Loading

Alison's New App is now available on iOS and Android! Download Now

Module 1: Adsorción proteica

Study Reminders
Support
Text Version

Set your study reminders

We will email you at these times to remind you to study.
  • Monday

    -

    7am

    +

    Tuesday

    -

    7am

    +

    Wednesday

    -

    7am

    +

    Thursday

    -

    7am

    +

    Friday

    -

    7am

    +

    Saturday

    -

    7am

    +

    Sunday

    -

    7am

    +

Vídeos:

Hola a todos, bienvenidos a otra conferencia para la Ingeniería de Entrega de Drogas y Principios. Voy a hablar más sobre la adsorción de proteínas.
(Consulte la hora de la diapositiva: 00:36)

Así que, hagamos un rápido resumen de lo que aprendimos en la última clase. Así que, en la última clase hablamos de las proteínas pre-adsorbentes en las superficies, lo que básicamente significa que si quiero un cierto tipo de respuesta de una superficie, digamos si quería ligar esas células, entonces lo que puedo hacer, puedo añadir ligandos proteínas a la superficie incluso antes de ponerlo con las células, así que lo que sucederá es, estas proteínas se adsorben en la superficie y directamente empezarán a interactuar con la célula con su determinado receptor de coñado.
Entonces, la ventaja aquí es, tengo mucho más control sobre mis superficies porque ahora están interactuando de la manera en que quiero que interactúen. Y entonces la certeza de que hay muchas aplicaciones de esto que usted puede variar a la clase de modular esta respuesta que usted está recibiendo. Entonces hablamos de un modelo que se está utilizando para estudiar la adsorción de proteínas uno de eso era un modelo monolayer. Entonces, ¿qué es? Significa que digamos si tengo una superficie, sólo significa que sólo habrá una capa de proteína, que se adsorbe en la superficie para cubrir lo que sea área expuesta y una vez que esa capa tenga un adsorbente no se producirá más preabsorción.
Así que, esa es la suposición en este modelo monolayer y de nuevo vamos a discutir hoy que esto en realidad no es cierto, pero por el bien de este modelo, será una orientación como esta no habrá más proteína que va a venir en adsorb aquí. Y luego al mismo tiempo discutimos sobre proteínas duras y blandas. Por lo tanto, lo que estamos diciendo es, hay algunas proteínas que son bastante duro significado con una bastante rígida que no cambian la estructura muy fácilmente la estructura es muy estable y luego hay algunas proteínas que son muy propensas a la desnaturalización, su estructura es fácilmente modificable. Por lo tanto, se llaman proteínas blandas.
Y luego hablamos de orientación y estructura proteica esencialmente diciendo que si de nuevo tengo una superficie que se expone a baja concentración de proteína. Por lo tanto, lo que sucederá es que, en la proteína que inicialmente está siendo adsorbida tendrá tiempo de expandirse en la superficie porque todavía tiene este lado abierto junto a él. Por lo tanto, se mantendrá en expansión hasta que el sitio se llene o la proteína llegue a su estado feliz en términos del equilibrio.
Así que este es un caso en un entorno de baja concentración mientras que, si tengo alta concentración entonces lo que va a pasar es, la proteína que se adsorbe inicialmente no tendrá espacio a la izquierda debido a la alta concentración ya que varias otras proteínas también tienen adsorción y tenderá a estar a una cantidad mayor en un área de unidad dada o la clase dada de la estructura de la proteína también seguirá siendo más o menos rígida o realmente no cambiará mucho.
Y luego hablamos de la humectabilidad de la propia superficie. Entonces, lo que estábamos diciendo es si tenemos superficie hidrofóbica, lo que significa que tiene poca capacidad de humectación; entonces tenderá a formar lazos muy fuertes con las proteínas, porque el ambiente del agua exterior no está compitiendo con él y los dominios hidrofóbicos tenderán a interactuar con esta superficie hidrofóbica, así como la superficie tampoco quiere interactuar con el agua. Por lo tanto, hay un proceso impulsado enérgicamente, que causa mucha más interacción entre la proteína y la superficie hidrofóbica en comparación con dejar que digamos que esta es una superficie muy hidrofílica y luego las proteínas le adsorben la célula, pero su afinidad a la superficie será mucho más baja.

