlé du rayonnement gamma, de l'oxyde d'éthylène, en particulier dans les cas où la chaleur ne fonctionne pas. Donc, c'est important quand on se place dans ces systèmes modifiés et innovants.
Et puis à la fin de la conférence, nous avons parlé des médicaments polymériques conjugués, il peut y avoir différents types de conjugués volumétriques, il pourrait s'agir d'un gros squelette de polymère avec un médicament qui lui est attaché ou il pourrait s'agir d'une grosse molécule de médicament avec un polymère attaché au médicament lui-même. Donc, nous allons poursuivre notre discussion sur les polymères conjugaux dans cette classe.
(Heure de la diapositive: 02:05)

Donc, certains des polymères qui sont largement utilisés pour la conjugaison de la drogue, la plupart sont synthétiques et la raison de cela, c'est qu'ils permettent un certain contrôle, beaucoup plus de contrôle sur les propriétés, très contrôlable ; cependant, il y a des exceptions quelques polysaccharides naturels ses dextrans sont aussi très largement utilisés. En général, lorsque vous essayez d'attacher quelque chose, vous voulez toujours qu'il reste soluble et que la plupart du temps, vous essayez d'augmenter la solubilité ou, du moins, de maintenir la solubilité. Ainsi, vous utilisez des polymères hydrophiles hydrophiles solubles dans l'eau et ceux qui ont une circulation beaucoup plus élevée dans le corps nous permettent de dire un polymère hydrophobe.
Donc, et ils sont très biocompatibles et ils contiennent une sorte de groupe fonctionnel réactif à travers lequel vous les attachez à votre molécule de médicament. Ainsi, certains des polymères les plus couramment utilisés sont le polythène glycol de loin est un polymère très largement utilisé et certains de ses dérivés d'autres polymères tels que le HPMA. Les dextrans que je viens d'évoquer comme un polymère naturel, vous avez des poly amino acides comme vos protéines et vous pouvez aussi avoir des stimuli de polymères sensibles, donc tous ces polymères sont très largement utilisés. Le PEG, bien sûr, est de loin le polymère le plus abondant pour cette application particulière.
(Référez-vous à la diapositive: 03:28)

Et donc, comment feriez-vous les combiner à nouveau, c'est beaucoup et beaucoup de réactions biochimiques sont là pour combiner votre matériel à votre biomolécule. Vous pouvez avoir une sorte de photoconjugaison qui signifie essentiellement qu'en présence de lumière vous avez des portions qui vont s'attacher à votre molécule de drogue et que certaines d'entre elles sont l'acrylate et une certaine chimie du thiol ène. Un autre qui est très largement utilisé utilise une sorte de formation d'hydrozone ou d'oxime.
Donc, vous utilisez ce genre de chimie, puis il y a la conjugaison chimique. Donc, il peut y avoir une réaction de thiol réactive ou d'amine, celle-ci est à nouveau la plus utilisée, typiquement, le NHS d'EDC est le couplage, ou dans certains exemples, certains dans la conjugaison enzymatique sont aussi utilisés là où une enzyme médiera ce genre et genre de liaison de votre médicament particulier à votre molécule de polymère.

(Référez-vous à la diapositive: 04:28)

Donc, il suffit d'entrer dans beaucoup plus de détails sur une partie de l'usage courant ; ainsi, l'un des plus courants est le couplage ECD et ce qu'il est essentiellement, sa réaction en deux étapes.
Donc, dans la première étape, vous avez votre molécule qui pourrait être un médicament ou une molécule polymérique qui contient un carboxyle et vous venez avec un réactif appelé EDC à un certain pH acide doux et, en gros, il forme un produit qui est hautement réactif.
Maintenant, ce produit peut aller et faire une autre sorte de réactions de recombinaison et peut revenir à ce qui est son état original. Donc, vous devez être prudent en termes de temps ainsi que les conditions auxquelles vous faites cette réaction. Donc, une fois que vous avez ceci, vous allez à l'étape suivante et vous avez essentiellement ce produit, puis réagira avec votre amine pour former la conjugaison que vous voulez.
Elle pourrait à nouveau être hydrolytiquement purifable et retourner à son état d'origine. Donc, vous devez être prudent quant à ce que vous faites, mais pour l'essentiel vous voulez que cela aille dans cette direction et il y a un autre catalyseur qui est utilisé qui est NHS et qui aide dans cette réaction qui se déroule dans cette direction pour votre couplage réussi.

