Fonctionnement des instruments de laboratoire

Dans la conférence d'aujourd'hui, nous allons discuter des différents types de centrifugeuses.
Donc, quand vous allez dans le laboratoire, vous allez observer les différents types de centrifugeuses comme vous avez le microfuge, vous avez la centrifugeuse comme qui va prendre les plus gros volumes.
Ensuite, vous avez la centrifugeuse à haute vitesse et c'est ce qu'on appelle l'ultra-centrifuge qui peut aller jusqu'à la vitesse de 1 lakhs G ou vous pouvez avoir la centrifugeuse à froid ou la centrifuge de culture cellulaire.

C'est le rotor que vous utilisez dans une centrifugeuse typique. Donc, toutes ces centrifugeuses fonctionnent sur un principe de base selon lequel vous faites tourner l'objet en gardant le matériau dans un rotor et c'est ainsi qu'il sépare un matériau par le processus de sédimentations.

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Donc, vous pouvez imaginer que la sédimentation n'est rien d'autre que le décantation du matériau. Donc, si je suppose prendre la petite boue dans une eau et la mélanger et ensuite lui permettre de s'installer dans la boue s'installera et l'eau va être dégagée. Donc, ce processus de sédimentation de la particule supérieure dans le liquide s'appelle la sédimentation. Donc, cette séparation par sédimentation pourrait être faite naturellement avec la gravité de la terre.

Donc, c'est parce que la gravité de la terre est que vous savez tirer toutes les particules en bas et que ce processus va être très lent si vous lui permettez qu'il soit fait à lui seul. Mais ce qui s'est passé, c'est que lorsque vous faites la centrifugation, vous faites le même processus beaucoup plus rapidement. Comment vous le rendre beaucoup plus rapide parce que, comme vous pouvez le voir, c'est la centrifugeuse en fait où il s'agit de l'excel de centrifugeuse et ensuite vous filez les objets.

Donc, c'est supposer que votre objet et que vous le filez, alors ce qui se passe c'est que l'objet va faire l'expérience de 2 forces. Il va faire l'expérience d'une force centrifuge qui se dirige vers l'extérieur de l'axe, puis vous pouvez avoir la force centrifuge qui se dirige vers l'axe et si vous l'utilisez dans cette vitesse particulière de la vitesse. Donc, à cause de la force centrifuge, l'objet s'enfuira de cet axe.

Et parce que vous maintenons cet objet dans un test que vous connaissez dans un tube comme. Donc, vous pouvez imaginer que si je garde un matériau comme celui-ci dans un objet et ceci est connecté à l'axe. Ensuite, à cause de la force centrifuge, l'objet se dirige vers l'extérieur de l'axe central.
(Référez-vous à la diapositive: 03:59)

Et dans ce processus, ce qui va se passer, c'est que lorsque nous nous dirigeons vers l'extérieur de l'axe, il va effectivement faire l'expérience de la force centrifuge sur ce côté. Alors qu'il va faire l'expérience des forces de friction du côté opposé ainsi que des forces au-delà. Par delà les forces, on entend les forces qui dépendent de la densité de ce liquide dans lequel le matériau est suspendu.

Et là où cet objet va s'arrêter, cet objet va s'arrêter là où ces 2 forces sont toutes ces forces qui vont être égalisées, ce qui signifie si vous allez voir la sédimentation de cette particule.
Si la force centrifuge va être plus grande que le F2 + F3, alors dans ce cas, ces forces ne vont pas arrêter ce mouvement de cet objet et, finalement, il va être cousu, vous pouvez imaginer que vous avez un tube comme celui-ci.

Donc, en fin de compte, il va atteindre le fond du tube et il va être pelleté, alors que dans le gradient de densité centrifuge le gradient de densité signifie que vous utilisez effectivement le matériau dans un liquide à haute densité. Donc, à cause de cela, vos forces de flottabilité ainsi que les forces de friction vont monter. Et parce que le matériau n'atteindra pas le fond du tube, il va plutôt être localisé à un endroit où la F1 va être égalisé sur le F2 + F3.