(Consulte la hora de la diapositiva: 04:18)

Así que, ahora, habiendo hecho todo esto, como he mencionado brevemente este modelo de monocapa es un modelo que no es realmente bien aceptado en este momento porque cada vez más investigación ha demostrado que en realidad sí forma múltiples capas de proteína en una superficie. Por lo tanto, para explicar esto simplemente se propone otro modelo es un modelo multicapa.
Y lo que esencialmente significa es que hay una estructura 3D a una proteína esta interfaz. Así que, aunque tenga una superficie, podría haber varias capas de proteínas que van a venir y unirse a ella. Y esencialmente lo que sucederá es su definido como una especie de corona dura y suave. Por lo tanto, una corona dura se define como algo que es bastante estable en una superficie, es muy difícil arrancar esta proteína de la superficie. Por lo tanto, algo que está directamente interactuando con el material y es muy cercano al material se llama típicamente una corona dura y algo que luego viene y luego interactúa con esta corona dura se llama una corona suave.
Y toda la razón para que suceda la corona suave y esto podría ser nanopartícula o el implante, no tiene que ser una partícula que podría ser un dispositivo a granel y la razón de que este suave corona empezar a interactuar con la corona dura porque esta corona dura tiene en realidad un cambio en la estructura. Por lo tanto, esto no se representa en esta imagen, pero digamos que esta proteína circular ahora se ha convertido en elíptica donde su adsorbente. Por lo tanto, ahora ha expuesto nuevos sitios al cuerpo que nunca fueron expuestos anteriormente. Así que, ahora, podría haber otra proteína que viene y una especie de agregados a estos sitios expuestos y tiene cierta afinidad con ellos. Por lo tanto, es por eso que se obtiene la corona suave y puede que no sea una interacción muy fuerte en ese punto, pero que célula alguna interacción con él.
Así que, como de nuevo se representa aquí también, así que usted tiene una superficie física, entonces usted tiene una cierta cantidad de proteína que viene y luego hay alguna otra proteína que viene encima de esas proteínas y esto esencialmente crea toda una corona de proteína alrededor de una partícula.
(Consulte la hora de la diapositiva: 06:34)

Y luego hay otro concepto llamado adsorción competitiva. Por lo tanto, lo que esto es, es la proteína adsorbida de equilibrio en la composición se define por cuánto es la proteína total primero en el sitio y luego cuál es la concentración de proteína relativa. Entonces, esto es un fenómeno muy complejo y muy mal entendido para la mayoría de los materiales que utilizamos y luego la cinética de esto también se ha vuelto importante. Así que, lo que esencialmente está diciendo es, es de nuevo si tengo una superficie, primero de toda la cantidad de proteína que está llegando depende de la cantidad total de proteína que se está adsorbiendo.
Depende de cuántos tipos de proteínas hay, entonces también dependerá de cuáles sean sus concentraciones. Por lo tanto, todo por supuesto, no todas las proteínas tendrán la misma concentración-algunos tendrán muy alto, algunos tendrán muy bajo y entonces la cinética también se vuelve importante. Así que, si decimos una proteína a pesar de que es una concentración más baja, se adsorbe completamente en la superficie muy rápidamente, entonces esos dominarán o de otra manera sucederá viceversa para otro tipo de situaciones.