(Référez-vous à la diapositive: 05:56)

Ensuite, une autre est de réagir à l'aldéhyde avec les amines. Donc, dans ce cas vous avez un groupe aldéhyde qui est une liaison COH et votre groupe amine ceci pourrait être sur votre molécule de drogue, la plupart de vos molécules de médicaments, au moins les molécules de médicaments à base de protéines contiennent toutes des amines et ensuite vous pouvez avoir en présence de certains catalyseurs, vous pouvez avoir différents types de réactions qui ont lieu.
Donc, et ensuite vous pouvez le faire avec deux types différents de polymères, vous pouvez le faire avec deux types différents de catalyseurs, vous pouvez le faire avec NaBH4 qui est le borohydrure de sodium ou vous pouvez le faire avec le cyanoborohydrure de sodium qui est légèrement mieux juste parce que vous n'avez pas des réactions secondaires qui se produisent avec le borohydrure de sodium. C'est pourquoi le cyanoborohydrure est mieux dans certains cas.

(Référez-vous à la diapositive: 06:47)

Ensuite, vous avez des thiols et Michael, il s'agit de chimisseries, très largement utilisées, donc, ce qui est ici, c'est qu'ils utilisent des thiols à la place des amines. Donc, les protéines ont beaucoup plus d'amines, puis elles ont des thiols et les thiols peuvent être beaucoup plus spécifiques au site parce que si vous avez une protéine plus grande et si vous faites une réaction avec l'amine, il y a de fortes chances que sa réaction va réagir à de nombreux endroits, y compris le site qui sont des sites actifs.
Donc, il peut bloquer votre site actif ; cependant, si vous utilisez le thiol, il y a des chances que vous sachiez si les thiols sont ou non présents sur le site actif ou non. Donc, ces réactions sont beaucoup plus spécifiques et beaucoup plus efficaces à cet égard.
Mais en général les thiols sont généralement utilisés sur le site actif, vous devez donc être très prudent dans le choix de ce site. Donc, vous devez être sûr que le thiol que vous utilisez pour votre conjugaison chimique n'est pas utilisé comme molécule active de site.
Et puis bien sûr, il a des taux de réactivité différents, donc ce maléimide de thiol est une réaction plus rapide que les thiols méthacrylates. Donc, ce sont des choses que vous devez prendre en compte lorsque vous faites ces réactions.

(Référez-vous à la diapositive: 08:04)

Alors, parlons de l'utilisation des groupes fonctionnels sur les petites molécules. Ainsi, en général, les petites molécules, la conjugaison normale est réalisée à l'aide d'un résidu nucléophile. Donc, ils ont de l'hydroxyle, de l'amine, du carboxyle, une fois de plus, ils sont largement présents sur la plupart des molécules et nous devons nous assurer qu'ils ne sont pas impliqués dans l'activité du médicament lui-même. Étant donné qu'ils sont de petites molécules, ils n'ont pas beaucoup de groupes fonctionnels, mais il y a de fortes chances que certains d'entre eux soient impliqués. Donc, dans ce cas, vous ne pouvez pas vraiment utiliser cette stratégie particulière.
(Référez-vous à la diapositive: 08:39)

