Ce cours en ligne gratuit vous présente le monde de la biologie moléculaire. Nous explorons le rôle de la technique de la "réaction en chaîne de la polymérase" qui utilise une méthode enzymatique et une condition de cycle pour "amplifier" de nombreuses molécules d'acide désoxyribonucléique (ADN) qui ont la même taille et la même séquence. L'ADN est un acide nucléique qui est composé de deux blockchain de construction de nucléotides complémentaires. Ces "nucléotides" sont composés d'un groupe phosphate, de sucres à cinq carbones et d'une base d'azote. Nous expliquons le concept de "réplication de l'ADN", qui est un processus de duplication du génome entier avant la division des cellules. Nous examinons ensuite les quatre bases azotés qui se trouvent dans l'ADN et sont reliées dans un patron répété par liaison hydrogène entre les bases azotée. La liaison des deux brins complémentaires est appelée "hybridation". Des démonstrations, des problèmes, des exemples et des questions d'évaluation dans ce cours de formation vidéo dirigé par un instructeur sont conçus pour vous fournir une base complète qui vous permet de prendre des mesures sérieuses dans ce domaine.
Le cours commence par l'examen de la réplication de l'ADN et de la mise en place de la PCR. Les amorces sont de courts segments d'ADN qui servent de point de départ pour la synthèse de l'ADN. Nous étudions leurs structures secondaires et expliquons comment elles sont créées par une attraction intra-ou intermoléculaire à l'intérieur de l'amorceur, ce qui réduit éventuellement le rendement de l'amplification puisque la disponibilité des amorces monocaténaires est limitée pour le PCR. Nous illustrons l'utilisation du cycleur thermique, un instrument qui permet l'amplification de l'ADN à l'aide du PCR. Nous précisons que les amorces doivent être conçues de manière à ce qu'il n'y ait pas d'homologie, qui est la similarité des ancêtres communs, dans le modèle autre que le site cible. Il en résulte une liaison et une amplification non spécifiques. Ce cours vous apprend à reconnaître les avantages de l'utilisation de la technique PCR: vitesse, facilité d'utilisation, sensibilité et robustesse par rapport à d'autres techniques utilisées dans les tests de diagnostic clinique.
La technologie de la PCR est devenue la base d'un large spectre de tests de diagnostic clinique pour divers agents infectieux et peut détecter la présence de maladies infectieuses dans les échantillons de sang. Nous vous montrons comment l'apparition d'un frottis qui a des bandes visibles indique que l'ADN génomique a été complètement digéré et qu'il est approprié pour le transfert'Southern', contrairement à la buvardage Northern qui est utilisée pour détecter l'ARN. Nous fournissons deux exemples de méthodes utilisées dans le séquençage de l'ADN: Sanger et Maxam Gilbert. Nous nous sommes fait une plus grande attention aux techniques de PCR, aux méthodes de séquençage et de transfert, à l'amplification de l'ADN et à l'emplacement de la PCR dans la culture des tissus. Ce cours convient aux aspirants étudiants en biotechnologie, aux personnes qui cherchent à travailler en tant que biologiste ou même à ceux qui veulent simplement comprendre comment nos corps travaillent à leur niveau le plus fondamental.
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