Por lo tanto, la cinética de estas proteínas de adsorción y de nuevo la cinética de diferentes proteínas será diferente y entonces también depende del tiempo y la ubicación del implante y por qué estoy diciendo que es porque lo que va a pasar con el tiempo es decir que el medio ambiente está cambiando, hay más células que entran, están secretando más proteínas y las concentraciones de proteína está cambiando, los tipos de proteínas están cambiando y debido a eso lo que va a pasar es este equilibrio que se está manteniendo va a cambiar constantemente o si el implante en realidad está en movimiento o nos deja su una partícula que es atravesando el cuerpo y luego, por supuesto, usted tendrá diferentes efectos teniendo lugar en ese momento.
Por lo tanto, esencialmente diciendo que la capa adsorbida de esta composición es bastante dinámica y típicamente como antes describí la corona dura todavía es bastante estable, pero puede ser dinámica y lo que también puede suceder es que inicialmente las proteínas que son adsorbidas pueden ser desplazadas por otras proteínas con el tiempo con muy alta afinidad. Así que, digamos si tengo una proteína adsorbente en una superficie con una cierta afinidad x y luego tengo otra proteína con una afinidad de 4 x, a pesar de que esta proteína está en una concentración más baja y tal vez ha tomado tiempo para difundirse a la superficie y x ya se adsorbe a ella, lo que sucederá es que esta proteína eventualmente será capaz de desplazar lentamente y lentamente esto y ser adsorbida allí porque un equilibrio dice que la afinidad más alta dominará sobre la afinidad más baja. Así que, a este fenómeno en particular, donde esencialmente las proteínas de mayor afinidad consiguen reemplazar las proteínas de menor afinidad de la superficie también se conoce como efecto Vroman-usted verá que usamos bastante en la literatura. Así que, sólo algo para recordar.

(Hora de la diapositiva: 10:08)

Así que, de nuevo sólo para resumir esta adsorción de proteínas, por lo que estamos diciendo que los materiales extraños sintéticos adquieren la bioractividad sólo después de interactuar primero con las proteínas disueltas.
Así que, quiero decir que incluso si tengo un material que no tiene sitios que puedan unirse a la célula, lo que sucederá es que las proteínas se adsorben a ella, estas proteínas tendrán sitios que pueden unirse a la célula y que es cómo pueden mediar la interacción celular y da bioractividad a la superficie.
Y cualquier tipo de interacción celular o interacción enzimática que va a suceder será mediada por esta capa de proteína. Y luego hay algunos principios de adsorción de proteínas.
Hay un sitio de adsorción limitado y por lo tanto, hay una gran cantidad de competencia que sucede entre las proteínas para clasificar a ser representado en la superficie y luego hay fuerzas de conducción esto podría ser varias cosas-podría ser la hidrofobicidad y todo.
Las superficies por sí mismas van a cambiar; quiero decir si estoy usando PLGA versus PEG versus digamos PLA versus PCL, todas estas tienen diferentes hidrofobicidad, hidrofilicidad, tienen diferentes grupos de superficie, tienen diferente interacción con las proteínas.
Por lo tanto, el tipo de proteínas que pueden absorber en estas superficies va a ser muy diferente y entonces de nuevo la actividad biológica de la proteína adsorbida varía en diferentes superficies como acabamos de discutir.
Por lo tanto, una vez que el adsorbente de la proteína, más cambia la conformación de la menor será su actividad. Por lo tanto, si una proteína que tiene una estructura como esta, se absorbe y se convierte en una estructura como esta, ha cambiado bastante estructura. Por lo tanto, su actividad puede ser severamente dañada o incluso no ser activa en absoluto mientras que, si la misma cosa se vuelve así su bastante similar. Por lo tanto, se puede pensar en un escenario en el que este puede ser todavía un 70-80 por ciento activo que cuando estaba en solución, por lo que estas cosas también pueden variar.
(Hora de la diapositiva: 12:11)