Et puis l'autre, c'est que vous avez des protéines et des peptides, ceux qui ont beaucoup et beaucoup de groupes fonctionnels simplement parce que nous avons environ 9 des acides aminés, il pourrait être dérivé et donc vous pouvez effectuer des conjugués chimiques sur eux. Et il ya aussi un amino terminal et un groupe carboxyle qui est disponible que vous pouvez utiliser et selon le pH que vous utilisez certains de ces acides aminés terminaux peuvent être différents de ceux qui sont internes dans le squelette protéique et ainsi de cette façon vous pouvez personnaliser sur quel site vous obtenez cette réaction. Donc, certains d'entre eux sont de nouveau des sulfhydryls, des amines, des carboxyles et des hydroxyles qui sont largement présents sur vos molécules protéiques ou peptidiques.
(Heure de la diapositive: 09:25)

Alors, parlons spécifiquement des groupes fonctionnels, donc quand on dit que les amines sont présentes sur la lysine, l'arginine et qu'il y a une extrémité 5, ainsi que l'histidine, c'est très largement utilisé, près de 10% de tous les acides aminés dans les protéines sont lysine et très peu sont impliqués dans le site actif. Donc, c'est une molécule sûre à attacher sans s'inquiéter du type de site actif bloqué par votre polymère.
Une fois de plus, les sulfhydryles ont discuté, contiennent de la cystéine qui est un groupe thiol et le groupe thiol est très réactif, le problème n'est pas toutes les protéines qui contiennent de la cystéine et ces cystéine sont aussi typiquement impliquées dans la dimérisation et la trimérisation qui est liée à l'activité de la protéine. Donc, vous devez être prudent lorsque vous réagirez avec ce que vous ne faites pas vraiment que l'activité baisse d'une grande quantité.

Ensuite nous avons des acides aminés, c'est l'acide aspartique et les acides glutamiques, ils ont aussi le carboxyl présent sur eux aussi bien que ceci et le c terminal thiol sur la protéine aura aussi un carboxyle libre. Donc, vous pouvez les utiliser, mais en général vous ne les utilisez que si la modification de la lysine est une sorte d'avoir des problèmes parce que peut-être qu'elle cause la diminution de l'activité de la protéine, alors vous pouvez aller au carboxyls.
Donc, parce que le problème est que nous savons que la plupart des protéines vont contenir votre amine et votre carboxyls. Donc, nous utilisons le carboxyle comme l'une des choses qu'il est très facile de crolier la protéine.
Ainsi, vous aurez une molécule de protéine qui relie le COOH à une molécule de protéine qui se lie à une autre amine. Cela ne se produit généralement pas si vous effectuez une réaction d'EDC avec des amines seulement sur les protéines parce que dans l'autre cas, vous pouvez avoir vos molécules de protéines avec des amines et votre molécule de polymère avec le carboxyle qui ne contient pas d'amine.
Donc, vous devez d'abord activer la molécule de polymère et ensuite réagir avec l'amine, de sorte que le carboxyle sur la protéine n'est pas impliqué dans la réaction. Donc, c'est pourquoi il est important de choisir les premières amines si vous utilisez le couplage NHS d'EDC et seulement ensuite aller au carboxyle si ce n'est pas vraiment faisable.
Et bien sûr, il y a des portions de sucre sur les protéines, les glycoprotéines et il y a toujours une sorte de modification post-traductionnelle de ces protéines. Ainsi, ils portent des hydroxyles, des amines et des aldéhydes qui peuvent ensuite être utilisés pour les conjugués et généralement une cible sûre, dans la plupart des protéines, vous découvrirez qu'ils ne sont pas impliqués dans le site actif.