Donc, c'est l'endroit où il va être localisé, ce qui signifie que si je suis en train de courir dans un tube et que c'est en fait le fluide du gradient de densité, il va en fait s'arrêter là où les forces de flottabilité plus les forces de friction vont être égalisées par les forces centrifuges. Ainsi, la rotation d'un rotor autour d'un axe central génère une force centrifuge sur la particule dans la suspension et la densité de l'échantillon et de la solution.

Donc, quelles sont les forces qui vont influencer la centrifugation, le premier facteur est la densité de l'échantillon aussi bien que les solutions. Puis vous avez la température ou la viscosité, la distance de la particule déplacée et aussi bien que la vitesse de rotation. À une force centrifuge fixe et à la viscosité du liquide, le taux de sédimentation d'une particule est proportionnel à sa taille, ce qui signifie que si vous envisagez la flottabilité identique et que la force centrifuge est en train de pelleter cette matière particulière.

Et le taux de sédimentation va être proportionnel à la taille de cette particule particulière et à la différence entre la densité des particules et la densité des solutions. Donc, la sédimentation d'un matériau va dépendre de la taille de la particule, de la densité de la particule ainsi que de la densité de ces solutions particulières.
(Référez-vous à la diapositive: 06:58)

Lorsque vous exécutez la centrifugeuse ou lorsque vous effectuez les centrifugations, vous devez prendre en compte de nombreux aspects comme vous devez équilibrer les échantillons. D'une manière pratique, vous ne pouvez pas équilibrer un échantillon comme vous le savez très précisément parce que c'est très, très long. Donc, il y a une règle que si vous faites une centrifugation jusqu'au 5000g, vous pouvez équilibrer simplement en versant la quantité égale du liquide dans les autres tubes de centrifuge.

Donc, ça devrait être assez bien pour équilibrer les 2 tubes, mais si vous faites la centrifugation qui est au-delà de 12000g. Vous devez équilibrer un échantillon avec un équilibre de pesage dans la plage de milligrammes, ce qui signifie, s'il y a une plage s'il y a une différence de 10 à 50 mg entre l'équilibre et l'échantillon. Elle ne posera aucun problème à la centrifugeuse.

Mais si vous faites une ultra-vitesse ou que vous faites une centrifugation à une vitesse très, très élevée.
Comme 35 000 rpms ou plus de 1 lakhs, alors l'équilibrage devrait être très, très précis, ce qui signifie que même si de 10 à 50 milligrammes de différences vont créer des problèmes si vous faites la centrifugation à une vitesse très, très élevée. Et comment l'équilibre est important parce que lorsque vous ne faites pas l'équilibre, ce qui se passe est à un axe central vous avez 2 échantillons, l'un est échantillon, l'autre est votre solde.

Donc, si la force centrifuge est différente ou si le mouvement de ces molécules va être différent, alors ce qui se passera, c'est qu'il y aura une vibration de l'axe central. Donc, l'axe central va vraiment vibrer et quand il va vibrer, il va vraiment vibrer, il va en fait traduire cette vibration dans le rotor aussi. Et à cause de ça, ça va créer des problèmes dans vos centrifugeuses ou ça va endommager votre centrifugeuse.

Parce que si cette vibration sera trop élevée, elle va vraiment briser l'axe central et c'est ainsi qu'elle va endommager la centrifugeuse. Si vous utilisez la centrifugeuse à très basse température comme 4 degrés, après la centrifugation, il y aura condensation de l'eau. Donc, si vous faites la centrifugation à une vitesse très basse parce que votre échantillon est sensible à la température.