Así, de nuevo esto está mostrando cómo una nanopartícula en realidad interactuando con la célula, la célula no es realmente visto la superficie de nanopartículas directamente porque ya es adsorbida proteína en la superficie en menos de milisegundos y su interacción en realidad a través de la proteína adsorbida. Por lo tanto, se vuelve muy importante estudiar la adsorción de proteínas.
Y luego otra cosa interesante es, usted puede conjugar una partícula con varios ligandos que usted piensa que pueden ser utilizados para interactuar con la superficie de la célula, pero mira lo que pasó una vez que lo puso en los medios de comunicación hay una gran cantidad de la capa de adsorción de proteínas que ha entrado y este ligando objetivo particular no es ni siquiera accesible a la célula. Puede ser accesible en algunos casos depende de la superficie y el ligando en sí, pero esto es algo a considerar mientras usted pone estos ligandos que pueden no ser realmente interactúan directamente con la célula.

(Hora de la diapositiva: 13:08)

Y hablemos de cómo podemos estudiar esta cuantificación de proteína en la superficie. Por lo tanto, una cosa es hacer una página de SDS. Y así, es bastante sencillo lo que haces es que pongas tu implante o partícula e incuba con déjenos decir suero y así, lo que va a pasar es, lo que sean las proteínas que sean diferentes vendrán y el adsorbente y el suero es solo un ejemplo lo puedes poner en algún otro fluido, tal vez si lo vas a dar a los pulmones a la innovación, lo vas a poner en el líquido pulmonar o el lavado, si lo vas a dar por vía oral tal vez lo puedas poner con saliva.
Por lo tanto, hay todos los diferentes tipos de fluidos biológicos que pueden ser utilizados-depende de la aplicación. Por lo tanto, una vez que estas proteínas se han recubierto en este implante, usted toma este implante me refiero de nuevo, ya que dije que esto es una cuestión de milisegundos de lo que estamos hablando. Por lo tanto, puedes dejarlas por unos minutos y tomar el implante que centrifugar para eliminar cualquier cosa que sea externa y resuspender nos deja decir en agua y una vez que hayas hecho eso, puedes usar una PÁGINA DE SDS.
Por lo tanto, SDS es de nuevo un detergente muy fuerte. Por lo tanto, lo que hace es esta desnaturalización completa de la proteína e interactúa con la proteína en una afinidad tan alta que se desprende de este implante tanto la corona dura como la corona suave. Y entonces usted puede simplemente ejecutar un gel de PAGE que no es nada, sino como gel que separa la proteína en la base de su tamaño o peso molecular y en ese sentido, entonces usted puede estudiar qué todas las proteínas están allí a través de la mancha occidental.

Por lo tanto, espero que todo el mundo sepa que el blotting occidental-todo lo que es para transferirlo a una membrana y luego una vez que su transferencia a una membrana digamos ahora que esta es la membrana en sí puede venir con anticuerpos contra las proteínas conocidas. Así que, digamos si estoy prediciendo que la fibronectina es una de las proteínas que se está implicando, voy a entrar con el anticuerpo de la fibronectina e incubar con esto. Por lo tanto, si la fibronectina es una de las proteínas que estaba en el implante, entonces este cuerpo vacío se va a ir y se une a la fibronectina y puedo etiquetar este anticuerpo con algún fluoróforo inicialmente, por lo que eso va a comenzar fluorescente o puedo poner alguna enzima y permitir algún color alrededor de esta banda.
Así que, de esa manera puedo saber que la fibronectina presente en este medio o su no presente en este medio y de manera similar se puede hacer por varias otras proteínas. Así que, de nuevo de esta manera es bastante semi-cuantitativo, no muy cuantitativo. Otra buena manera de hacer esto es usando algo bien una resonancia de plasma de superficie que es de nuevo muy ampliamente utilizado. Por lo tanto, su altamente sensible y depende del dieléctrico de la superficie. Por lo tanto, lo que puedes hacer es, puedes tomar tu superficie que quieras probar. Así que, eso es aquí; luego puedes recubrirlo con alguna capa de metal. Por lo tanto, en este caso digamos si hemos recubierto con oro.
Por lo tanto, una vez que las proteínas se adsorben a ella, el dieléctrico de esta capa de proteína en particular va a ser diferente de su superficie inicial y debido a que sus diferentes pueden brillar una luz-su ir a dispersarse de manera diferente y se puede leer a través de un detector y que va a darle un efecto de plasmón de la superficie porque el dieléctrico se cambia y a través de que usted puede entonces cuantificar mediante la ejecución de algunos estándares de cantidades conocidas, usted puede entonces cuantificar si la proteína es primero de todo adsorbing e interactuar con la superficie.
Y luego, en segundo lugar, si es entonces cuál es la cantidad de proteína que viene en la superficie porque este dieléctrico estará directamente relacionado con la cantidad de la proteína que ha venido y adsorbe en la superficie. Por lo tanto, esa es una forma en la que se puede estudiar la adsorción de proteínas.