(Heure de la diapositive: 12:02)

Groupe réactif dans les polymères bien sûr, nous sommes en train de concevoir les polymères que nous choisissons les polymères c'est tout un tas d'une bibliothèque de choisir parmi tous ces polymères que nous avons qu'ils ont des groupes fonctionnels différents et que vous pouvez les deriveriser davantage si besoin est. Les groupes actifs primaires sont à nouveau les mêmes hydroxyles, les amines, les carboxyls, à moins qu'ils ne soient déjà présents, vous pouvez les dériser davantage.
Et puis typiquement les trois stratégies distinctes sont utilisées, donc vous pouvez soit réagir le médicament avec les groupes fonctionnels qui sont présents dans la chaîne de polymère, vous pouvez d'abord réagir le polymère pour former un intermédiaire qui ensuite vous utilisez pour mettre la réaction du médicament ou vous pouvez réagir le médicament avec un intermédiaire en premier et ensuite le fixer à votre polymère. Donc, j'espère que c'est clair, donc essentiellement ce dont nous parlons ici, c'est que vous avez une molécule de drogue D qui va directement et se lie à P, donc c'est le premier cas.
Dans le second cas, vous pouvez avoir un polymère P qui se lie ensuite à un intermédiaire I, qui se lie ensuite à la molécule de drogue D et ceci pourrait être dû à plusieurs raisons peut-être que nous voulons que ceci soit très spécifique ou une certaine distance du polymère ou que le médicament ne puisse pas interagir directement avec le polymère, les groupes latéraux ne sont pas compatibles, donc vous utilisez un intermédiaire. Ou l'autre cas pourrait être que vous prenez ce médicament que vous avez réagi avec l'intermédiaire et puis vous avez réagi avec le polymère, cas similaire ici, mais la séquence est différente.

(Référez-vous à la diapositive: 13:41)

Donc, quelques exemples de prédérivation, donc ici vous avez une grosse molécule de sucre ici vous le déduisez d'abord à l'aide d'un anhydride succinique parce que vous avez maintenant ajouté un groupe succinique sur ce polymère et ensuite vous l'utilisez pour ensuite attacher votre molécule de médicament pour venir ici.
(Heure de la diapositive: 14:05)

Et puis il y a aussi d'autres stratégies de conception, dans ce cas vous pouvez avoir comme je l'ai dit, vous pouvez avoir de la drogue pendante sur la surface du polymère vous ne pouvez qu'une molécule de médicament pour un polymère ou vous pouvez avoir une molécule de médicament pour plusieurs polymères. Donc, tout cela possible, voici un autre exemple de ce qui a été le cas en l'espèce.
(Heure de la diapositive: 14:31)

Alors, parlons de PEG qui est à nouveau, comme je l'ai dit, l'un des polymères les plus utilisés pour les conjugués de polymères médicamenteux. Donc, c'est la structure simple du PEG c'est un groupe éther. Donc, il est très hydrophile et il est montré qu'il est très compatible avec le corps, l'épine dorsale du polymère est également très flexible. Donc, c'est juste dans le liquide qu'il continue à se déplacer, donc ça en fait essentiellement une sorte de wiper moléculaire.
Donc, si j'ai une surface sur laquelle le PEG est attaché, vous nous laissez dire une protéine est en train de venir parce que ça agit comme un wiper, tout cet espace est en quelque sorte empêché par la molécule de PEG, de sorte qu'aucune des autres molécules ne puisse entrer dans l'espace parce que c'est une sorte de les tirer.
Un autre avantage est en fait soluble dans les solvants aqueux et organiques, ce qui est très utile. Donc, vous pouvez le mettre à la fois sur des médicaments hydrophiles et hydrophobes, ainsi qu'il y a beaucoup plus de chemisseries qui sont maintenant disponibles parce que certaines chimies ne sont spécifiques qu'à un solvant aqueux, d'autres ne sont spécifiques qu'à organique.
Donc, vous pouvez faire toutes sortes de chimies, donc c'est un autre avantage ici. Et bien sûr, sa non-toxicité non immunogène très importante peut être produite et il existe de bonnes pratiques de fabrication et elle est approuvée par la FDA.