Rappelez-vous que lorsque vous faites une centrifugation, vous allez augmenter la température de cette chambre en particulier. Parce que lorsque vous filez un rotor, le rotor va tourner l'air autour de lui aussi et parce que l'air va provoquer la friction, la friction va en fait augmenter la température de ce rotor particulier. C'est pourquoi il est important de faire fonctionner la centrifugeuse à une très, très basse température.

Donc, si vous exécutez la centrifugeuse à basse température et ensuite vous, alors la glace va se former à l'intérieur de la tasse ok. Et si vous le laissez, c'est en fait de provoquer la condensation de l'eau et éventuellement il y aura une eau qui sera formée à l'intérieur de cette tasse et que l'eau va en fait endommager les capteurs, ce qui a été placé juste en dessous du rotor. Donc, juste en dessous du rotor, il y a un capteur, dans une centrifugeuse sophistiquée, vous avez les capteurs qui sont placés pour surveiller la vitesse de ces rotors particuliers.

Et si vous autorisez la condensation de l'eau ou le remplissage de l'eau qui va vraiment corroder les capteurs ainsi que le juste au-dessous du capteur, vous allez avoir les circuits électroniques et ça va aussi être des dégâts. C'est pourquoi il est recommandé d'essuyer la tasse à centrifuger avec un chiffon sec. Et vous devez garder le couvercle ouvert, de sorte que toute la vapeur s'évapore dès que vous le faites avec la centrifugation à 4 degrés.

Et il n'y a personne dans le labo qui va utiliser cette centrifugeuse, puis vous ouvrez le couvercle, gardez la centrifugeuse ouverte et ensuite vous essuyez la tasse, la tasse de centrifugeuse où vous avez en fait le rotor logé. Et vous le laissez ouvert pour que toute l'eau qui est condensée même après que votre essuyage s'évapore.
(Référez-vous à la diapositive: 11:22)

Ensuite nous avons les réfrigérateurs et les congélateurs profonds avec vous savez que les réfrigérateurs et les réfrigérateurs sont en fait connectés aux compresseurs. Et ces compresseurs exécutent les machines pour qu'il y ait une température. Donc, vous pouvez avoir les congélateurs profonds comme-20 et-80 ou vous pouvez avoir les réfrigérateurs normaux. L'entretien du réfrigérateur sera le même que celui que vous ferez à la maison.

Sauf qu'ici, la fréquence d'ouverture et de fermeture de ces réfrigérateurs est très élevée par rapport à votre maison. Donc, et parce que tant de fois vous allez ouvrir le frigo, il y aura une condensation de l'eau parce que le frigo est froid, mais à l'extérieur, l'air est chaud. Donc, dès que vous ouvrez cet air chaud va à l'intérieur du réfrigérateur et qu'il contient en fait une certaine humidité.

Donc, que l'humidité se condense à l'intérieur du réfrigérateur et finalement ce qui va se passer, c'est en fait commencer à construire la glace à l'intérieur et qu'en fait est en train de compromettre ou qu'il va en fait donner la charge supplémentaire sur les compresseurs. Et donc si vous voulez garder la vie de votre frigo pendant très, très longtemps parce que ces réfrigérateurs sont nécessaires pour maintenir votre pour garder le magasin que vous connaissez des produits chimiques périssables et tout ce que vous devriez nettoyer les réfrigérateurs et continuer à jeter les matières indésirables.

Parce que si vous avez les matières indésirables dans votre réfrigérateur, le réfrigérateur est en fait un compresseur va travailler plus longtemps parce que tous ces matériaux doivent être amenez à 4 degrés après chaque ouverture.
Donc, si vous avez du matériel non désiré, vous devriez enlever cela de façon périodique que vous devez nettoyer le réfrigérateur et vous devez éteindre le réfrigérateur et vous laisser au réfrigérateur pour vous décongeler, car peu importe la glace qui est en construction doit être enlevée.
(Référez-vous à la diapositive: 13:18)

A part cela, chaque labo contient normalement les ordinateurs. Donc, c'est un ordinateur typique où vous avez ceci est le CPU, c'est le moniteur, vous avez le clavier et ensuite vous avez la souris ici aussi. La plupart des ordinateurs sont en fait soit s'il est connecté aux instruments, soit s'il est utilisé simplement pour votre propre usage personnel comme la navigation sur le net ou vous savez lire les articles de recherche que vous devez prendre en compte ou vous avez à très, très prudent sur le disque dur, les processeurs, les données et la propreté.