(Consulte la hora de la diapositiva: 17:23)

Por lo tanto, lo que haremos es, vamos a tomar un ejemplo de la literatura-esto es sólo para ordenar una idea de cómo está sucediendo la investigación. Por lo tanto, este es un documento que se publicó hace un tiempo atrás en el 2010 y se trata de cómo la nanopartícula puede inducir el desarrollo de una proteína llamada fibrinógeno y este despliegue entonces resulta en la señalización a través de un receptor llamado receptor Mac- 1 y que causa la inflamación. Por lo tanto, aquí es sólo un ejemplo de cómo un material extraño que se introduce causa la inflamación. Por lo tanto, es más una mesa mecanicista.
(Hora de la diapositiva: 17:59)

Por lo tanto, lo que los autores han hecho en este artículo es que han tomado nanopartículas de oro. Por lo tanto, esta es una nanopartícula de oro, han revestido estas nanopartículas de oro con polímeros-durante la síntesis utiliza varios polímeros y uno de ellos es PAA que es el ácido poli acrílico.
Entonces, ¿qué han hecho? Han revestido el oro con ácido poli acrílico y luego lo han incubado con una proteína llamada fibrinógeno-su muy ampliamente disponible proteína y se encuentra bastante abundante en nuestro suero también. Por lo tanto, y lo que han demostrado en este artículo es bien esta adsorción sucede, activa Mac-1 en las células inmunes o en realidad en otras células de mamíferos.
Y una vez que activa Mac-1-Mac- 1 entra en el núcleo que la señalización entra en el núcleo y provoca la regulación up de la vía NF-kB que es una muy conocida por ser un regulador maestro para la inflamación y que provoca la liberación de un montón de citoquinas inflamatorias y que puede causar algunas reacciones en el cuerpo, se puede empezar a conseguir fiebre-muy similar respuesta a cuando nos enfermamos.
(Hora de la diapositiva: 19:41)

Por lo tanto, vamos un poco más profundo, así que lo que hicieron es que hacen tres tamaños diferentes de partículas. Así, 5,10 y 20 nanómetros de tamaño -esto es el diámetro y luego lo que hicieron es, incubaron esto con suero y luego el mismo proceso que acabo de describir con la SDS-PAGE. Por lo tanto, esto es sólo una SDS-PAGE. Por lo tanto, lo que se puede ver aquí es varios tipos de proteínas han entrado y adsorbente en estos y lo que se ve aquí es 5 nanómetro tiene un poco de proteína y luego 20 nanómetros tiene menos proteína para la misma cantidad de

el oro. Y lo que observaron principalmente fue que las cadenas de 65, 55 y 45 kDa de fibrinógeno eran muy abundantes.
Así que, esencialmente cuando hablo de esto, estoy mirando a los 65 que es este tipo, el 55 que es este tipo y luego el 45 que es este tipo. Por lo tanto, estas tres bandas eran muy prominentes cada vez que hacían este experimento. Entonces, entonces descubrieron que esto no es en realidad nada, sino tres cadenas diferentes de fibrinógeno.
(Consulte la hora de la diapositiva: 20:48)