(Référez-vous à l'heure de la diapositive: 15:59)

Une autre variation du PEG est un PEG ramifié, donc au lieu d'avoir une seule chaîne de PEG comme celle-ci, vous pouvez avoir un PEG qui est essentiellement comme ça. Donc, maintenant que l'effet du pare-brise est beaucoup plus efficace parce que maintenant il va passer de deux chaînes différentes dans une seule conjugaison, donc son lot plus efficace dans ce cas. Donc, vous pouvez avoir, dans ce cas il s'agit d'une chaîne de 2 PEG, vous pouvez avoir plusieurs chaînes arrière tout cela est faisable et donc typiquement on trouve dans la littérature que ce PEG ramifié est beaucoup plus efficace que la seule chaîne de PEG en termes de médicaments polymériques conjugués.
(Heure de la diapositive: 16:37)

Donc, voici un exemple de ce qui nous permet de dire que vous avez une grosse molécule, une molécule de protéine que vous avez maintenant conjuguée à un PEG à chaîne unique ou à une chaîne de PEG simplement parce que la ramification est beaucoup plus couverte, elle ne permettra pas aux molécules de se passer entre la chaîne de polymère même si elle est faiblement distribuée. Donc, c'est pourquoi il devient beaucoup plus parapluie comme une structure qui est plus efficace en termes de blindage de votre molécule de drogue.
(Heure de la diapositive: 17:09)

Donc, encore une fois une partie de la chimie qui est utilisée, il y a des tourbières réactives thiols sont là, toutes sortes de molécules de PEG, toutes sortes de dérivatisation, c'est un maléimide, donc il y a un aldéhyde, il y a un acrylate de toutes sortes de choses sont utilisées. Donc, tous ces produits sont maintenant disponibles dans le commerce, vous pouvez les acheter de l'étagère à une entreprise et l'utiliser ensuite pour votre molécule de médicament.

(Reportez-vous à l'heure de la diapositive: 17:34)

Donc, il y a un autre exemple ici est un hydrozide de PEG, ceci réagit avec le groupe carboxyle sur le médicament. Donc, essentiellement quelque chose de très similaire à la réaction d'EDC, le PEG a la moyenne de votre médicament peut contenir le groupe carboxyle et il finira par former une liaison avec cela et vous pouvez avoir un isocianate de PEG qui est utilisé pour l'action avec des hydroxyles et des amines. Donc, toutes sortes de chimies sont disponibles, en fonction du médicament et de l'application que vous recherchez.
(Référez-vous à l'heure de la diapositive: 18:03)

Donc, comme je l'ai dit avant que vous empêchez un site actif de ne pas être fondamentalement endommagé par cette réaction. Donc, ce que vous pouvez faire c'est que vous pouvez préfixer votre ligand sur le site actif. Donc, ce que ça veut dire, ça l'immobilisera sur une surface et ensuite si vous faites la réaction à la surface, donc ce qui veut dire est maintenant cette surface n'est pas accessible à vos chaînes de polymères.
Donc, cette surface est maintenant protégée, donc lorsque vous relâchez le ligand à partir de l'enzyme, vous vous assurez que le site actif est toujours disponible et qu'il n'est pas en train d'obtenir une gêne stérique par aucun de ces polymères. Donc, ce n'est qu'une stratégie, il peut y avoir plusieurs des stratégies que vous pouvez utiliser pour empêcher que le site actif ne soit pas en mesure d'y accéder est une cible originale.
(Référez-vous à la diapositive: 18:52)

Vous pouvez relier plusieurs molécules, donc il y a des PEG disponibles qui sont bifonctionnels ou trifonctionnels, donc ce que vous pouvez faire est, vous pouvez relier une sorte de molécule d'un côté à travers une chimie puis un autre ensemble de molécules sur un autre côté. Donc, vous pouvez avoir une structure telle que le PEG, le médicament 1 et le médicament 2 et ces liens sont aussi différents, donc ils auront un taux de dégradation différent, ils peuvent être les mêmes aussi. Donc, de cette façon vous pouvez obtenir beaucoup plus de contrôle maintenant avec un seul système vous pouvez obtenir deux médicaments libérés à des taux différents.