Donc, tout ce que vous savez le processeur ou tous ces ordinateurs de bureau ont les fans et les fans sont connectés à un cabinet. Donc, ce cabinet doit être nettoyé de façon périodique, de sorte que le ventilateur aura l'air pur puis le disque dur que vous devez continuer à faire la sauvegarde de données de parce que et vous devez continuer à défragmenter le disque dur. Donc, que le disque dur ne sera pas endommagé.

Le processeur doit également être au courant que vous devez travailler sur le processeur ainsi que les données que vous devez utiliser pour les données périodiques. Et puis vous devez faire le nettoyage des ordinateurs ce qui est présent dans votre labo et vous devez maintenir la propreté.
(Heure de la diapositive: 14:40)

Donc, ce sont les instruments mineurs comme les agitateurs magnétiques vortex, les bascules, les micro-ondes et les blocs de chauffage. Donc, ce sont les équipements mineurs qui n'ont pas besoin de beaucoup d'entretien, mais tous ces équipements sont très, très essentiels. Comme par exemple le vortex est utilisé pour mélanger les matériaux, des étriers magnétiques sont utilisés pour préparer les solutions, la bascule est utilisée pour rocher l'échantillon.

Donc, qu'il peut vraiment mélanger l'échantillon comme vous avez à utiliser la bascule pour effectuer la coloration du gel ainsi que pour le buvardage de l'ouest. De même vous avez besoin du micro-ondes au cas où vous voulez chauffer les échantillons comme si vous voulez préparer les gels d'agarose ou tout autre genre de vous savez que vous voulez faire les géloses LB et toutes ces sortes de choses. Et les blocs de chauffage sont nécessaires pour préparer les échantillons SDS et vous avez à tout ce que vous devez chauffer jusqu'à 100 degrés et tout ça.

Donc, ce sont les équipements mineurs qu'ils n'ont pas besoin de soins spéciaux, mais vous devez être très peu soigneux que vous devez les nettoyer, vous devez éteindre si vous ne les utilisez pas et tout ça.

(Référez-vous à l'heure de la diapositive: 15:54)

Donc, ce que nous avons en discussion sur les instruments de laboratoire communs. Nous allons maintenant discuter des procédures de laboratoire communes. Donc, ce que nous allons discuter sont les 2 procédures comme le nettoyage de la verrerie de laboratoire ainsi que la préparation de l'eau de haute qualité, pourquoi il est nécessaire de nettoyer la verrerie.
(Référez-vous à la diapositive: 16:13)

Parce que bon nombre des produits chimiques et biochimiques que nous utiliserons dans le milligramme ou dans la gamme des microgrammes. Toutes les contaminations pourraient constituer un pourcentage significatif de l'échantillon expérimental total. Donc, vous savez que les réactions biochimiques ou tout ce que nous réalisons dans notre laboratoire utilise normalement les produits chimiques de la gamme des milligrammes ou de la gamme de microgrammes. Donc, si vous avez un

Très faible, même une petite quantité de contamination de votre expérience précédente qui pourrait être un pourcentage important de l'échantillon existant.

Donc, cela pourrait interférer dans les réactions, il pourrait être possible que vous avez des restes chimiques de votre réaction précédente et cela pourrait être un inhibiteur de votre enzyme. Et vous essayez d'exécuter l'acide enzyme et cela ne fonctionne pas parce que vous avez certains contaminants. Par exemple, si vous n'avez qu'un détergent simple et que vous essayez d'effectuer quelques expériences, le détergent pourrait être juste en train de tuer les cellules et ils font d'autres types d'artefacts.