Por lo tanto, eso es lo que están describiendo aquí. Por lo tanto, el fibrinógeno comprende de tres cadenas de proteínas el alfa, beta y gamma y este es el nanómetro de la molécula de confirmación-bastante grande 45 y es un dímero. Por lo tanto, lo que se muestra además es que este término C que está bastante cubierto en una estructura de proteína normal como se puede ver aquí tiene un sitio de unión para un receptor llamado Mac- 1 en una célula.
Por lo tanto, el receptor Mac- 1 puede venir y unirse a este sitio, aunque el sitio no está típicamente expuesto. Por lo tanto, el Mac- 1 no se une a fibrinógeno por sí mismo a menos que la estructura fibrinógeno esté algo dañada o desnaturalizada, de modo que este sitio Mac- 1 esté expuesto. Y entonces lo que esto mostró es que la adición de estas nanopartículas de oro revestidas PAA resultó en la pérdida de la estructura secundaria de proteínas. Así que, como podéis ver aquí, así que lo que han demostrado es, se trata de un dicroismo circular su a método que mide las estructuras secundarias en la proteína. Por lo tanto, las proteínas cuando se pliegan tienen estructuras como las hojas de hélice alfa y beta y otras también. Por lo tanto, estas hojas alfa hélice y beta tienen una cierta longitud de onda a través de la cual dan señales.
Por lo tanto, si esta es una estructura de proteína normal que la C en este caso. Por lo tanto, esta línea roja es una proteína normal, por lo que significa que si usted está recibiendo esta línea roja la proteína está en esta configuración en particular; pero como usted agrega más y más nanopartículas de oro a su solución lo que usted encuentra es que la estructura está realmente cambiando y usted puede ver esta señal que usted obtiene de la estructura secundaria en realidad está disminuyendo a medida que avanza.
Por lo tanto, se supone que esta es la concentración más alta. Por lo tanto, en este punto se está hablando de 10 microgramos por ml de fibrinógeno y dárselo a este 40 microgramos por ml de sus partículas de oro.
Y sólo para mostrar que el oro en sí no tiene ninguna estructura secundaria que sólo van a ejecutar sólo el oro. Pero así, lo que se puede ver es que hay un poco de cambio en la estructura o pérdida en la estructura secundaria, lo que realmente está demostrando el punto de que una vez que esta proteína pasa a las partículas, cambia de estructura.
(Hora de la diapositiva: 23:24)

Luego han demostrado que este fibrinógeno tiene unión selectiva para sus receptores Mac- 1. Por lo tanto, lo que han demostrado es que han usado células THP-1 que son monocitos humanos; y este THP-1 tiene un receptor Mac- 1. Y luego otra tienen el uso de HL-60 que no tiene un receptor Mac- 1.

Por lo tanto, lo que esto ver aquí es si usted acaba de poner la proteína, la cantidad de proteína que se une a la superficie de la célula es bastante baja, pero una vez que pone la proteína más la nanopartícula de oro se obtiene bastante proteína que va en la célula y la razón de eso es ahora porque el sitio del receptor Mac- 1 es ahora accesible, el receptor Mac- 1 en la superficie de la célula ahora puede unirse a

esto.
Mientras que, en la línea celular negativa no se ve eso y si se incuba con albúmina tampoco se ve eso, porque ya la albúmina ha revestido la partícula. Por lo tanto, la partícula no puede unirse al fibrinógeno. Por lo tanto, simplemente describiendo lo que acabo de decir que causa el despliegue y por eso puede interactuar con el receptor del Mac.
(Hora de la diapositiva: 24:47)

Y luego estos chicos siguieron adelante y muestran que los experimentos que haría con 20 nanómetros no mostraron ninguna proteína ligada significativa. Así que lo que han hecho es que esta es otra vez su proteína unida en estas células THP-1 y qué ver si usted tiene sólo fibrinógeno su estructura se conserva. Por lo tanto, eso no causa nada. Si tienes 5 nanómetros igual que la última cifra provoca mucha unión de la proteína. Si utilizas 20 nanómetros, que mostramos antes, no se une y cambia la estructura que mucho, ves de nuevo hay una reducción en esa proteína que se está adsorbiendo.