(Référez-vous à la diapositive: 19:28)

Donc, voici quelques exemples, alors disons que taxol qui est l'un des médicaments chimiothérapeutiques très largement utilisés ; cependant, le taxol est assez hydrophobe, donc la solubilité sans aucune molécule de PEG est presque 0. Cependant, vous mettez un PEG de 5000 Dalton sur lui, la solubilité est augmentée de façon assez spectaculaire à 660 mg par ml et au fur et à mesure que vous augmentez la solubilité commence à diminuer. Donc, encore une fois, mais tous ces produits sont encore solubles à ces concentrations, donc maintenant le médicament qui était tout d'abord pas vraiment faisable à utiliser est maintenant peut être utilisé pour cette application.
La clairance rénale est modifiée, donc si vous avez ; si vous n'avez que le nous disons une molécule de drogue appelée SOD, la superoxyde dismutase, la demi-vie dans le corps est seulement 0.08 l'unité n'est pas listée ici, mais elle doit être des heures. Mais vous pouvez attacher différents PEG de différentes longueurs, alors plus le PEG que vous fixez est grand et le plus haut est la demi-vie.
Donc, au lieu d'être libéré dans environ 0,8 heures, il a été éliminé en 36 heures. Donc, bien sûr, au lieu de faire un graphique dans le corps comme celui-ci, vous obtenez essentiellement des concentrations comme ceci est bien sûr, toujours mieux.

(Référez-vous à la diapositive: 20:55)

Ici, une plus grande pharmacocinétique pour différents médicaments, comme je l'ai dit avant de pouvoir augmenter significativement la demi-vie selon le PEG que vous utilisez et de cette façon vous aurez beaucoup plus de libération de contrôle et de location soutenue dans le corps.
(Référez-vous à la diapositive: 21:14)

Quelques-uns des propriétés des médicaments PEGylés, ils ont aussi une immunogénicité plus faible.
Alors, disons que si j'ai une protéine native dans cette affaire uricase et que nous disons quels sont les anticorps que je prends, IgG ou IgM je dis que ce sont des anticorps à 100%. Une fois I

Un polymère conjugué linéaire ou ramifié, je vois une diminution spectaculaire de l'anticorps est présent pour cette protéine particulière.
Donc, non seulement j'augmente le temps de circulation, ce que je fais aussi c'est de diminuer la quantité d'anticorps que le corps produit. Donc, la réponse immunitaire est abaissées, le patient est beaucoup plus heureux, la moitié de la vie augmente beaucoup dans le sang.
(Référez-vous à la diapositive: 21:59)

Prenons un exemple concret. Donc, si nous avons interféron alpha, c'est un médicament qui est une cytokine très puissante et c'est juste une activité antivirale et anti-tumorale. Cependant, lorsque le médicament est injecté dans le corps, sa demi-vie n'est que de 4 à 8 heures, une fois que vous l'avez donné en position terminale ou sous-cutanée.
Donc, vraiment après 24 heures de l'injection, vous n'avez pas vraiment détecté du tout dans le sang et cela signifie fondamentalement que le patient doit prendre toutes les 12 à 24 heures pour qu'il ait des avantages thérapeutiques et le traitement est très long. Je veux dire que cela peut durer plusieurs mois ou plus de quelques années. Donc, évidemment, les patients ne sont pas contents, la conformité est très faible la qualité de la vie est très faible. Donc, quelque chose qui se fait ici est la PEGylation.