Les nombreux processus biochimiques et biochimiques sont sensibles à un ou plusieurs des contaminants communs suivants, comme les ions métalliques, les détergents et les résidus organiques. Donc, c'est depuis la réaction biochimique ainsi que les sciences de la vie comme les cellules et tout ce qui est très sensible même pour la contamination mineure de ces matériaux. Nous devons être très, très attentifs à ce que nous nettoyions très soigneusement les produits de verre avant de les utiliser.
(Référez-vous à l'heure de la diapositive: 17:55)

Le nettoyage de la verrerie dépend également des contaminations. Par exemple, si vous avez les composés organiques ainsi que l'ion métallique comme contaminant qui adhère en fait à la paroi interne des contenants de verre. Vous devez laver les produits de verre avec le détergent dilué comme 0,5% dans l'eau, puis vous devez respecter les 5 à 10 fois le rinçage de l'eau et cela devrait être assez bon pour enlever les matières organiques ainsi que les métaux.

Vous vous souvenez que vous devez toujours rincer à l'eau distillée ou désionisée parce que, en fin de compte, vous voulez enlever tout le matériel. Donc, vous savez qu'il ne devrait pas y avoir de cas où vous êtes en fait enlever les ions organiques aussi bien que les ions métalliques. Mais au lieu de cela maintenant le détergent est présent que vous avez utilisé pour le nettoyage. Donc, le nettoyage est important, mais ou l'enlèvement du contaminant est important.

Mais en même temps, vous ne devriez pas avoir l'agent de nettoyage à rester là parce qu'alors il devient le contaminant à nouveau. Donc, vous devez laver très soigneusement les produits de verre avec l'eau distillée ainsi que l'eau désionisée. La contamination par les ions métalliques peut être grandement réduite de la verrerie par rinçage avec l'acide nitrique concentré suivi de la rincer à l'eau purifiée.

En dehors de cela, lorsque vous avez le quartz ou les cuvettes de verre, vous pouvez éviter de nettoyer la cuvette ou tout verre polie optiquement avec du KOH éthanolique ou d'autres bases solides, car cela causera l'extraction ou il rendra les surfaces très rugueux. Toutes les cuvettes doivent être nettoyées avec soin avec 0,5% de solution détergente ou dans un bain de sonicateur ou dans un laveur cuvette. Donc, avec la cuvette, qu'il s'agisse d'une cuvette à quartz ou des cuvettes de verre normales, vous devez être très, très prudent de ne pas pouvoir utiliser les produits chimiques durs comme le KOH alcoolique.

Vous devez utiliser le détergent doux et ensuite vous pouvez utiliser les sonicateurs ou vous pouvez utiliser le bain sonique parce que si vous les conservez dans un bain sonique, toutes les matières contaminantes vont être retirées.
(Référez-vous à la diapositive: 20:08)

Ensuite, le nettoyage de la pipette de verre, donc si vous vous souvenez de la section précédente, nous avons discuté de la façon dont vous savez utiliser le système de traitement des liquides. Donc, une fois que ces systèmes de traitement des liquides seront sales, alors vous devez les utiliser. Donc, les procédures spéciales sont nécessaires pour nettoyer les pipettes de verre dès que vous avez fini avec la pipette en verre parce que les pipettes de verre les extrémités sont très étroites.

C'est pourquoi, immédiatement après l'utilisation, chaque pipette doit être placée en pointe dans un cylindre vertical contenant des solutions diluées de détergent. La pipette doit être entièrement recouverte de la solution, donc dès que vous le faites avec la pipette, vous devez prendre un bécher de verre, puis vous trempez votre pipette en verre pour garder la pointe vers le bas. Après que plusieurs pipettes ont été accumulées dans la solution de détergent, la pipette doit être transférée et vous pouvez utiliser une rondelle de pipette qui peut être utilisée pour nettoyer les pipettes.