(Consulte la hora de la diapositiva: 25:27)

Y luego mostraron que puedes usar algún inhibidor de este receptor Mac- 1 en particular y así, si pones receptores que se unen al Mac-1, entonces tu proteína recubierta de fibrinógeno en la partícula no puede unirse a esto y así es lo que han demostrado aquí. Por lo tanto, la proteína unida en realidad está disminuyendo, mientras que, si usted usa otro péptido que no tiene afinidad, no hace nada. Por lo tanto, es una confirmación adicional de que este es el receptor Mac-1 que en realidad está interactuando con su proteína.
(Consulte la hora de la diapositiva: 26:02)

Y luego han salido adelante y demostraron que la unión del fibrinógeno activa la señalización de NF-kB. Por lo tanto, si tomas este último ejemplo lo que han hecho es que han añadido todas las fibrinógenas, las nanopartículas de oro PAA, así como el anticuerpo que se une al dominio NF-kB P65 y así, lo que puedes ver es por eso tienes un gran cambio.

Por lo tanto, si NF-kB digamos que fue para un ejemplo x kDa y digamos en un gel normal la x kD vendrá aquí. Una vez que se une al anticuerpo ahora su peso molecular se incrementa por x más el peso molecular de anticuerpos, por lo que ahora se ha ido y se ha desplazado hasta allí. Por lo tanto, una confirmación adicional de que en realidad esta nanopartícula de oro unido fibrinógeno no sólo está activando Mac-1, sino que están causando una mayor señalización en está realmente en causar una expresión de NF-kB.
(Hora de la diapositiva: 27:09)

Y luego de nuevo como dije NF-kB es un regulador maestro. Por lo tanto, segregará muchas citoquinas.
Por lo tanto, en este caso usted está viendo IL-6, IL-8 y TNF alfa que son ambas citoquinas inflamatorias. Por lo tanto, su nivel de expresión sube cuando se tiene la señalización de NF-kB y que es de nuevo una causa importante de la inflamación que está sucediendo. Así, de nuevo las células THP-1 fueron usadas aquí que mostraron que la secreción de IL-8 y TNF alfa.

(Consulte la hora de la diapositiva: 27:38)

Y así, ¿la característica de la superficie realmente influye en la unión de proteínas? Entonces, lo que hicieron es, ahora el cambio de la superficie.
(Consulte la hora de la diapositiva: 27:45)

Así que, en este caso lo que hicieron es cuando hicieron estas partículas de oro que mantuvieron en la disminución de la concentración PAA, el PAA, como dije es Ácido Poliacrílico, que está altamente cargado negativamente. Así que, cuando use el 100 por ciento PAA usted consigue una partícula cargada bastante altamente negativa el potencial zeta es una manera de medir el cargo y a medida que disminuye esta cantidad de PAA la carga aumenta porque esta carga negativa está bajando y por lo tanto, lo que muestran más ahora es que su unión a proteínas en realidad está disminuyendo a las partículas de oro, ya que usted está cambiando la carga.
Por lo tanto, han reemplazado a PAA con este PDHA y están mostrando además que el cargo es lo que es responsable de la unión de esta proteína a la a estas células y si usted tiene una carga más baja, entonces su fibrinógeno no es vinculante a su partícula de oro o incluso si su unión, no está exponiendo Mac-1. Por lo tanto, esto como una densidad de carga superficial es crítico o de enlace fibrinógeno en este caso. Por lo tanto, creo que es donde vamos a parar y lo vamos a llevar más allá en la próxima clase.
Gracias.