(Référez-vous à la diapositive: 22:51)

Donc, ce que les gens ont fait c'est qu'ils ont PEGylé cet IFN alpha, voici la chimie qu'ils ont utilisée. Donc, dans ce cas, ils ont utilisé la chimie du NHS, ils ont un di-PEG et ou essentiellement un PEG bi-fonctionnel.
(Référez-vous à la diapositive: 23:06)

Et puis ils font ça et maintenant c'est vérifier si le PEG est attaché ou non. Donc, ce que vous avez est un gel SDS PAGE, qui est essentiellement des taches pour les protéines et ainsi nous concentrer sur ce graphique en premier et donc cette voie est une voie de marqueur essentiellement avec un

Poids moléculaire différent pour montrer quel poids moléculaire vos bandes mentez. Et cette voie particulière 4, est essentiellement la voie qui contient des protéines libres.
Donc, une protéine libre coute quelque part autour de 15 kg Daltons, ce qui est ce que l'on attend de vous dans la voie 2 ce que vous avez fait c'est que vous avez réagi avec le PEG. Donc, maintenant, vous voyez que la protéine apparaît dans les lots et beaucoup de lieux différents une protéine est ici, une protéine est ici, une autre bande est ici, une autre bande est ici. Donc, ça veut dire que beaucoup de choses ont réagi et ont augmenté ce poids moléculaire et ensuite vous pouvez l'purifier davantage en fonction de la taille et maintenant vous obtenez une très belle grande bande unique de la protéine.
Donc, maintenant vous avez augmenté le poids moléculaire de Dalton de 15 kg à environ 97 kg Dalton et ceci n'est qu'une tache d'iode qui se tache pour le PEG. Donc, maintenant, dans ce cas seulement le PEG se montre et non la protéine comme on pouvait s'y attendre, ces bandes correspondent aux mêmes protéines ici.
(Référez-vous à la diapositive: 24:23)

Donc, et maintenant quand vous l'injecte dans le corps, vous voyez que la demi-vie est significativement différente. Donc, maintenant, vous avez une demi-vie de 51 heures, c'est-à-dire, maintenant le patient devra seulement prendre l'injection après 3 jours, au lieu de prendre tous les jours. Et puis, bien sûr, le temps de séjour dans le plasma est de 80 heures par rapport à 1,6 heure plus tôt.
Donc, si vous regardez ici de près, c'est la drogue libre qui a été injectée la plus grande partie est éliminée au moins dans ce graphique en 10 heures alors que, c'est le médicament PEGylé qui a été injecté et vous trouvez que même après 48 heures, il est encore assez élevé dans le corps. Et remarquant comment ils commencent tous les deux à partir des différents points d'ici et ensuite pour la traînée libre, elle descend en fait alors que, pour le médicament PEGylé, ça va, peut-on deviner pourquoi c'est le cas? Ceci est injecté par voie sous-cutanée chez le rat, je vous donnerai un moment pour y réfléchir.
Donc, la réponse à cela est que lorsque vous injecte par voie sous-cutanée, le médicament libre est très petit et qu'il diffuse très rapidement dans la circulation et parce que son si petit il est éliminé très rapidement. Donc, vous voyez un profil comme celui-ci alors que, quand vous avez un médicament PEGylé, il faut du temps pour aller dans la circulation.
Donc, les premières heures qui ont fait monter la concentration dans la circulation et parce qu'elle ne s'est pas dégagée très rapidement, cette concentration est en fait en augmentation.
Ce n'est que lorsqu'à un moment donné que la concentration maximale est atteinte par la diffusion dans le sang, alors qu'elle commence à diminuer et qu'au fil du temps, elle va diminuer. Donc, c'est devenu une libération prolongée. Donc, nous avons déjà parlé de la raison pour laquelle il y a une autre activité de départ.
(Référez-vous à la diapositive: 26:21)

Donc, certains des conjugués de polymères protéiques sur le marché, ils sont déjà utilisés chez les humains ce PEG ifn-alpha dont nous venons de parler, mais il y en a plusieurs autres qui sont utilisés pour différentes applications. Donc, tous ces produits sont sur le marché ou dans certains essais cliniques, phase I, phase II. Donc, ça a été une très grande

Stratégie réussie. Donc, nous nous arrêterons ici, merci pour votre attention, nous parlerons plus avant d'autres systèmes de distribution de médicaments dans le prochain cours, dans la prochaine classe.
Je vous remercie.