Si vous avez une pipette de verre avec des protéines comme contaminant, elle peut être facilement réduite par rinçage avec l'acide chromique. Donc, l'acide chromique est un acide spécial ce que vous pouvez utiliser pour pures la pipette de verre si vous utilisez les échantillons de protéines. Comme par exemple, si vous utilisez la pipette en verre à des fins de culture cellulaire, voyez dans les cas où vous prenez le sérum et tous les autres types de matériaux. Donc, ça va en fait recouvrir la surface intérieure de la pipette de verre et ça ne sera pas tout simplement par le détergent.

Donc, ce que vous avez à faire c'est que vous devez tout d'abord tremper la pipette en verre dans une solution d'acide chromique. Donc, l'acide chromique va vraiment endommager toutes les protéines dans vous savez qu'il va oxyder la protéine et c'est comme ça qu'il va vous donner le bon nettoyage.
(Référez-vous à la diapositive: 21:59)

Alors vous devez préparer l'eau, alors pourquoi il est nécessaire de préparer l'eau purifiée parce que l'eau courante du robinet qui est réellement dans notre maison et que vous utilisez simplement par les simples étapes de purification contient un certain nombre d'impuretés comme les matières particulaires comme le sable, la fente et tout ça. Ensuite, il a les matières organiques dissoutes, puis il a les matières inorganiques et les gaz, puis finalement il contient aussi le micro-organisme.

En plus de cela, il contient aussi les pyrogènes, les pyrogènes sont les sous-produits métaboliques ou en déchets ce que nous avons produit par les bactéries ou d'autres types de micro-organismes et ces pyrogènes sont très problématiques. Pour supposer que vous voulez utiliser cette eau à des fins de culture cellulaire, ces pyrogènes vont interférer dans la propagation des cellules. Il y a beaucoup de matériel que vous pouvez utiliser pour préparer l'eau de bien des façons.

Par exemple, l'échange d'ions de distillations, l'adsorption du carbone, l'osmose inverse et les filtrations membranaires. Distillation que nous venons de discuter comme comment utiliser les unités de distillation d'eau, vous pouvez utiliser les cottages d'échange d'ions. Donc, ça va vraiment enlever le positif aussi bien qu'un

Des ions chargés négativement ce qui est présent dans l'eau. Et cela va en fait faire de l'eau désionisée et cela va être utilisé pour la plupart des expériences biochimiques.

Ensuite, vous pouvez utiliser l'adsorption de carbone va aussi faire de même que les matériaux d'échange d'ions. Ensuite, vous pouvez faire l'osmose inverse ainsi que les filtrations membranaires. L'eau purifiée par l'osmose inverse de désionisation ou la distillation est très acceptable parce qu'elle vous donne la forme pure de l'eau. Il y a un problème si vous préparez l'eau par échange d'ions.

Comme je l'ai dit, vous savez si vous êtes en train de faire une eau désionisée qui va en fait parce que lorsque vous transfurez l'eau à travers une matrice d'échange d'ions, certains produits chimiques sont lessivés de la matrice d'échange d'ions et cela en fait. Ainsi, il rend l'eau désionisée, mais en même temps, le produit chimique qui est le moins de la colonne d'échange d'ions contamine en fait l'eau avec cette substance organique.

Et cette substance organique augmente en fait l'absorption ultraviolette de cette eau particulière. C'est pourquoi si vous faites une expérience où vous faites des expériences d'absorption comme si vous mesuriez l'absorption de ces solutions particulières préparées dans l'eau. Ensuite, vous ne devez pas utiliser l'eau désionisée à la place, vous pouvez utiliser l'eau qui a été préparée par les distillations.

Parce qu'en fait, cela ne va pas ajouter ces substances organiques et cela ne va pas augmenter l'absorption de l'eau dans la gamme UV. Donc, avec ça, je voudrais conclure ma conférence ici, merci.